翻转胸舌骨肌皮瓣气管重建实验研究

目的探讨翻转双蒂胸舌骨肌皮瓣及去表皮翻转双蒂胸舌骨肌皮瓣修补气管缺损后的转归。方法以18只兔作为实验对象，在气管前壁造全层圆形缺损，分别用翻转双蒂胸舌骨肌皮瓣(皮瓣组)及去表皮翻转双蒂胸舌骨肌皮瓣(去表皮组)修补，于术后2、4、8个月处死动物，用肉眼及组织学切片观察。结果8个月时皮瓣组移植物与气管交界处可见假复层纤毛柱状上皮从外周长入，但中央大部分仍为复层鳞状上皮，而去表皮组移植物表面全部被假复层纤毛柱状上皮覆盖。结论去表皮肌皮瓣修补气管缺损较肌皮瓣容易转变为气管黏膜上皮。     

IDO基因修饰的软骨细胞对T淋巴细胞增殖的影响

为检测吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)基因修饰的原代培养软骨细胞对T淋巴细胞的免疫抑制作用。将pEGFP-N1-IDO真核表达载体转染至C57小鼠原代培养的软骨细胞,体外检测IDO修饰的软骨细胞培养液中色氨酸水平的变化;使用CFSE标记技术,检测IDO修饰的软骨细胞体外混合淋巴细胞反应中对同种异体T淋巴细胞增殖的影响。结果:pEGFP-N1-IDO成功被导入原代培养的小鼠软骨细胞,荧光显微镜和流式细胞术均检测到EGFP的表达;体外实验表明,原代培养的软骨细胞上清可检测到一定量的色氨酸水平,而转染IDO 24 h后的软骨细胞上清中未检测到色氨酸,提示IDO转染的软骨细胞表达了具有活性IDO;使用CFSE标记技术,检测IDO修饰的软骨细胞体外混合淋巴细胞反应中对同种异体T淋巴细胞增殖的影响,发现IDO基因转染组96 h后总体增殖指数为1.122±0.017,单纯淋巴细胞阴性对照组为1.026±0.016,阳性单纯软骨细胞组为1.201±0.026,较阳性对照组,IDO基因组同种异体T淋巴细胞增殖得到明显抑制。IDO基因修饰的软骨细胞可以抑制T淋巴细胞的增殖。     

喉气管狭窄重建术后喉功能恢复评价

喉气管狭窄治疗后患者喉气管功能的恢复状态缺乏有效的评价系统。为解决这一问题,设计喉功能恢复的评价方法,并对经手术治愈患者的喉功能恢复情况进行评估。     

两种方法制备兔小肠黏膜下层的对比研究

目的：比较两种制备方法所获兔小肠黏膜下层（SIS）的异同，为SIS作为组织工程细胞载体选择最佳制备方案。方法：分别采用消毒法（实验Ⅰ组）和顺序化学浸泡脱细胞法（实验Ⅱ组）处理机械剥离获取的兔小肠黏膜下层，进行组织学、扫描电镜检查及四甲基偶氮唑蓝（MTT）细胞毒性对比实验。结果：组织学及电镜扫描显示，与消毒法相比，经顺序化学浸泡脱细胞处理的SIS纯度高，孔隙多，安全性高，胶原纤维未受损；浸提液MTT检测各实验组相对增殖率均〉1，100％SIS浸提液各实验组与对照组吸光值均有显著性差异（P〈0．05），相同浓度不同SIS浸提液组间无显著性差异，表明多种化学试剂的SIS对软骨细胞不增加毒性，有一定促生长作用。结论：化学脱细胞法较消毒法制备的SIS安全性好，易保存，可操作性强，所获SIS是一种较理想的软骨细胞载体。     

临床医学研究生创新性教育中的问题与对策

临床医学研究生是我国医学研究中的一支重要力量。培养有创新意识和创新能力的研究生对临床医学事业的发展具有重要意义。然而 ,目前在临床医学研究生创新能力培养方面不尽如人意。本文分析了目前存在的一些问题并提出解决这些问题的相应措施     

困难条件下的气管切开术

目的：探讨困难条件下气管切开术的方法和经验,以期缩短手术时间,减少并发症,降低死亡率.方法：回顾性总结我科5年来施行的困难条件下气管切开术36例.结果：36例困难条件下的气管切开术全部获得成功,未出现严重并发症及与气管切开术有关的死亡病例.结论：环状软骨弓在绝大多数情况下都可作为气管切开术明显和稳定的参考标志.3度呼吸困难的患者,条件允许时最好先经口或经鼻插管,变紧急气管切开为常规气管切开,能降低手术意外的发生.     

丝裂霉素C对粘膜损伤修复作用的实验研究

目的　观察高浓度和长时间接触丝裂霉素C(MitomycinC ,MMC)对创面损伤修复的作用,以期为临床上MMC的合理应用提供依据。方法　将使用同种方法致鼻粘膜损伤的4 0只兔随机分为4组,每组10只。分别为生理氯化钠溶液对照组(A)和3组MMC实验组,B组药物浓度0 .4mg·ml-1、接触时间5min ;C组药物浓度0 .4mg·ml-1、留置;D组浓度2 .0mg·ml-1、接触时间5min。术后1月对各组粘膜愈合情况、病理形态学变化进行观察。结果　A组9例粘连,B组仅有2例粘连发生,B组与A组比较差异具有显著性的意义(P <0 .0 5 )。C组、D组均未有粘连发生。C组有6例鼻中隔穿孔,D组2例。光镜和电镜检查显示:A组成纤维细胞大量增殖,B组、C组、D组的成纤维细胞增殖受到抑制,B组创面修复良好,C组、D组中可见大量坏死细胞,粘膜上皮不连续,D组有结构异常的合胞纤毛和裸纤毛出现。结论　MMC能有效的抑制成纤维细胞增殖,但是高浓度和长时间接触MMC对于创面愈合均有不良影响。应用浓度0 .4mg·ml-1MMC ,接触时间5min对于鼻粘膜修复是安全、简单而有效的。     

带孔钛环外支撑游离皮片重建气管缺损的动物实验

目的 探讨带孔钛环外支撑游离皮片重建颈段气管缺损的可行性.方法 12只成年杂种犬随机均分为两组.实验组切除颈段气管前壁、侧壁约2/3周径,长约25 mm(4个气管环),制作人工气管缺损模型,取腹部全厚游离皮片修复气管缺损,皮片外部由带孔钛环悬吊支撑.对照组手术模型及缺损修复与实验组相同,但未放置钛环.术后1个月及6个月行X线及纤维支气管镜检查,观察钛环固定情况及管腔情况.术后6个月处死动物,病理检查移植物组织学变化.结果 实验组动物1只术后第5天出现伤口感染裂开,皮片坏死,钛环脱落排出,予以处死;其余5只存活,无呼吸困难;X线摄片示气管腔通畅,钛环固定良好,无移位、变形;纤维支气管镜检查见管腔通畅,管壁光滑,未见狭窄、挛缩及坏死,其中1只在远心端吻合口有少量肉芽,不影响呼吸.存活动物术后6个月处死后病理检查示移植皮片表面大部分覆盖假复层柱状上皮,但上皮覆盖不连续;未见到毛囊,毛发等皮肤附件结构.3只对照组动物术后24 h内死于窒息,尸检发现管腔塌陷皮片水肿;另外3只术后出现不同程度的呼吸困难,最长存活16 d,术后14 d纤维支气管镜检查示管腔塌陷狭窄.结论 带孔钛环可重建气管支架,游离皮片可作为气管黏膜替代物,是气管重建的简便方法之一.     

硒拮抗顺铂耳毒性作用的扫描电镜观察

扫描电镜观察了联合应用硒和顺铂后大白鼠耳蜗毛细胞的形态变化。发现单用顺铂组耳蜗毛细胞大片坏死脱落,联合用药组仅在3回有少量毛细胞倒伏,而与给药先后顺序无关。提示联合用药可减轻顺铂的耳毒性。     

以PGA为三维支架同种异体工程化软骨的构建

为探讨以聚羟基乙酸（PGA）为三维支架材料的同种异体软骨细胞构建组织工程化软骨的能力,采用胶原酶消化方法分离乳兔肋软骨获取种子细胞,收集体外培养传2-3代的软骨细胞,接种于经多聚赖氨酸处理的PGA支架材料上,将细胞-材料复合物种植在成兔皮下,一定时间取材,对获得的同种异体工程化软骨进行组织学评价。结果显示,软骨细胞体外培养1天后,在PGA支架上分布均匀;培养1周左右,PGA纤维间有呈蜘蛛网状基质产生。种植复合物4周取材可见PGA纤维未完全降解,软骨细胞不成熟,周边存在一定程度炎细胞浸润;8周取材,PGA纤维消失,软骨基本成熟,炎细胞浸润不明显。软骨基质含量丰富,分布与正常肋软骨组织学特征相似,提示以PGA为支架材料同种异体软骨细胞在有免疫力的动物体内可形成工程化软骨,无明显免疫排斥反应。