志贺菌耐药特性及对三代头孢菌素耐药机制研究

志贺菌是细菌性痢疾的病原菌,由于第三代头孢菌素在严重细菌性痢疾尤其是儿童菌痢治疗中的广泛应用,使其耐药性日益严重.为了了解温州地区临床分离志贺菌的耐药特点和对三代头孢菌素的耐药机制,我们对从本地区腹泻患者粪便中分离的60株志贺菌,进行TEM、SHV、CTX-M、VEB、PER、GES、OXA等β-内酰胺酶基因的检测和膜外排机制研究.现将结果报道如下.     

仪器法和手工法在副流感嗜血杆菌鉴定和分型的结果比较

目的：比较Vitek-60微生物自动分析系统与传统手工方法对嗜血杆菌鉴定与生物分型的结果，了解Vitek-60微生物自动鉴定仪对嗜血杆菌鉴定与生物分型结果的可靠性。方法：用嗜血杆菌专用平板（HAE）进行分离培养，同时用椎荐的手工方法和Vitek-60微生物自动分析系统对114株嗜血杆菌进行鉴定和生物分型。结果：手工法与仪器法对嗜血杆菌鉴定结果的符合率为100％，而生物分型的符合率仅为66．4％。我院分离的嗜血杆菌以副流感嗜血杆菌为主，其生物分型主要为I型。结论：Vitek-60微生物自动分析系统能正确鉴定嗜血杆菌，但对其生物分型结果与手工方法存在着一定差异。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌mec Ⅰ基因的检测及多态性研究

目的研究耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methieillin-resistant Staphylococcus aureus，MRSA）临床分离株mecⅠ基因多态性。方法随机挑取我2005年1月至2006年8月间40株经PCR检测mecA阳性的金黄色葡萄球菌，采用PCR检测mecⅠ基因，对PCR产物进行测序。多重PCR检测葡萄球菌盒式染色体（Staphylococcal cassette chromosome mec，SCCmec），使用琼脂稀释法检测苯唑西林的MIC值。结果40株MRSA中有35株mecⅠ基因阳性，阳性率为87．5％（35／40），所有35株mecⅠ基因阳性的菌株都存在mecⅠ202位C→T点突变，导致68位的谷氨酰胺的密码子CAA变成终止密码子UAA。32株菌为mecⅠ202单点突变，3株菌存在两位点突变，分别为3位插入A，41位A→C，142位C→T。35株mecⅠ阳性菌株中，有27株SCCmec为SCCmecⅢ、7株为SCCmecⅢA及1株SCCmec Ⅱ，5株mecⅠ阴性的菌株中，3株为SCCmecⅣ，1株为SCCmecⅠ，另1株为未知型。31株mecⅠ202单点突变菌株对苯唑西林（Oxacillin，OXA）的MIC值在256～512μg／ml，1株mecⅠ202单点突变菌株的MIC值〈1μg／ml，3株存在两个位点突变的菌株对苯唑西林的MIC值≥512μg／ml，5株mecⅠ阴性的菌株对苯唑西林的MIC值在8～256μg／ml之间。结论本地区分离的MRSA临床分离株普遍存在mecⅠ202C→T，少数菌株mecⅠ202和其他位点同时存在突变，mecⅠ202位点突变是MRSA对苯唑西林高水平耐药的主要原因。     

牛磺胆酸钠混合大肠杆菌逆行胰管注射法建立感染性坏死性胰腺炎大鼠模型

目的建立一个稳定可靠的感染性坏死性胰腺炎大鼠模型,为深入研究感染性坏死性胰腺炎的病理生理、病变转归以及探索新的治疗方法提供动物模型载体.方法46只SD大鼠随机分成5组：牛磺胆酸钠逆行胰管注射组、大肠杆菌逆行胰管注射组,牛磺胆酸钠混合不同浓度大肠杆菌（浓度分别为103个/ml、104个/ml和105个/ml,混合液为实验即时配制）逆行胰管注射组,注射量为0.1 ml/100 g体重,注射速度为0.2 ml/min.观察8 h,记录生存率;存活者8 h后活杀,抽血测定血清淀粉酶,并取胰腺组织行病理学检查和细菌培养.结果单纯牛磺胆酸钠逆行胰管注射能建立坏死性胰腺炎模型,其中胰腺组织细菌培养阳性率为12.5%（1/8）;单纯大肠杆菌逆行胰管注射不仅不能建立坏死性胰腺炎模型,而且胰腺组织细菌培养阳性率为0（0/8）;牛磺胆酸钠混合大肠杆菌逆行胰管注射能够建立感染性坏死性胰腺炎模型,大肠杆菌浓度为103个/ml组、104个/ml组、105个/ml组胰腺组织细菌培养率分别为60%、100%、100%,而8 h存活率分别为100%、100%、70%.结论（1）大肠杆菌浓度为104个/ml和牛磺胆酸钠浓度为5%的混合液,按0.1 ml/100 g体重的量经胰管逆行注射（注射速度为0.2 ml/min）可建立稳定可靠的感染性坏死性胰腺炎大鼠模型.（2）该方法导致感染性坏死性胰腺炎发生的可能机制为：牛磺胆酸钠导致胰腺组织发生出血、坏死,并引起胰腺组织抵抗细菌定植能力下降;同时,坏死的胰腺组织给细菌提供了良好的生长环境;此外,胰腺组织发生细菌感染与入侵的细菌量有正相关关系.     

肠杆菌目细菌碳青霉烯酶的实验室检测和临床报告规范专家共识(第二版)

<正>当前,细菌耐药已成为全球公共健康领域的重大挑战,其中尤以碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌(carbapenem-resistant Enterobacterales, CRE)引起的感染形势最为严峻。碳青霉烯类抗生素包括亚胺培南、美罗培南和厄他培南等,是治疗多重耐药革兰阴性杆菌所致感染最有效的抗菌药物之一。随着该类药物在临床的广泛使用,CRE菌株的检出率呈逐年快速上升趋势。CHINET中国细菌耐药监测网历年监测结果显示^[1-2],     

创伤弧菌感染小鼠抗菌药物的实验治疗

目的 :应用多种抗菌药物对创伤弧菌感染小鼠进行治疗观察。方法 :创伤弧菌 ( 3 .0× 1 0 8cfu/ml)经ip感染小鼠后 0 .5h ,分别应用ip氨基糖甙类 (阿米卡星、奈替米星 )、头孢菌素类 (头孢曲松钠、头孢哌酮钠、头孢他啶、头孢噻肟钠 )、青霉素类 (特美汀、氨苄西林钠、哌拉西林钠 )和喹诺酮类 (培福新、乳酸左旋氧氟沙星 )抗菌药物进行治疗。结果 :这些抗菌药物对创伤弧菌感染的小鼠均有治疗作用 ( p <0 .0 5～ 0 .0 0 1 ) ,乳酸左旋氧氟沙星、哌拉西林钠、头孢哌酮钠、奈替米星疗效最好 ;其次为阿米卡星、头孢曲松钠、头孢他啶、头孢噻肟钠、氨苄西林钠、培福新 ;再次特美汀 ;乳酸左旋氧氟沙星、哌拉西林钠、头孢哌酮钠、奈替米星的疗效明显比培福新、特美汀为好 ( p <0 .0 5 )。治疗组小鼠的死亡时间较对照 2组明显延长 ( p <0 .0 1 )。 结论 :及早足量应用这些抗菌药物对创伤弧菌感染小鼠有较好的治疗效果 ,可为临床治疗该病提供依据。