下调TSP1表达抑制宫颈腺癌HeLa细胞生长及促血管生成能力的研究

目的 研究调控血小板反应蛋白1 (TSP1)的表达对宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移、凋亡、侵袭及促进内皮细胞成血管能力的影响。方法 构建表达TSP1基因的真核表达载体pcDNA3.1-TSP1及siRNA-TSP1,转染宫颈癌HeLa细胞,实验共分为TSP1基因过表达组(pcDNA3.1-TSP1转染组)、TSP1基因低表达组(siRNA-TSP1转染组)和未转染组(阴性对照组)。Real-time PCR、Western blot检测各组细胞TSP1的表达,CCK-8、划痕实验、流式细胞术、Transwell检测各组细胞生长情况,体外血管形成实验检测各组细胞促血管生成能力。结果 与阴性对照组比较,pcDNA3.1-TSP1组细胞TSP1 mRNA及蛋白表达上调,siRNA-TSP1组细胞TSP1 mRNA及蛋白表达下调,差异均有统计学意义(P<0.05);pcDNA3.1-TSP1组HeLa细胞的增殖、迁移、侵袭及体外促内皮细胞血管形成能力明显增强,差异均有统计学意义(P<0.05),但凋亡比例比较差异无统计学意义(P>0.05),而siRNA-TSP1组HeLa细胞...     

大鼠抗—HBs的单克隆抗独特型抗体杂交瘤细胞系的建立

用纯化的小鼠单克隆抗—HBs和纯化的大鼠多克隆抗—HBs免疫LOU/C大鼠,取免疫大鼠脾细胞与IR983F骨髓瘤细胞融合,获得两株(TD_1、TD_2)持续分泌抗—HBs的单克隆抗独特型抗体(抗—Id,Ab_2)杂交瘤细胞系。对TD_2进行了较全面的鉴定,TD_2的Ig类型为IgG,亚类为IgG_(2?),核型分析结果染色体数为65条。通过ELISA竞争抑制和中和抑制试验表明,TD_2所分泌的Ab_2既能被不同来源的抗—HBs所中和。又能被HBsAg.所竞争,且都呈现剂量依赖关系。将纯化的TD_2IgG免疫同系大鼠,诱导出了具有抗—HBs活性的抗—抗—独特型抗体(Ab_3)。上述结果证实,TD_2所分泌的单克隆抗体(McAb)是带有HBsAg表位内影像,具有HBsAg免疫源性的抗—HBs的单克隆抗—Id。     

精索内动静脉高位结扎iNOS的表达与睾丸生精细胞增殖和凋亡的关系

目的：探讨精索内动静脉高位结扎术后，诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase．iNOS）的表达与生精细胞增殖和凋亡的关系。方法：免疫组化结合计算机图像分析系统检测iNOS阳性细胞光密度值；免疫组化方法检测并计算PCNA增殖指数（PCNA-Labeling index，PI）；原位末端标记法（terminal deoxynucleotidyl transferase mediated dUTP nick-endlabeling method，TUNEL）检测生精细胞凋亡指数（apoptosis index，AI）。分析iNOS的表达与增殖、凋亡的相关性。结果：iNOS在术后3-15d表达增强，第7d呈强阳性表达。结扎组生精细胞PCNA增殖指数（PI）明显低于对照组（P〈0．01），凋亡细胞指数（AI）明显高于对照组（P〈0．01）。结论：精索内动静脉高位结扎，iNOS的表达与生精细胞PCNA增殖指数呈负相关，与生精细胞凋亡指数呈正相关。iNOS基因表达增强是生精细胞增殖减少和凋亡增加的重要原因。     

用电子自旋共振成像观测氮氧自由基的透皮特性

在自行研制的电子自旋共振成像(Electron spin resonance imaging, ESRI)系统上建立了活体皮肤电子自旋共振成像的实验模型.观测了氮氧自由基化合物2,2,6,6-四甲基哌啶-1-氧(2,2,6,6-tetramethyl-1-piperidinyloxy,TEMPO)穿透小鼠皮肤组织的动态过程和浓度分布情况.成像结果显示TEMPO化合物对不同方法处理后的皮肤组织的透皮特性有明显差别.TEMPO水溶液难以穿透皮肤,而溶解在二甲基亚枫(Dimethyl sulfoxide,DMSO)中的脂溶性TEMPO溶液可以渗入并穿透皮肤.皮肤表层的角质蛋白对TEMPO有明显的阻隔性, 而且化合物渗入或透过皮肤组织的量具有较强的时间依赖性.本研究结果提示ESRI技术为动态研究某些特殊结构化合物的透皮特性提供了科学有效的分析手段.     

重型颅脑损伤的脑脊液中SIgA的变化分析

分泌型免疫球蛋白A(SIgA)分子量为38万,广泛存在于人体外分泌液中,脑脊液(CSF)中SIgA增高多见于化脓性、结核性、脑肿瘤、神经病毒感染等。创伤性颅脑损伤时CSF中SIgA含量变化未见报道。本文对49例重型颅脑损伤、20例轻型颅脑损伤及21份正常CSF进行了比较差异明显,现报道如下。 对象和方法 一、对象:临床资料来自本院脑外科,重型颅脑损伤49例,轻型20例。 正常对照组11例来自排除中枢N系统疾病、生化及常规检验均正常之标本,10例为本院骨科外科小手术行腰麻术时所收集。     

分化抗原5C5在人免疫细胞的表达

目的　明确 5C5蛋白为分化抗原 ,检测其在人免疫细胞的表达 ,以及它的信号传导作用。方法　用 5C5蛋白免疫小鼠 ,制备抗 5C5蛋白的单抗。用反义技术制备 5C5蛋白表达抑制的 3D5细胞。用免疫荧光染色和Western印迹确定 5C5单抗的特异性。用胞膜蛋白免疫沉淀和流式细胞术确定其分化抗原的性质。用双色免疫荧光染色流式细胞术检测 5C5分化抗原在多种人免疫细胞的表达。用Fura 3 AM试剂作探针 ,用激光共聚焦显微镜观察胞内Ca2 + 浓度的变化。结果　制备了抗 5C5蛋白的特异性单抗。用 5C5单抗作探针 ,从 3D5细胞膜免疫沉淀到 1条相对分子质量 (Mr)为 19× 10 3的蛋白带 ,并在活 3D5细胞见阳性免疫荧光染色。 5C5分化抗原在人周围血CD19+ 、CD14 + 、CD4 + 、CD8+ 和CD5 6 + 细胞的表达率分别为 (33.4 7± 7.9) %、(86 .13± 6 .7) %、(15 .79± 7.1) %、(18.11±12 .77) %和 (11.76± 7.4 7) % ,在人免疫细胞株的表达率分别为 5 8.0 % (Nalm6 )、72 .7% (3D5 )、5 3.6 %(BJAB)、6 1.0 % (Daudi)、6 .9% (SKW6 )、6 .3% (Jurkat)、5 .8% (Peer)、2 1.3% (K5 6 2 )和 39.1% (U937)。3D5细胞在 5C5单抗刺激下 ,胞内Ca2 + 浓度逐渐增高 ,可达 2倍左右 ,对照小鼠Ig则无此作用。结论5C5蛋白为一个分化抗原 ,在人周     

骨髓增生异常综合征血清β2—m临床观察及意义

本文对31例骨髓增生异常综合征（MDS）患者进行血清β_2-微球蛋白（β_2-m）检测,为了解血清β_2-m水平在MDS中的变化,并对31例MDS患者不同病期进行了动态观察,现将结果报告如下。 材料和方法 一、对象: （一）正常对照组:其30例（男20,女10）,年龄19～58岁,均为本院健康职工,无肾、肝、血液等相关疾病。 （二）观察组:MDS共31例（男14,女17）,年龄14～65岁,其中MDS（RA）期9例;MDS（RAS）期4例;MDS（RAEB）期7例;MDS（RAEB-T）期6例;转化型白血病期5例。所有病例均经临床和实验室证实。按全国血液病学术会议拟定的MDS诊断和分型标准。 二、方法: （一）采用放射免疫分析法（RIA）,β_2-m试剂盒     

全头皮撕脱伤整张中厚皮原位回植(附6例报告)

我院 1989～ 1998年收治全头皮撕脱伤 6例 ,均采用撕脱之头皮制成整张中厚皮原位回植 期修复创面 ,获得较好效果 ,报告如下。1　临床资料1.1　一般资料 :本组 6例均为女性 ,年龄 2 0～ 30岁 ,均系长发被卷入高速旋转的机器致伤。伤后至入院时间最短 30min,最长 6 h。入院时合并休克 2例。 5例离体皮瓣随病人携入院 ,1例于入院后 2 h取回。撕脱范围均为全头皮 ,前侧为上眼睑缘上 0 .5～ 0 .8cm,后侧为后发际 ,左侧伴部分耳廓撕脱 2例。右侧伴耳廓撕脱 1例。头颅部大多为骨膜 ,3例伴骨膜缺损致颅骨裸露 ,裸露面积最大 12 cm× 8cm,最小 6 cm…     

Harrington及钢丝提拉复位固定治疗腰椎滑脱症

自 1 993年以来 ,我们采用椎板切除减压 ,Ｈａｒｒｉｎｇｔｏｎ系统撑开 ,钢丝通过椎弓根钉提拉椎体复位固定 ,横突间植骨治疗腰椎滑脱症 5例 ,经 6～ 2 4个月随访 ,效果满意 ,现报告如下。1 临床资料本组 5例 ,男 1例 ,女 4例 ,年龄 32～ 57岁 ,平均4 4.5岁 ,Ｌ5滑脱 4例 ,Ｌ4 滑脱 1例 ;Ⅱ度滑脱 4例 ,Ⅲ度滑脱 1例。2 结　　果术后 1周、1月、3月及半年摄Ｘ线片 ,3例Ⅱ度滑脱完全复位 ,1例Ⅱ度滑脱及 1例Ⅲ度滑脱复位至Ⅰ度。 5例中 3例腰腿痛症状完全消失 ,2例症状已明显改善 ,恢复正常工作 ,无再滑脱。手术方法　局麻下取Ｌ2 ～Ｓ2 …     

静滴蝮蛇抗栓酶致急性荨麻疹一例

精制蝮蛇抗栓酶具有降低血浆纤维蛋白原、降低血液粘度和降低血小板聚集的功能 ,从而有抗凝作用 ,用于治疗脑栓塞之急性期及恢复期、血栓闭塞性脉管炎、深部静脉炎、雷诺氏病、大动脉炎以及用于断肢 (指 )再植中抗凝。临床上用灭菌生理盐水或葡萄糖氯化钠注射液 2 5 0 ml溶解静脉滴注 ,每次0 .75～ 1.0 0 u,极量 1.2 5 u,1次 / d。本品可引起血清过敏反应 ,如发热、荨麻疹、胸闷、气促、恶心、呕吐等。为预防过敏反应 ,注射前应作过敏试验 ,结果为阴性者方可注射。但在使用过程中我们发现 1例用药前已作过敏试验 ,结果为阴性 ,而在静脉用药…