Krüppel样因子6对于TGF-β1诱导的晶状体上皮细胞纤维化的调控作用研究

目的探讨Krüppel样因子6(KLF6)高表达对于转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的人晶状体上皮细胞(HLECs)纤维化的促进作用。方法利用脂质体转染的方法将已成功构建的真核表达质粒pEGFP-C2-KLF6及pSilencer-KLF6转染到HLECs中,经实时定量PCR反应(q-PCR)与反转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定细胞中KLF6蛋白的表达水平,以及上皮钙黏素(E-cadherin)和波形蛋白(vimentin)表达水平。经Transwell细胞迁移实验观察细胞迁移情况。结果 pEGFP-C2-KLF6转染72 h后可有效上调HLECs中KLF6的表达水平,pSilencer-KLF6转染72 h后可有效下调HLECs中KLF6的表达水平(P0.05),从而为后续实验奠定基础;与对照组相比较,KLF6高表达组细胞中E-cadherin表达水平显著下降,Vimentin表达水平显著增高,细胞迁移能力升高(P0.05);在0.5 ng/ml TGF-β1刺激72h后,随KLF6表达量的增加,E-cadherin表达水平进一步降低,而Vimentin表达水平进一步增高,细胞迁移能力进一步升高(P0.05)。结论高表达的KLF6通过调控E-cadherin和Vimentin的表达水平,促进了TGF-β1所诱导的人晶状体上皮细胞纤维化过程,KLF6基因表达与体外基础条件下的上皮-间充质转化(EMT)相关。通过生物学手段特异性下调KLF6的表达可在一定程度上发挥对晶状体上皮细胞的保护作用。     

婴儿瞬态诱发耳声发射听力筛查通过率的相关因素

〔摘 要〕 目的：分析婴儿瞬态诱发耳声发射听力筛查通过率的相关因素。方法：选取 2019 年 8 月至 2020 年 8 月江门 市中心医院听力筛查中心行瞬态诱发耳声发射听力筛查的婴儿 500 例为观察对象，采集婴儿性别与家庭情况及母亲孕期情 况等信息，分析影响瞬态诱发耳声发射听力筛查通过率的影响因素。结果：500 例婴儿中，瞬态诱发耳声发射听力筛查通过 婴儿 450 例，未通过婴儿 50 例。单因素分析显示，通过组与未通过组婴儿在性别与母亲文化程度上比较，差异无统计学意 义（P ＞ 0.05）；通过组与未通过组婴儿的胎龄、出生体质量、胎数、外耳畸形、出生后给氧、住新生儿重症监护病房（NICU）、 家庭收入之间比较，差异均具有统计学意义（P ＜ 0.05）。多因素 logistic 回归分析结果显示，胎数、外耳畸形、是否给氧、 家庭收入、NICU、出生体质量、胎龄是婴儿瞬态诱发耳声发射听力筛查通过率的影响因素。结论：婴儿瞬态诱发耳声发射 听力筛查的通过率，主要会受到婴儿外耳畸形与胎数及是否给氧因素的影响，双胎与外耳畸形婴儿听力筛查不通过可能性 相对较高。     

编码弓形虫表面抗原P30、P22复合基因真核表达载体的构建

目的 构建编码弓形虫RH株表面抗原P30、P22复合基因的真核表达重组质粒，为进一步表达融合蛋白及研制核酸疫苗做准备。方法 用弓形虫RH株腹腔接种小鼠，收集腹水，酚／氯仿法抽提弓形虫基因组DNA；用PCR技术从基因组DNA中扩增编码表而抗原P30、P22的基因片段，分别重组入pMD18T载体中。将pMD18-T载体中的P30、P22基因片段分别酶切，定向克隆入pUC18克隆载体中，pUC18-P30-P22中的P30P22片段经酶切、纯化后，亚克隆入pcDNA3．1(-)真核表达载体，用酶切、PCR及测序的方法对重组子进行鉴定。结果 从弓形虫RH株基因组DNA中扩增出特异的P30及P22片段；大小均与预测值相符；克隆pUC18-P30P22重组质粒的酶切片段分别与P30、P22基冈大小一敛：经亚克隆、筛选鉴定获得了pcDNA3．1-P30-P22重组质粒，所测P30、P22基因序列与文献报道一致。结论 成功构建弓形虫pUC8-P30P21重组质粒和pcDNA3．1-P30-P22重组质粒，为研制弓形虫DNA疫苗奠定了基础。     

中性粒细胞弹性蛋白酶的过表达促进K562细胞增殖并抑制其凋亡

目的利用Ad Easy系统构建携带人中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)基因的重组腺病毒表达质粒,并感染K562细胞,观察其对K562细胞增殖和凋亡的影响。方法以急性早幼粒细胞白血病(APL)细胞株HL-60的RNA为模板,经反转录PCR得到NE基因的编码区并克隆入穿梭载体p Ad Track-CMV,得到p Ad-NE,经HindⅢ、EcoRⅤ酶切鉴定和测序正确后,将其转化入p Ad Easy-1-BJ5183进行同源重组,得到重组子Ad-NE,经PacⅠ酶切线性化后转染AD293细胞进行包装。14 d之后收获原代病毒,经5轮扩增后,测定病毒滴度,进行PCR鉴定。感染K562细胞后,荧光显微镜初步观察感染效率,同时用流式细胞术检测感染效率;Western blot法进一步鉴定NE是否表达上调;CCK-8法测定细胞增殖情况;流式细胞术测定细胞凋亡和细胞周期变化。结果酶切鉴定及测序结果表明重组穿梭质粒p Ad-NE构建成功;酶切鉴定显示同源重组成功,得到重组子Ad-NE;荧光显微镜表明病毒包装成功;经过5轮扩增后,病毒滴度达到1.64×1012pfu/m L;感染K562细胞后,荧光显微镜观察感染效率达80%左右;Western blot法检测到NE表达上调;CCK-8实验显示NE表达上调后K562细胞增殖能力增强;流式细胞术显示S期细胞明显增多并且细胞凋亡减少。结论过表达NE可促进K562细胞增殖并抑制其凋亡。     

非对比剂增强磁共振血管成像评价门静脉血流动力学的可行性研究

目的探讨利用多反转空间标记脉冲非对比剂增强磁共振血管成像(non-contrast-enhanced magnetic resonance angiography using spatial labeling with multiple inversion pulses,SLEEK-MRA)评估门静脉血流动力学的可行性。材料与方法纳入25例门静脉高压患者先后行SLEEK-MRA和彩色多普勒超声(color doppler ultrasonograohy,CDUS)检查,SLEEK-MRA序列采用不同血流抑制反转时间(blood suppression inversion time,BSP TI):600、900、1200、1500 ms。对门静脉分支显示情况进行评级并与通过与CDUS血流速度测定结果进行相关性分析。依据CDUS所测流速将患者分组,并比较各组患者分支显示评级情况以及BSPTI参数应用情况。结果门静脉左、右支在全部BSPTI设定时SLEEK-MRA的分支显示评级均与CDUS所测得血流速度呈现出显著相关性。在门静脉流速明显减慢组患者,分支评级明显低于流速正常或轻度减慢组,应用BSP TI值明显高于流速正常或轻度减慢组。结论 SLEEK-MRA在提供高质量门静脉形态学成像同时,具有提示门静脉血流动力学变化的潜力,通过SLEEK-MRA获取血流动力学信息是可行的。     

抗-HAV-IgM阳性的自身免疫性肝炎-原发性胆汁性胆管炎重叠综合征1例报告

<正>自身免疫性肝炎（AIH）-原发性胆汁性胆管炎（PBC）重叠综合征属于自身免疫性肝病重叠综合征的一种类型,其本质是由于自身免疫功能紊乱引起的慢性肝脏疾病^[1]。AIH-PBC在所有自身免疫性肝病重叠综合征类型中较为常见^[2],其患病率在PBC患者中为4.3%～9.2%,在AIH患者中为2%～19%^[3],而合并低滴度HAV-IgM目前尚未见报道。通过对本文病例的诊治过程回顾,扩展了对HAV相关免疫学疾病的认识,     

2012年四川省试点城市艾滋病相关高危人群规模估计结果

目的估计四川省试点城市艾滋病高危人群规模,为科学评价四川省艾滋病疾病负担,确定防治经费的投入及资源的有效分配提供科学依据。方法按照既往艾滋病疫情水平的高、中、低3档,选择四川省有代表性的成都市、绵阳市、雅安市3个市进行高危人群规模估计,暗娼人群(FSW)估计方法采用普查法,男男性行为(MSM)人群规模估计采用捕获再捕获的方法 ,吸毒人群(DUS)的规模估计采用乘数法。结果成都市FSW人数均值为7 372,占15~59岁年龄段女性人口数比例为0.18%,DUS均值为10 121,占成都市常住20~60岁年龄别人口数比例为0.134%,注射吸毒占相应人口比例为0.06%,MSM均值为278 02,占成都市20~60岁年龄段男性人口数的比例为0.74%;绵阳市FSW均值为3 638,占15~59岁年龄段女性人口数比例为0.23%,DUS均值为4 725,占当地15~59岁人口比例为0.15%。注射吸毒人群占相应人口比例为0.06%,MSM均值为10 182人,占绵阳市15~74岁常驻男性人口数的0.53%;雅安市FSW人数均值为800,占15~50岁年龄段女性人口数比例0.19%,DUS均值为4 725,占当地15~59岁人口比例为0.15%。注射吸毒人群占相应人口比例为0.06%,MSM均值为1 444,占当地16~41岁年龄段男性人口比例为0.37%。结论基本掌握3个城市艾滋病高危人群规模数据。     

克拉霉素,甲硝唑和兰索拉唑联合治疗幽门螺杆菌感染的临床疗…

本文报道克拉霉素与甲硝唑及兰索拉唑联合应用治疗ＨＰ阳性的十二指肠溃疡。方法：５９例符合条件的病人随机分成两个治疗组，其中３０例口服克拉霉素２５０ｍｇ，甲硝唑４００ｍｇ，兰索拉唑３０ｍｇ，另一组２９例口服克拉霉素５００ｍｇ，甲硝唑４００ｍｇ，兰索拉唑３０ｍｇ，用法均为每日２次，疗程１周，继而口服兰索拉唑３０ｍｇ，每日１次，共１周。疗程结束后１个月复查胃镜。