BMP／DBM关节腔内诱导成骨实验观察

目的 为观察骨形态生成蛋白与脱钙骨基质复合体在关节腔内与肌肉内诱导成骨过程的差异。方法 将兔ＢＭＰ／ＤＢＭ分别植入兔股骨髁部的软骨缺损内和股四头肌内。观察１、２、４和８周。结果 组织学显示ＢＭＰ／ＤＢＭ在关节腔内诱导成骨过程可分为三个阶段，第一阶段０￣２周，间充质细胞趋化期；第二阶段２￣４周，间充质细胞分化为软骨细胞；第三阶段４￣８周，软骨细胞生长并趋于成熟。结论 ＢＭＰ／ＤＢＭ能在关节腔内诱导成     

骨髓基质干细胞成骨能力的实验研究

目的：研究以骨髓基质干细胞(Bone marrow stem cells，BMSCs)为种子细胞，海绵状脱钙骨基质(Demineralized bone matrix，DBM)为细胞载体的组织工程块修复骨缺损的能力。方法：从兔股骨分离出的骨髓细胞经体外诱导分化条件培养，检测碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原的表达及钙结节的形成。将培养分化的兔BMSCs经5-溴-2’-脱氧尿嘧啶核苷(5-Bromo-2’-dexyouridine，BrdU)标记后接种到兔海绵状脱钙骨基质(sponge of DBM，sDBM)支架上，细胞接种密度为每块DBM种植(4～6)&;#215;10^6个细胞，然后分别植入兔背部肌肉内及兔桡骨中段10mm长的骨膜骨缺损内。对照组为骨缺损内单纯植入sDBM及空白组。术后观察6周。结果：经条件培养的BMSCs体外表达碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原及形成钙结节。体内异位植入含BMSCs的组织工程骨块可形成新骨组织，成骨方式类似软骨化骨。体内骨缺损修复实验结果显示组织工程骨块与单独sDBM均在6周完全修复骨缺损。新生骨骨密度测量组织工程骨块植入组虽然均值高于单独sDBM植入组，但差异无显著性意义(t=2．289，P=0．071)。极限压缩强度测量显示，组织工程骨块植入组新生骨生物力学强度已达正常桡骨的90％，与正常桡骨段差异无显著性意义(t=2．893,P=0．0623)；单纯sDBM植入组新生骨在生物力学强度为正常桡骨的86％。新生骨矿化率结果显示组织工程骨块植入组明显高于单独sDBM植入组(t=2．965，P=0．017)。结论：BMSCs体外诱导分化具有成骨能力，与sDBM结合后体内成骨，且能在6周修复骨缺损。组织工程新生骨生物力学强度、矿化率高于单纯sDBM植入组。     

多媒体数字化系统在细胞生物技术研究中的应用

目的在细胞生物学研究中,利用先进的多媒体技术对传统的图像资料采集方法进行改革,提高资料采集、储存和保管的质量。方法实验于2002-02/2004-05在解放军总医院全军骨科研究所完成。利用计算机、数码照相机、扫描仪、刻录仪、计算机图像采集系统、彩色激光打印机及各种软件收集和再现各方面的信息资料,按研究目的制作不同数据库及多媒体文件建立影像资料库,简化资料的处理过程。结果2002-02起建立细胞生物学多媒体数字化系统,截至2004-05,累计采集图像16万张,相关资料容量60G。结论此套系统效率高,成本低技术易掌握,资料分类、保存、查找容易,便于医学科研工作。     

嵌压固定法重建前交叉韧带动物模型（山羊）的手术配合

目的探讨嵌压固定法重建前交叉韧带动物模型（山羊）的手术配合方法。方法以山羊为模型，用阶梯状联合钻一次成形建立股骨倒置瓶颈状隧道，以髌腱一胫骨结节骨块为移植物，胫骨壁外口骨桥打结固定。做好手术前、中、后的配合，保障手术顺利结束。结果手术进程顺利，术后动物顺利康复，无麻醉死亡和术后早期感染发生。结论科学、细致的手术配合，可保证手术的顺利完成。     

兔骨髓源成骨细胞与人部分脱钙骨基质构建组织工程骨修复骨缺损的实验研究

目的：观察兔骨髓源成骨细胞与人部分脱钙骨基质构建组织工程骨的可行性及其骨缺损修复作用。方法：实验于2004-03／2005-01在哈尔滨医科大学第一临床医学院动物实验中心完成。①选取日本大耳白兔36只，雌雄不限，随机分成两组，即实验组和对照组各18只，每组再随机分成3小组即4，8和12周组各6只，另选3只日本大耳白兔作为空白组。②将实验组所有动物于胫骨结节处用骨穿针刺入骨髓腔抽取骨髓2．0mL，进行分离、培养和诱导，适时将功能状态良好的兔骨髓源成骨细胞以一定细胞浓度与人部分脱钙骨基质支架材料复合构建组织工程骨，并于复合后24．48和72h用扫描电镜观察细胞在支架材料孔隙内贴附、生长、增殖和功能情况。③所有动物于右侧桡骨中段制作1．5cm骨膜骨缺损模型，实验组骨缺损处植入组织工程骨，对照组骨缺损处植入人部分脱钙骨基质支架。于术后4，8，12周行X射线检查、大体观察，组织学检查，对比研究其成骨和血管化过程及其骨缺损修复能力。结果：①兔骨髓源成骨细胞与人部分脱钙骨基质复合后24h在材料孔隙内部分贴附良好，部分堆积成团；48h基本全部贴壁并有胶原分泌；72h全部贴壁，细胞完全伸展，相邻细胞间有突起相互连接，细胞分布均匀，数量增多，并有大量胶原分泌。②术后12周，实验组X线有明显阻射，骨缺损部位塑型基本完成，骨髓腔已开始再通；对照组支架材料X线阻射进一步增强，两端已愈合，已开始塑型。空白组术后无X射线阻射，无成骨。③实验组和对照组随着时间的推移其成骨量和新生血管数量逐渐增多，实验组4，8，12周组织学血管面积测定值均高于对照组[（2．068&;#177;0．216）％比（0．532&;#177;0．102）％，（2．976&;#177;0．304）％（1．302&;#177;0．354）％．（3．708&;#177;0．382）％比（2．246&;#177;0．402）％，P〈0．05]。结论：兔骨髓源成骨细胞与人部分脱钙骨基质生物相容性良好，支架材料为细胞生长提供了良好的三维空间，用兔骨髓源成骨细胞与人部分脱钙骨基质构建组织工程骨是可行的，构建的组织工程骨具有良好的骨修复作用。     

血清对体外培养成年人关节软骨细胞生长的影响

目的观察不同血清及血清浓度对成人关节软骨的细胞（AHAC）生长的影响，为软骨细胞移植的临床应用提供血清选择。方法用无血清、胎牛血清（FBS）和人AB血清及不同浓度血清在加或不加生长因子条件下培养成年人关节软骨细胞，比较细胞增殖和生长情况。结果对于AHAC，人AB血清培养优于FBS；合适的人AB血为10％；合适的FBS浓度为20％；无血清培养细胞增殖非常缓慢；不加因子用人AB血清培养细胞梭形化明显，加用生长因子后与使用FBS在形态上一致。结论10％浓度的人血清是AHAC体外培养的合适血清和浓度选择。     

化学去细胞神经同种异系(体)移植的免疫学反应

目的:观察化学去细胞神经同种异系(体)移植的免疫学反应,研究化学萃取去细胞处理对同种异系(体)神经抗原性的影响。方法:在W istar大鼠的背部和腹部皮下植入取自SD大鼠的化学去细胞神经,对照组植入新鲜同种异系(体)神经。用ELISA法测定大鼠血清内的抗体滴度。免疫组化染色检测各时间点异系(体)神经及周围组织中T淋巴细胞的浸润程度。结果:实验组和对照组2周、4周、8周、12周的大鼠血清均没有呈现阳性的抗体滴度。化学去细胞同种异系(体)神经移植组植入后2和4周时CD3 、CD4 和CD8 T淋巴细胞的浸润程度明显轻于未去除细胞的新鲜同种异系(体)神经移植组。8和12周时埋入的新鲜同种异系(体)神经已经被受体吸收,而去细胞同种异系(体)神经移植组的植入组织保持原形态,周围仅见极少量淋巴细胞浸润。结论:化学萃取去细胞同种异系(体)神经的抗原性明显降低,植入体内后免疫排斥反应不明显。     

人工椎体和椎间盘在胸腰椎结核中的疗效

[目的]总结框架人工椎体和椎间盘在胸腰椎结核中应用目的疗效.[方法]2002年4月～2006年7月收治具有24个月以上完整随访资料目的脊柱结核33例,其中椎体置换28例,椎间盘5例.胸椎体结核T7～13例,胸腰段T12L1、24例,腰椎体结核L1～516例.完全截瘫4例,不完全截瘫8例,有马尾神经综合征10例.20例有后凸畸形15.～45,平均25.69°.并发浸润性肺结核23例,结核性胸膜炎和淋巴腺结核4.一期彻底切除病灶,恢复病椎骨膜功能,营造病椎局部良好血运环境目的基础上,撑开椎体、纠正脊柱后凸畸彤、固定并维持脊柱稳定性、植骨重建缺损椎骨目的骨性结构.术后定期X线和CT检查手术椎节稳定性、运动功能和融合情况.[结果]随访时间24～51个月,其中36个月以上21例,平均37个月.除1例病灶复发,2例完全截瘫患者未完全恢复外,余30例恢复.20例后凸畸形纠正角度15°～30°,平均纠21.03°.其他病人最后一次复查骨重建理想、人工椎体稳定,血沉、血象等基本正常,骨结核治愈率96.97%.[结论]在全程、规律、足量、联合目的抗结核化疗保护下,切除结核病灶,一期应用框架人工椎体或椎间盘治疗由胸腰椎结核引起目的骨缺损及其并发症是可行目的.     

正常人与慢性牙周炎伴有骨质疏松患者牙槽骨组织培养细胞的生物学特性

目的 无菌取健康人和慢性牙周炎伴骨质疏松患者的牙槽骨组织，经体外培养，各建立一个能传代、冻存、复苏成活的种子细胞系。比较两种细胞系的生物学特性。为牙槽骨的缺损、修复、治疗提供理论和相关实验依据。方法 从原代培养出来的4个细胞系(H-171、H-258、261、262)中。选出牙周炎伴骨质疏松患者组细胞系H-171，正常组H-258，用组化、免疫组化等染色。观察细胞形态。用细胞计数法计算出两种细胞倍增时间和分裂指数。经过多次传代、冻存、复苏，比较细胞的生长、老化规律。结果 1．异常牙槽骨组，原代培养1次成功，细胞形态为短梭形，3次冻存，3次复苏均存活，其倍增时间为53．4h。平均分裂指数为4‰。细胞传代20次后，仍生长良好，以破骨细胞为主。2．健康牙槽骨组原代培养26例，因多种原因能传代的细胞系仅有3例，已传代10次，形态为长梭形，经2次冻存复苏，细胞存活、生长速度较H—171慢，倍增时间为65．9h，平均分裂指数3．5‰。3．两种细胞均贴壁生长，具有成骨细胞的特点：AKP、甲苯胺兰、PAS、四环素标记矿化结节组化染色及Ⅰ型胶原、BMP—2免疫组化染色均为阳性。结论 1．均具有成骨细胞特点。2．生长速度：H—171较H-258快，传代20次，生长活跃，H—258传到8代开始老化，生长速度减慢。     

镍钛合金钛与钛铌涂层防止Ni~(2+)析出的体内实验研究

[目的]探讨镍钛合金(N iTi)表面金属钛(Ti)、钛铌合金(TiNb)涂层后对N i2+析出的影响。[方法]成年犬18只,随机分为4组,N iTi组、Ti涂层组、TiNb涂层组各5只,空白组3只,分别于骶棘肌内和股骨内植入立方体试件和圆柱型试件各10枚,12个月后处死取材,用石墨炉原子吸收仪分别检测心、肝、脾,肺、肾、脑、骨、鼻咽粘膜、血液、肌肉、试件周围的骨组织和肌肉组织的N it2+含量。[结果]非修饰的N iTi组试件周围的骨组织和肌肉组织的N i2+含量与同组同种组织、异组同种组织的N i2+含量有显著差异(P<0.05)。[结论]本试验初步证明,N iTi表面金属钛、钛铌合金涂层起到了防止N i2+析出的作用。