不同浓度姜黄素对脂肪变性L02细胞凋亡的影响

目的探讨不同浓度的姜黄素对肝脏细胞的影响。方法利用不同浓度的姜黄素诱导L02细胞检测细胞的活力,探索合适的有效姜黄素实验浓度。将脂肪变性的L02细胞分为24 h组和48 h组,分别用姜黄素不同实验浓度干预,流式检测脂肪变性的L02细胞的凋亡比例和caspase-3的活化情况。结果当姜黄素的浓度小于25μmol/L的时候,细胞的活力在80%以上,可以选择1、5、12.5、25μmol/L做为后续干预浓度。1μmol/L的姜黄素能显著降低脂肪变性L02细胞的凋亡比例。5μmol/L的姜黄素干预组对正常和脂肪变性的L02细胞凋亡和坏死均比例和对照组相当,而12.5、25μmol/L组对正常和脂肪变性L02细胞发生凋亡和坏死的比例显著升高。结论低浓度的姜黄素对脂肪变L02细胞有保护作用,而高浓度的姜黄素能激活L02细胞的凋亡途径,并且进一步引起脂肪变性的L02细胞的坏死,而不是发挥保护作用。这种诱导作用随着时间的延长而愈加明显。     

去整合素和金属蛋白酶17调控胰腺癌细胞增殖凋亡的机制

目的 探讨去整合素和金属蛋白酶17(ADAM17/TACE)调控胰腺癌细胞增殖凋亡的作用机制.方法 分别采用免疫组织化学及流式细胞仪检测58例胰导管腺癌组织及6株胰腺癌细胞株中ADAM 17/TACE的表达,用小RNA干扰(siRNA)技术去除胰腺癌细胞L3.6pl ADAM17/TACE mRNA及蛋白表达后,CCK-8试剂盒检测胰腺癌细胞L3.6pl的生长速度,Western blot检测ADAM17/TACE、凋亡相关基因PARP、增殖相关基因p27( p27kipl)表达.阻断表皮生长因子受体(EGFR)及丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(AKT)通路后,Western blot检测ADAM17/TACE及EGFR/p-EGFR、AKT/p-AKT的表达变化.结果 58例胰导管腺癌组织及6株胰腺癌细胞中ADAM17/TACE的表达阳性率均为100％.同亲代L3.6pl细胞比较,siRNA干扰ADAM17/TACE mRNA的表达后,L3.6pl细胞生长速度减缓(P＜0.05);p27kipl的表达明显增强;多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶(PARP)表达亦明显增强提示出现凋亡;分别阻断EGFR和磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/AKT信号通路后,ADAM17/TACE蛋白表达均增加.结论 ADAM 17/TACE调控胰腺癌细胞增殖,抑制其表达可致胰腺癌细胞凋亡,可能与PI3K/AKT信号通路相关.     

PPARγ在良、恶性肝病组织中的表达

选取56例不同类型的肝病组织切片，采用免疫组化检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）的表达。结果人肝组织中PPARγ表达因不同肝病类型而异，正常人肝组织PPARγ表达水平与肝硬化、肝癌等病变肝组织相比差异显著；肝囊肿、肝血管瘤等良性病变肝组织中PPARγ的表达亦明显强于肝硬化及肝癌组织的表达。认为肝组织中PPARγ表达减弱与肝硬化、肝癌病变的发生有关。     

拉米夫定耐药后联合阿德福韦酯治疗发生再耐药的慢性乙型肝炎患者的基因型及耐药位点分析

目的研究拉米夫定(LAM)耐药后联合阿德福韦酯(ADV)抗病毒治疗中发生病毒学突破的慢性乙型肝炎(CHB)患者的耐药位点和基因分型。方法收集2010年6月-2013年6月河南省人民医院收治的89例单用LAM耐药后,联合ADV抗病毒治疗的CHB患者的血清,应用实时定量PCR进行HBV拷贝检测,通过测序进行基因分型,并对rt N236T、rt A181V、rt M204V、rt L180M耐药位点进行检测。计量资料组间比较采用t检验,计数资料组间比较采用χ2检验。结果 89例患者单用LAM治疗后均发生LAM rt M204V位点突变,联合ADV治疗后,9例发生ADV rt N236T单位点突变,5例发生ADV rt A181V单位点突变,8例发生rt A181V+rt N236T双位点联合突变,累计ADV耐药率为24.7%(22/89)。89例患者的HBV基因分型中,C基因型82例,其中8例发生rt A181V+rt N236T双位点联合突变;B基因型7例。结论与B基因型相比,C基因型CHB患者单用LAM耐药后,联合ADV治疗中更易发生rt A181V+rt N236T双位点联合突变。     

livin和P53蛋白在胃癌及癌旁组织中的表达及临床意义

目的探讨livin和P53在胃癌及癌旁组织中的表达及临床意义。方法应用免疫组织化学方法检测40份胃癌组织及癌旁正常组织中livin和P53蛋白表达情况。结果胃癌组织中livin和P53蛋白阳性表达率分别为47.5%和52.5%,癌旁正常组织中阳性表达率分别为5.0%和12.5%,差异有统计学意义(P<0.05);伴淋巴结转移的胃癌组织中livin表达阳性率高于无淋巴结转移的胃癌组织(P<0.05),Ⅲ+Ⅳ期胃癌组织中livin及P53蛋白阳性表达率高于Ⅰ+Ⅱ期(P<0.05);livin与P53蛋白表达无相关性(P>0.05)。结论 livin与P53蛋白异常表达与胃癌的恶性生物学行为有关,其表达对临床上判断胃癌的预后有重要意义。     

过氧化物酶增生物激活受体γ激动剂对肝星状细胞α1(Ⅰ)胶原表达的影响

目的观察过氧化物酶增生物激活受体γ（PPARγ）激动剂15d—PGJ2对肝星状细胞株（HSC-T6）前胶原α1（Ⅰ）表达的影响，以进一步探讨PPARγ在肝纤维化进程中的作用机制。方法体外培养HSC—T6细胞。取对数生长期的细胞分为空白对照组、TGF-β对照组和15d-PGJ2处理组，TGFp对照组和15d—PGJ2处理组均给予TGF-β因子（终浓度3ng／ml）共孵育6h。15d—PGJ2处理组再用1、2、3μmol／L的PPARy激动剂15d—PGJ2作用24h。应用RT—PCR、Westernblot方法观察分析各组间肝星状细胞PPARy、前胶原α1（Ⅰ）基因表达的变化。结果15d—PGJ2能够显著上调PPARymRNA和蛋白的表达水平，15d-PGJ2处理组的相对吸光度值较空白对照明显升高（P〈0．05），而TGF—β对照组与空白对照组差异无显著性意义（P〉0．05）。在TGF-β刺激下，TGF-β对照组前胶原α1（Ⅰ）mRNA水平均升高，同空白对照组相比差异有显著性意义（P〈0．05）；15dPGJ2处理组细胞前胶原α1（Ⅰ）mRNA水平与空白对照组相比差异无显著性意义（P〉0．05），但与TGF-β8对照组相比，其表达明显受抑制（P〈0．05）。结论PPARy激动剂15d—PGJ2能够通过上调PPARy表达而抑制前胶原α1（Ⅰ）转录，提示PPAR7可抑制肝纤维化的发生发展。     

丙型病毒性肝炎与酒精性肝病的研究现状简

Alcoholic liver disease （ALD）and obesity-caused non-alcoholic liver disease are in a rising trend. ALD has become the second popular disease following the viral liver disease. A total of 90 % intaken alcohol were metabolized in the liver; long term alcohol consumption would induce liver cells to fat degenera tion, necrosis or even regeneration, and ultimately lead to ALD. Hepatitis C virus （HCV） infection is usually concealed and can gradually develop into cirrhosis and liver cancer. HCV infection plus alcoholism or ALD concurrently infected HCV can accelerate the development and progression of liver disease such as chronic hepatitis, cirrhosis and hepatocellular carcinoma. In this review, we summarize the research progress in epidemiology of alcoholic liver disease and chronic hepatitis C, the mutual influence between the two diseases, mechanisms of action, prognosis and antiviral therapy for hepatitis C infection.     

甘草甜素对脓毒症小鼠急性肺损伤保护作用的实验研究

目的探讨高迁移率族蛋白B1(HMGB1)抑制剂甘草甜素(Glycyrrhizin)对脓毒症小鼠急性肺损伤的保护作用及其可能机制。方法选择雄性Ba1b/C小鼠80只,将其随机分为假手术组、模型组、溶剂组、药物组每组各20只,采用盲肠结扎穿孔术制作小鼠脓毒症模型,造模成功后30min腹腔给予甘草甜素,术后6h麻醉处死、取标本;测定每组10只小鼠左肺叶组织的肺水含量,肺组织中白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)的表达量,采用免疫印迹法法检测每组8只小鼠右肺组织中HMGB1和TLR4表达量。结果假手术组、模型组、溶剂组、药物组小鼠的肺水含量分别为(69.3±0.01)%、(78.9±0.11)%、(8.1±0.15)%、(72.3±0.09)%,与假手术组相比,模型组和溶剂组小鼠的肺水含量显著增加(P<0.05),药物组与溶剂组相比,甘草甜素可以显著降低肺组织中的肺水含量,差异有统计学意义(P<0.05);同时药物组小鼠肺组织中HMGB1、TLR4、IL-6、TNF-α和IL-1β的表达量显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论甘草甜素对脓毒症小鼠急性肺损伤有治疗作用,有可能应用于临床上脓毒症患者的治疗。     

子宫内膜样腺癌27例临床病理分析

子宫内膜癌是发达国家最常见的妇科恶性肿瘤,美国和加拿大发病率最高,但是近年来发病率和病死率均有所下降。典型病例发生于老年人,在诊断时80%患者为绝经后妇女,然而任何年龄均可发生,甚至有子宫内膜癌伴宫内妊娠发生的报告[1]。1资料与方法1.1一般资料收集我院2008—2010年手术标本27例,均为手术切除标本。     

河南地区丙型肝炎病毒1b亚型ISDR变异对聚乙二醇干扰素联合利巴韦林抗病毒疗效的影响因素分析

目的探讨河南地区丙型肝炎病毒（hepatitis C virus,HCV）lb亚型干扰素敏感决定区（ interferon sensitivitydetermining region, ISDR）氨基酸序列变异是否影响聚乙二醇干扰素（pegylated interferon, PEG-IFN）联合利巴韦林（ribavirin,RBV）治疗慢性丙型肝炎（chronichepatitisC,CHC）的抗病毒疗效,评价其预测价值。方法对49例HCV1b亚型慢性感染者采用PEG-IFN／RBV联合方案治疗48周,并随访24周。定量检测血清HCV—RNA,RT—PCR扩增治疗前血清标本中HCV—ISDR片段并测序,MEGA4分析氨基酸序列变异度;二分类logistic回归分析各变量与持续病毒学应答（sustained virological response, SVR）之间的关系。结果SVR率为69．4％（34／49）;治疗前血清HCV的ISDR氨基酸序列与HCVJ株比较,12例为野生型（未突变）,36例为中间型（1～3个突变）,1例为突变型（≥4个突变）;二分类logistic回归分析显示,影响SVR的主要因素是ISDR氨基酸残基突变（OR=21．505,P=0．001）,其次是年龄（OR=0．876,P=0．042）;ISDR氨基酸突变数≥2个的CHC组所获得的SVR（13／14）明显高于氨基酸突变数〈2个的CHC组（1／15）（P〈0．05）,年龄≤40岁者SVR（14／I7）高于年龄〉40岁者（20／32）（P〈0．05）。结论河南地区HCV1b亚型ISDR突变型极少;PEG-IFN／RBV联合方案治疗中,对SVR有预测价值的为ISDR氨基酸突变数≥2个和年龄≤40岁。