布鲁氏菌感染引起抗利尿不适当分泌综合征临床特点分析

目的 探讨布鲁氏菌感染患者临床出现低钠血症原因,其中抗利尿不适当分泌作为主要的低钠血症病因,探讨其临床特点。方法 回顾性分析2011年9月至2017年12月在北京协和医院因确诊或临床诊断为布鲁氏菌病住院治疗的患者共111例,其中血钠水平小于135 mmol/L诊断为低钠血症,总结患者病史、生命体征、检验检查结果,分析其低钠血症病因及临床特点。结果 111例诊断布鲁氏菌病患者中,14例住院期间存在低钠血症(12.6%),其中3例明确诊断抗利尿不适当分泌综合征、10例疑诊抗利尿不适当分泌、1例诊断全垂体前叶功能减退。布鲁氏菌病引起抗利尿不适当分泌的患者其白蛋白水平下降,血沉、超敏C反应蛋白明显升高,并存在感染性心内膜炎、感染性休克、贫血等严重并发症。结论 布鲁氏菌病患者临床低钠血症发生率不低,而其中抗利尿不适当分泌是引起其低钠血症的重要原因。     

消化道肿瘤术后经植入式静脉港与外周静脉通路化疗患者生活质量的对比研究

目的:比较经外周静脉中心静脉置管(PICC)与植入式中心静脉输液港(VPA)在消化道肿瘤术后化疗患者中的应用,两者在生活质量及自理能力方面的差异以及影响因素分析.方法:选择2013年10月至2016年6月的收治的消化道肿瘤术后化疗患者306例,以便利抽样的方法分为PICC组(对照组,n=155)与VPA组(实验组,n=151),对比置管方式对生活质量、自理能力的差异,分析其影响因素.结果:置管前,两组患者的生活质量评分无显著差异(P>0.05),自理能力评分有差异(P<0.05);置管化疗3周期后,实验组自理能力、生活质量明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05).影响两组患者生活质量的危险因素包括性别、肿瘤类型、病理分期.结论:置管前两组患者的生活质量评分无显著差异,置管后两组的自理能力和生活质量评分实验组明显高于对照组,提示VPA置管能提高患者的自理能力和生活质量,是消化道肿瘤术后化疗患者的优选深静脉置管方式.     

联合应用拉米呋定和乙肝免疫球蛋白预防肝移植术后乙肝复发的疗效观察

目的观察联合应用拉米呋定和小剂量乙肝免疫球蛋白预防肝移植术后乙肝复发的临床疗效。方法回顾性分析35例乙肝病毒（hepatitis B virus．HBV）相关终末期肝病患者行肝移植术后联合应用拉味夫定和小剂量乙肝免疫球蛋白的临床资料．观察此方案对预防肝移植术后乙肝病毒再感染的疗效。结果4例肝移植术后发生乙肝复发,复发率11％．其余31例病毒标志物均为阴性。结论联合应用拉米呋定和小剂量乙肝免疫球蛋白可以有效地预防乙肝病毒相关终末期肝病肝移植术后乙肝复发,小样本短期随访效果满意,有待于进一步大样本长期观察     

低强度脉冲超声经整合素-FAK-p38 MAPK通路对膝关节脂肪垫共培养下软骨细胞的影响

目的观察低强度脉冲超声(LIPUS)通过整合素-黏着斑激酶(FAK)-p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路对膝关节脂肪垫共培养下软骨细胞的影响。 方法24例女性膝脂肪垫及膝关节软骨均由骨科手术室提供,年龄25～35岁,均为膝关节急性外伤手术患者,排除其他膝关节病史。切取脂肪垫行苏木精-伊红染色(HE);制作脂肪垫培养液(FCM);于表面完好部分提取正常软骨细胞进行体外培养,按随机数字表法分成对照组、模型组（正常软骨细胞+FCM）、治疗组（正常软骨细胞＋FCM＋LIPUS干预）和抑制剂组（正常软骨细胞＋FCM＋LIPUS＋整合素抑制剂GRGDSP干预）。采用Ⅱ型胶原(COL2)免疫细胞化学染色法比较并鉴定对照组与模型组的软骨细胞。治疗组和抑制剂组接受LIPUS辐射,LIPUS辐射强度为40mW/cm2,每次辐射20min,每日1次,每周6d;其余各组接受LIPUS假辐射。第6天收集各组细胞,应用免疫印迹(Western blot)技术检测软骨细胞中Ⅱ型胶原、蛋白多糖(Acan)、基质金属蛋白酶(MMP)-13、整合素β1、磷酸化FAK(p-FAK)、磷酸化p38(p-p38)的蛋白含量。 结果免疫细胞化学染色显示,模型组软骨细胞表达的COL2免疫反应物显著少于对照组。Western blot检测显示,模型组COL2、Acan蛋白含量［(0.16±0.04)、(0.12±0.02)］较对照组［(0.55±0.03)、(0.62±0.03)］降低,MMP-13、整合素β1、p-FAK和p-p38蛋白含量［(0.49±0.04)、(0.34±0.04)、(0.33±0.05)和(0.51±0.04)］较对照组［(0.07±0.02)、(0.13±0.03)、(0.16±0.04)和(0.10±0.03)］增高,且组间差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组相比,治疗组COL2、Acan、整合素β1和p-FAK蛋白含量［(0.42±0.07)、(0.50±0.07)、(0.74±0.06)和(0.64±0.07)］增高,而MMP-13、p-p38蛋白含量［(0.37±0.06)、(0.37±0.08)］下降,差异有统计学意义(P<0.05);而抑制剂组COL2、Acan、MMP-13、整合素β1、p-FAK和p-p38蛋白含量［(0.19±0.04)、(0.09±0.03)、(0.51±0.03)、(0.33±0.02)、(0.30±0.05)和(0.53±0.04)］无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05),但与对照组和治疗组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。 结论LIPUS可通过整合素β1-FAK-p38 MAPK通路抑制脂肪因子诱导的软骨细胞MMP-13增高,减少COL2、Acan降解,从而对膝关节脂肪垫共培养下的软骨细胞起一定的保护作用。     

侵袭性真菌性鼻窦炎误诊分析

近年来,随着糖尿病发病率增高,加上广谱抗生素、化疗、放疗、肾上腺皮质激素在临床的广泛应用以及心血管手术和深静脉插管等各种操作技术的发展,深部真菌感染逐年增加,侵袭性真菌性鼻窦炎发病率也随之增高。该病临床症状不典型,易被临床及影像学医师忽略,我院收治并误诊1例,现报告如下。     

改良通用茎环引物筛查和定量检测微小RNA方法的建立

目的 建立可同时筛选和定量检测成熟型miR的荧光定量PCR方法.方法 改良通用茎环引物,在其茎环尾端引入8个随机碱基片段,用于成熟型miR逆转录,以建立SYBR Green PCR筛选和定量检测miR的方法(简称“改良通用茎环引物miR法”).同时,采用10倍梯度稀释的miR-155标准品cDNA(1～109拷贝/μl)评价其灵敏度;采用熔解曲线评价其检测miR-155的特异性;通过对2×105、2×106、2×107拷贝/μl的miR-155标准品cDNA分别进行批内20次重复实验,以其循环阈值(Ct)的变异系数(CV)评价其精密度;并与传统茎环法进行比较,计算实验所用时间和引物成本.然后,采用改良通用茎环引物miR法对植物血凝素(PHA)刺激培养0、16、24、48、72 h的人外周血T淋巴细胞内miR进行筛选(87个靶miR,经PubMed检索可能与免疫功能相关),并用以进行miR定量检测分析.结果 建立的改良通用茎环引物法的最低检测限为103拷贝/μl的miR-155 cDNA标准品;熔解曲线于80℃呈单峰,证实为针对miR-155的特异性扩增;其批内重复实验的精密度为CV＜2.5％.优化后的通用引物方法与传统方法相比较,节约引物约75％(1 917 bp比7 851 bp),节省逆转录时间约120min(85 min比205 min).用改良通用茎环引物法筛选T淋巴细胞中87个miR,85个miR在PHA刺激前、后的Ct无变化,而miR-150和miR-155表达量在T淋巴细胞激活前后分别发生超过10倍下降(72 h)和8倍的升高(48 h),且差异有统计学意义(Z=-2.023,P=0.043;Z=-2.032,P=0.042).结论 建立的改良通用茎环引物miR法具有快速、重复性好、灵敏、节约引物用量和实验时间的优点,可用于T淋巴细胞的miR筛查和定量检测.     

MMP-9单核苷酸多态性与肿瘤表现型研究进展

MMP-9（Gelatinase B）是一种白明胶溶解酶B，大小为92kb，研究发现许多恶性肿瘤细胞也分泌MMP-9，它主要作用于明胶和Ⅳ／Ⅴ型胶原，也降解ⅦⅩ和Ⅺ胶原、弹性蛋白、蛋白聚糖及纤维蛋白原。MMP-9是极具吸引力的肿瘤治疗的靶标，已经设计出相对应的抗肿瘤靶向药物，已成为近几年肿瘤研究得焦点。单核苷酸多态性（Single Nucleotide Polymorphisms，SNP）是指在染色体基因组水平上单个核苷酸的变异（置换、颠换、缺失和插入）引起的DNA序列多态性，而其中最少一种等位基因在群体中的频率不小于1％。在人类基因组计划研究的历史上，单核苷酸多态性标记（SNP）是第三代DNA水平遗传多态性标记。经典的SNP分析方法是扩增片段长度多态性（PCR—RFLP）。近年来，SNP还应用与一些肿瘤相关基因中等位基因频率的扫描，来反映肿瘤表现型的关系。     

不同尿钙水平的Gitelman综合征患者临床特点比较

目的观察不同尿钙水平Gitelman综合征(GS)患者的临床特点,探讨尿钙在GS疾病临床分型中的价值。方法收集2016—2018年来自中国国家罕见病注册系统(NRSC)、在北京协和医院行SLC12A3基因检测诊断为GS患者的临床资料,分析其尿钙特点,比较不同尿钙水平患者的临床和实验室检查指标。氢氯噻嗪试验按照标准操作流程进行,测定患者基线和用药后3 h内氯离子排泄分数改变量的最大值(ΔFECl)。结果共有83例GS患者被纳入研究,其中低尿钙患者53例(63.86%)。低尿钙组尿钙/肌酐比明显低于非低尿钙组[(0.085±0.058)mmol/mmol比(0.471±0.284)mmol/mmol,t=7.349,P<0.001]。两组患者在年龄、性别、估算肾小球滤过率、血压、血尿电解质水平、代谢性碱中毒方面差异均无统计学意义。低尿钙组患者乏力(χ2=4.595,P=0.032)及多尿(χ2=5.778,P=0.016)发生比例低于非低尿钙组,两组患者在其他临床症状方面差异无统计学意义。低尿钙和非低尿钙组各有16例患者行氢氯噻嗪试验,中位ΔFECl结果分别为0.539%(0.430%,1.283%)和0.829%(0.119%,1.298%),均提示对氢氯噻嗪无反应,组间差异无统计学意义(U=130.000,P=0.956)。结论GS患者中低尿钙比例为63.86%,尿钙水平与疾病临床表型、NCC功能损伤严重程度之间均无明确相关性。     

低强度脉冲超声经PI3K/Akt通路调控兔膝骨性关节炎软骨细胞凋亡的作用机制研究

目的:探讨低强度脉冲超声(LIPUS)对兔膝骨性关节炎(OA)软骨细胞凋亡的影响及有关作用机制。方法:共选取30只新西兰大白兔,随机分为正常对照组(A组)、OA模型组(B组)、OA+LIPUS组(C组)、OA+LY294002(PI3K/Akt抑制剂)组(D组)、OA+LY294002+LIPUS组(E组),每组各6只。采用右后膝前交叉韧带切断术(ACLT)造模。于造模后第6周时采用空气栓塞法处死实验兔,切取软骨组织进行组织学观察,并进行Mankin评分;提取软骨细胞进行体外培养并采用免疫组化染色法鉴定;应用western blot检测各组软骨细胞中Ⅱ型胶原(COL2)、MMP-13、Akt、pAkt、P53、Bcl-2蛋白表达情况。结果:B组COL2、pAkt、Bcl-2蛋白含量较A组降低,MMP-13、P53蛋白含量较A组增高(P<0.05)。与B组相比,C组COL2、pAkt、Bcl-2蛋白含量增高,MMP-13、P53蛋白含量下降(P<0.05);D组COL2、Bcl-2、pAkt蛋白含量下降,MMP-13、P53蛋白含量升高(P<0.05),E组COL2、MMP-13、P53、Bcl-2、pAkt蛋白含量无明显变化,但与C组、D组相比差异显著(P<0.05)。各组Akt蛋白表达无明显差异。结论:LIPUS能通过PI3K/Akt通路降低兔膝骨性关节炎软骨细胞凋亡率,促进抗凋亡基因Bcl-2表达,下调促凋亡基因P53水平,促进关节软骨损伤修复。     

低强度脉冲超声与吡格列酮对骨关节炎软骨细胞的影响

目的 观察低强度脉冲超声(LIPUS)和吡格列酮(pioglitazone)经过氧化物酶增殖物激活受体γ(PPARγ)/核转录因子-κB（NF-κB）/诱导型一氧化氮合酶(iNOS)途径对骨关节炎(OA)软骨细胞的保护作用。 方法 选取健康成年新西兰大白兔24只,按随机数字表法分为正常组、脂多糖（LPS）组、LIPUS组(LPS+LIPUS)、吡格列酮组(LPS+吡格列酮),每组6只大白兔。分别提取4组大白兔膝正常软骨细胞,采用ELISA法检测4组软骨细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、瘦素（LEP）、一氧化氮(NO)的水平;采用免疫细胞化学和免疫荧光染色法检测4组软骨细胞Ⅱ型胶原(COL2)的表达情况;另采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫蛋白印迹法检测(Western blot)技术分别检测4组软骨细胞的PPARγ,NF-κB,iNOS mRNA和蛋白表达水平。 结果 LIPUS组和吡格列酮组OA软骨细胞的TNF-α、LEP、NO水平与LPS组比较,均显著下降,差异均有统计学意义（P<0.05）,且吡格列酮组下调幅度大于LIPUS组,差异有统计学意义（P<0.05）;LIPUS组OA软骨细胞COL2的表达水平显著上调,与LPS组比较,差异有统计学意义（P<0.05）;LIPUS组和吡格列酮组OA软骨细胞PPARγ的mRNA和蛋白表达水平均高于LPS组,差异均有统计学意义（P<0.05）;吡格列酮组和LIPUS组OA软骨细胞NF-κB、iNOS mRNA和蛋白表达下降,与LPS组比较,差异均有统计学意义（P<0.05）,且吡格列酮组下降程度大于LIPUS组,差异有统计学意义（P<0.05）。 结论 LIPUS和吡格列酮均可能通过PPARγ/NF-κB/iNOS途径参与OA软骨细胞的抗炎症、COL2合成过程,起到OA软骨细胞的保护作用。