生物骨替代材料成骨活性的体外测定

背景：传统骨替代材料成骨活性的检测方法为体内检测，在可靠性、时效性、直观性等方面存在着不足，特别是在检测大批量生物替代材料时其缺点尤为突出。 目的：探索一种能够在体外检测骨移植替代材料成骨活性的方法。 设计：对比观察的细胞学实验。 时间及地点：实验于2006—08／2007—05在解放军总医院全军骨科研究所进行。 材料：C2C12细胞由北京协和医科大学细胞中心提供，人脱钙骨基质、人骨提取的骨蛋白由解放军总医院骨科研究所提供，牛腱Ⅰ型胶原由北京益尔康生物工程开发中心提供，重组人骨形态发生蛋白2由杭州华东基因研究所提供。 方法：将重组人骨形态发生蛋白2、人脱钙骨基质、复合材料（人骨提取的骨蛋白与人脱钙骨基质、牛腱Ⅰ型胶原以透析的方法复合）3种材料与小鼠肌肉C2C12细胞共培养72h，阴性对照为单纯细胞，不加任何材料。细胞裂解后用比色法分别检测裂解液中成骨细胞特异性标记物碱性磷酸酶及总蛋白的吸光度值，以两者的比值表示单位数量的C2C12细胞所含有的碱性磷酸酶含量，以此衡量待测生物材料成骨活性的高低。 主要观察指标：碱性磷酸酶与总蛋白的吸光度值。 结果：重组人骨形态发生蛋白2材料中碱性磷酸酶含量最高，人脱钙骨基质材料合复合材料次之，阴性对照最低。3种材料中碱性磷酸酶含量与阴性对照比较差异均有显著性意义（P〈0．05）。 结论：体外检测生物材料诱导C2C12细胞产生碱性磷酸酶含量，可作为评定材料成骨活性的指标。     

周围神经趋化性再生的细胞和分子生物学机制

周围神经损伤的治疗是临床上的难题。以往研究主要集中在神经损伤后断端缺损的桥接修复和提高神经的再生速度，但实际上功能的恢复更取决于再生轴索能否精确地长入原先支配的靶器官。因此，充分理解神经趋化性再生的细胞和分子生物学基础，在治疗中运用神经再生趋化性理论，对促进神经功能恢复具有重要的意义。本文就周围神经再生趋化性理论及其细胞和分子生物学机制的研究进展作一综述。     

特殊人群弓形虫感染的血清流行病学调查

目的了解江苏省特殊人群弓形虫感染情况,为制定科学的防治措施提供依据。方法采用酶联免疫吸附试验检测特殊人群血清弓形虫IgG抗体,并配以相应的对照组作比较分析。结果人群血清弓形虫IgG抗体阳性率为7.19%,其中特殊人群抗体阳性率为8.30%,对照组阳性率为6.08%,有显著性差异(P<0.05),献血员和临床免疫功能低下者与对照组相比OR分别为4.67和6.67(P<0.05)。结论江苏省特殊人群血清弓形虫抗体阳性率高于普通对照组人员,献血员和临床免疫功能低下者与弓形虫感染有关联性。提示对特殊人群的重视,尤其是应加强对献血人员的弓形虫抗体检测以及对免疫功能低下者的保护。     

去细胞同种异体移植面神经材料的制备

目的：探讨如何构建异体组织工程化面神经,提供具有仿生结构的支架：方法：取8段长5cm、直径2mm兔的面神经,其中6段用3％三硝基甲苯和4％脱氧胆酸钠分别萃取1、2和3次,在萃取神经和未萃取神经的中段取材,行HE染色、Masson染色和S-100免疫组化染色,在光镜和电镜下观察神经萃取前后形态学的变化：结果：用三硝基甲苯和脱氧胆酸钠萃取后,面神经内的细胞消失,而纤维性支架结构与未经萃取的神经相仿,电镜下可见萃取后的神经由空的神经基底膜管和管之间的胶原纤维构成。随着萃取次数的增加,神经内残留的S-100蛋白显著减少,但反复萃取后神经的支架结构受破坏：结论：用三硝基甲苯和脱氧胆酸钠萃取2次可去除兔面神经的细胞而保留完整的神经基底膜管和纤维支架结构,是制备具有仿生结构的组织工程化面神经支架较为理想的方法。     

鲁西南地区强直性脊椎炎HLA—B27抗原相关性研究

为了解鲁西南地区强直性脊椎炎（ａｎｋｙｌｏｓｉｎｇ ｓｐｏｎｄｙｌｉｔｉｓ，ＡＳ）与ＨＬＡ－Ｂ２７抗原的相关性，对６５５例腰腿痛病人和１００例健康人进行了ＨＬＡ－Ｂ２７抗原检测。结果显示，确诊的３３８例ＡＳ中，ＨＬＡ－Ｂ２７抗原阳性率８９．０％，健康对照组ＨＬＡ－Ｂ２７抗原阳性率７％，其它腰腿痛病人Ｂ２７抗原阳性率８．３％．ＡＳ组与健康对照组相比差异非常显著（Ｐ〈０．０１）。遗传学分析表明，２０例     

基于磁共振图像的人体膝关节三维模型的建立

目的：建立人体膝关节三维模型，作为膝关节内部运动和受力分析的基础。方法：以磁共振图像作为数据源，通过域值法对图像进行预处理，并利用区域生长法进行图像分割，进而通过空间插值建立活体膝关节模型。结果：该方法建立的模型不仅包含股骨和胫骨骨端，而且包括了半月板和骨端软骨等软组织，更加符合膝关节内部的真实解剖结构。此外，该模型可以被导入有限元分析平台并用于股胫接触面的受力分析。结论：本方法适用于磁共振图像的膝关节模型建立，重建效果可以通过改变图像分割和空间插值的算法得以改善。     

化学去细胞同种异体神经移植的实验研究

目的探讨化学去细胞同种异体神经的免疫学特性及其修复灵长类动物神经缺损的能力。方法(1)分别获取SD大鼠的坐骨神经和猕猴的正中神经,经4.0%TritonX-100和72mM脱氧胆酸钠溶液重复消化处理,制备SD大鼠和猕猴的化学去细胞神经。在Wistar近交系大鼠的皮下植入化学去细胞同种异体神经和新鲜SD近交系大鼠的神经,检测植入部位组织内T淋巴细胞及其亚群的浸润程度。(2)用化学去细胞同种异体神经移植修复猕猴5cm长的正中神经缺损,通过功能观察、神经电生理检测、神经再生组织学、S-100免疫组织化学染色和运动终板染色观察神经移植后的效果。结果化学去细胞异体神经植入体内后,移植神经周围组织浸润的CD3+、CD4+和CD8+细胞数量明显少于新鲜同种异体神经移植的对照组。去细胞同种异体神经可以修复猕猴5cm长的周围神经缺损,在移植术后5个月患肢功能均有不同程度的改善。移植术后6个月神经电生理检测显示,刺激可以通过移植段神经到达远端的效应器,在神经支配区肌肉可以记录到运动诱发电位,跨过移植神经段的传导速度已达(40.5±6.8)m/s。神经再生组织学检查显示有再生的神经纤维通过移植段神经,在去细胞异体神经移植段内分布纵行排列的雪旺细胞,在支配区肌肉可以检测到重建的运动终板。结论化学去细胞同种异体神经的抗原性明显降低,可修复高等哺乳类动物的周围神经损伤。     

生长因子对成人关节软骨细胞的促增殖作用

目的观察不同生长因子对成人关节软骨细胞（adult human articular chondrocytes，AHAC）增殖的影响，探索AHAC体外大量扩增的方法。方法以酶消化法从成人关节软骨分离细胞，条件培养基培养；传2代细胞分别用不同浓度成纤维细胞生长因子2（fibroblast growth factor-2，FGF-2）、转化生长因子β1（transforming growth factor β1，TGF—β1）、血小板衍生因子bb（platelet derived growth factor-bb，PDGF-hb）、肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor，HGF）或其不同组合作用。用MTT法比较细胞增殖情况，用组化和免疫组化检测观察细胞表型变化。结果FGF-2、TGF—β1、PDGF—bb、HGF均有促AHAC增殖的作用，其最大效应剂量分别是50ng/ml、1ng／ml、1ng／ml、20ng／ml。5ng／ml FGF-2＋1ng/ml TGF-β1有最强的促增殖作用，继续加用PDGF—bb和（或）HGF无进一步促进作用；用这一因子组合培养AHAC，可以传10代以上，细胞扩增2000倍以上，且传9代细胞仍弱表达Ⅱ型胶原和aggrecan。结论FGF-2、TGF-β1、PDGF—bb、HGF均对AHAC有一定的促增殖作用；5ng／ml FGF-2＋1ng/ml TGF-β1有最大的促增殖效应，细胞短期内大量扩增，且在大量扩增的同时维持了一定的软骨细胞表型，因此是合适的AHAC体外大量扩增促进剂。     

化学去细胞同种异体神经的研究进展

周围神经缺损的修复以自体神经移植效果最佳。多年来，医学界不断寻找能替代自体神经的生物材料。Fawcett与Keynes认为理想的神经移植体应具备以下特征：（1）无免疫抗原性；（2）能较快地获得血运；（3）再生轴突能长入并通过该移植体到达远端部位；（4）通过移植体的轴突能成熟到具有正常的直径、髓鞘化和传导动作电位；（5）移植体内再生轴突能准确到达靶器官。与其它移植材料相比，化学去细胞神经除具备上述特征外，还具有与正常神经相似的特性，显示了良好的临床应用前景。     

BMP／BMC／SB修复大块骨缺损实验研究

目的对骨形态生成蛋白、骨髓细胞及煅烧骨所形成的ＢＭＰ／ＢＭＣ／ＳＢ生物复合体修复骨缺损的能力进行探讨。方法在雄性大白兔双侧桡骨中远段各作一１０ｍｍ骨缺损。右侧缺损内植入ＢＭＰ／ＢＭＣ／ＳＢ，左侧植入不含骨膜的自体皮质骨。结果术后８个月，在ＢＭＰ／ＢＭＣ／ＳＢ植入组骨愈合率为８８９％，自体皮质骨为４４４％。在新骨生成及塑形方面，ＢＭＰ／ＢＭＣ／ＳＢ组明显优于自体皮质骨移植组。结论ＢＭＰ／ＢＭＣ／ＳＢ在修复大块骨缺损方面优于自体皮质骨，是一种理想的人工骨材料