双重实时PCR快速同时检测霍乱弧菌和副溶血弧菌

目的建立改良分子信标双重实时PCR同时检测霍乱弧菌和副溶血弧菌的快速方法,应用于霍乱监测、副溶血弧菌食物中毒的快速诊断和海产品检验。方法根据GenBank公布的霍乱弧菌肠毒素基因A亚单位(ctxA)和副溶血弧菌的耐热直接溶血毒素基因(TDH)的保守序列,分别设计引物和改良分子信标探针,以10种细菌作对照,建立双重实时PCR改良分子信标检测体系,应用于副溶血弧菌食物中毒快速诊断和霍乱监测。结果改良分子信标双重实时PCR反应体系DNA灵敏度为102.4～166.6fgμl,菌液灵敏度为32～64CFUml或3～6CFUPCR反应体系,无交叉反应。此反应体系同时检测40株副溶血弧菌和50株霍乱弧菌,均出现特异的荧光信号,两种细菌检测互不干扰。对3起细菌性食物中毒共48份样品和100份海产品进行检测,9份副溶血弧菌实时PCR阳性,其中7份副溶血弧菌细菌培养阳性,其余样品都为阴性。从样品处理到检测结果仅需1天时间。结论改良分子信标双重实时PCR检测体系快速、灵敏度高、特异性强,可用于霍乱和副溶血弧菌食物中毒的快速诊断,为食源性疾病的分子流行病学调查提供新的检测手段。     

早产和足月新生儿串联质谱筛查切值的建立

目的分析昆明医科大学第一附属医院新生儿遗传代谢病筛查中心不同出生胎龄新生儿干血斑中氨基酸、游离肉碱和酰基肉碱水平,并分别建立其参考区间,降低假阳性率或假阴性率,提高阳性预测值。方法选取2013年1月至2020年12月在昆明医科大学第一附属医院新生儿遗传代谢病筛查中心做串联质谱筛查检测的52526例新生儿干血斑标本作为研究对象,根据出生时胎龄不同分为早产组(32周≤胎龄<37周,n=5694)和正常孕周组(37周≤胎龄≤42周,n=46832),采用串联质谱法对其氨基酸、游离肉碱和酰基肉碱浓度进行检测及比较,并分别建立其参考区间(P_(0.5)~P_(99.5))。结果11种氨基酸及C0、C2、C3、C4、C5、C6、C8、C10、C14、C14:2、C16:1、C18:2的99.5%上限值,早产组高于正常孕周组;C6DC、C12、C16的99.5%上限值,早产组低于正常孕周组。C0的0.5%下限值,早产组高于正常孕周组;瓜氨酸、甲硫氨酸、C16、C18、C18:1的0.5%下限值,早产组低于正常孕周组。其余酰基肉碱的0.5%下限值与99.5%上限值在两组间无明显变化或相差不大。用重新设定的参考区间对部分筛查质量指标做前后对比分析,发现假阳性率在早产组和正常孕周组分别由8.17%、4.86%下降到3.72%、1.48%,差异有统计学意义(χ^(2)值分别为18.480、16.359,P<0.05);阳性预测值分别由0.56%、1.44%上升到2.17%、3.41%,差异有统计学意义(χ^(2)值分别为11.898、12.149,P<0.05)。结论不同胎龄新生儿氨基酸、游离肉碱和酰基肉碱浓度存在差异,分别建立了不同胎龄新生儿氨基酸、游肉离碱和酰基肉碱筛查的参考区间,为新生儿氨基酸、脂肪酸和有机酸代谢障碍性疾病的筛查及诊断提供了参考依据。     

幽门螺杆菌分离培养技术的改进

探讨自制的改良布氏活性炭巧克力培养基,置厌氧罐蜡烛培养环境分离临床粘膜标本幽门螺杆菌(Hp)的检出率.结果表明66例粘膜标本中分离出Hp54株(81.8%),44株Hp滤液有24株(54.5%)具有细胞毒活性,其中26例消化性溃疡患者有18例(69.2%),18例慢性胃炎患者有6例(33.3%)为Hp(Toxin+)感染.结果提示通过对Hp生物学性状和毒素的检测结果证实,该法可用于临床粘膜标本Hp的常规分离培养.     

经阴道、会阴超声诊断直肠肿瘤的临床价值

目的探讨经阴道、会阴超声诊断直肠肿瘤的临床价值。方法直肠灌水后经阴道、会阴超声检查直肠肿瘤病人28例,并与正常人20例,直肠腔内超声16例对照,同时5例肿瘤作了标本超声检查。结果 28例患者中,26例检出直肠肿瘤28个,其部位在距肛门口2.5～15cm范围内,2例经阴道、会阴超声未发现肿瘤。直肠灌水后经阴道会阴超声检查可直观显示肿瘤的形态,与标本超声显示一致;其病理分期的符合率分别为80.8％。发现淋巴结肿大5例。尤其对高位直肠肿瘤或肿瘤致直肠严重狭窄的病例或Miles手术后,更具有价值。结论经阴道、会阴超声可作为直肠肿瘤检查的补充方法。     

P53蛋白检测在女性生殖系统良恶性组织鉴别中意义的探讨

目的：探讨P53蛋白在鉴别女性生殖系统对交界性病变良恶性质和非典型增生恶变潜能意义,以提高病理诊断水平。方法：P53免疫组化染我应用S－P三步法。结果：P53表达见于癌组,阳性率52．38％（22／42）;非典组6．25％（1／16）;良性疾病组0％（0／104）,各组比P＜0．005。结论：P53检测对鉴别交界性病变良恶性质和估测非内典型增生恶变潜能有效重要意义。     

外源性磷酸肌酸对开心手术病人的心肌保护作用

20例需行瓣膜置换手术的风湿性心脏瓣膜病患者 ,随机等分为 2组。实验组 (CP组 )于术前 2d静脉滴注护心通 ,总量为 4g ;对照组 (C组 )用 5 %G S滴注。结果示实验组的心脏自动复跳率明显高于对照组 ,而对正性肌力药物的需求、缺血再灌后的MDA活性增高及心肌超微结构的改变则较对照组明显减轻 ,两组间的心肌酶活性和心肌ATP含量差异无显著性。提示护心通是一有效的心肌保护药物     

生信分析肾阴虚型绝经后骨质疏松症分子机制及熟地黄靶向治疗

目的基于生信数据挖掘探究肾阴虚型绝经后骨质疏松症的病理机制及熟地黄的治疗靶点。方法通过GEO数据库挖掘阴虚型绝经后骨质疏松症患者差异表达基因,运用GeneCards及OMIM数据库预测骨质疏松症相关基因,采用R软件对阴虚靶点与骨质疏松靶点映射匹配。借助String数据库在线平台进行蛋白互作网络构建。分子对接预测熟地黄治疗阴虚型骨质疏松症的靶点。采用DAVID数据库进行生物过程及通路注释。结果通过分析得到差异表达基因1 272个,骨质疏松症靶点662个,阴虚型骨质疏松症相关靶点45个,主要涉及细胞凋亡调节、雌激素应答、骨骼肌系统发育等生物过程,并由PI3K-Akt、Wnt信号通路、MAPK信号通路、卵巢类固醇生成等信号通路调节。熟地2种有效成分能够作用于核心蛋白IGF1、VEGFA等。结论熟地黄可能靶向IGF1、VEGFA等核心蛋白,通过PI3K-Akt、MAPK等信号通路调节细胞凋亡及雌激素应答过程,从而实现防治阴虚型骨质疏松症的疗效。     

晚期妊娠合并子宫肌瘤256例临床分析

妊娠合并子宫肌瘤是较为常见的妊娠合并症，是产科常见的高危妊娠。其发生率约占子宫肌瘤的0．5％～1％，妊娠期发病率为0．3％～7．2％，近年来发病有上升趋势。由于肌瘤生长部位不同，可对妊娠、分娩及产褥期造成不同的影响，故处理是否合适直接关系到母儿健康。本文收集了我院2000年1月～2005年12月间住院分娩的晚期妊娠合并子宫肌瘤病例256例进行回顾性分析，现报告如下。     

脂多糖肺损伤CD4+T细胞及其亚型TH1、TH2细胞的凋亡

目的观察CD4     

组织多普勒成像和血流多普勒频谱研究冠心病患者左室舒张功能

目的：将组织多普勒成像（TDI）和彩色多普勒超声技术结合研究冠心病虱的左室舒张功能（LVDF）。方法：在心尖四腔心切面上用彩色多普勒超声检测80例心病患和79例相同年龄组正常人舒张早、晚期二尖瓣口血流频谱的最大速度（Vmax)时间速度积分（TVI）,同时用TDI技术检测左室外侧壁心肌收缩、舒张期运动频谱的Vmax和TVI,所有数据进行统计学分析。结果：两种技术所检测的正常人舒张早期峰的Vmax和TVI随着年龄的增长而降低,而舒张晚期峰的Vmax和TVI逐渐增高,冠心病患的数据变化与年龄关系不明显,主要与其心肌的病理变化程度有关,当二尖瓣口血流频谱出现“假性正常”、无法准确判断LVDF时,TDI技术的敏感性较高,它还可按检查的设计任意测量某一部位的心肌运动。结论：用血流多普勒频谱判断LVDF在一般情况下简单、方便。TDI技术可同时对左室收缩、舒张功能进行全面判断。