血栓性血小板减少性紫癜误诊2例分析

血栓性血小板减少性紫癜（TTP）是一种弥散性血栓性微血管病，临床少见，起病急、病死率高。近10a来我院误诊2例，分析如下。     

颗粒溶素的表达纯化及生物学活性分析

目的:采用原核表达系统对颗粒溶素(granulysin,GNLY)进行体外表达,纯化及活性鉴定.方法:以体外培养的人外周血单个核细胞(PBMC)为模板,RT-PCR扩增编码GNLY的cDNA片段,插入pMD-18-T 载体,测序正确后再亚克隆到质粒pET28a( ) 中,构建重组表达质粒pET28a( )-GNLY,转化大肠杆菌BL21(DE3) plysS,IPTG诱导表达融合蛋白,包涵体经变复性后用Ni亲和层析纯化,CFU法测定蛋白活性.结果:成功地将GNLY cDNA片段插入载体pET28a( )中,构建了表达质粒pET28a( )-GNLY.经诱导在原核表达系统中以包涵体形式高效表达了相对分子质量为9 000的融合蛋白,变复性纯化后的GNLY蛋白经CFU法检测,发现其具有细胞毒活性且细胞毒作用具有剂量依赖性.结论:本实验利用原核表达系统成功地表达了具有生物学活性的GNLY,为研究其功能、作用机制及临床应用奠定了基础.     

人TACI-linker-BR3双受体融合基因真核表达载体构建及其在COS-7细胞中的表达

目的:构建人双受体融合基因真核表达载体--pcDNA3.1( )-TACI-linker-BR3-IgGFc,观察其在COS-7细胞中的表达.方法:应用基因工程技术构建重组载体,脂质体转染COS-7细胞,通过Western印迹、ELISA以及免疫组化方法,检测目的蛋白的表达及其与BAFF、APRIL蛋白相互作用情况.结果:融合基因在瞬时转染的真核细胞中获得表达,并分泌至上清,转染效率能达到48%,融合蛋白能与BAFF、APRIL蛋白有效结合而且融合蛋白中分子标签IgGFc未影响双受体融合蛋白的结构及其生物学活性.结论:人TACI-linker-BR3双受体基因与IgGFc融合基因载体构建成功,表达的融合蛋白具有生物学活性,为进一步探讨SLE等自身免疫疾病的发病机制和生物学治疗方法奠定了基础.     

社区老年人骨健康的调查结果分析和预防措施探讨

采用随机抽样调查法和标准化问卷及体检。结果骨折史占24%认识程度占10%,骨密度负值占70%,女性占58%,男性占42%,X线骨质增生占60%。社区老年的人的骨折风险高,应该加强健康宣教和干预预防性的治疗,进一步利用社区卫生资源更好地为老年保健服务,减少骨折发生率,节省国家医疗资源,减轻家庭经济负担。     

定量RT-PCR检测PBC患者外周血中颗粒溶素的基因表达水平

目的建立检测人颗粒溶素(granulysin,GNLY)mRNA含量的实时荧光定量RT-PCR的方法,并测定PBC患者外周血单个核细胞(PBMC)中GNLY的基因表达水平,探讨GNLY基因表达水平与原发性胆汁性肝硬化(PBC,primarybiliary cirrhosis)发生发展的关系。方法基于TaqMan荧光探针技术,构建质粒pET28a-GNLY,作为定量模板,建立实时荧光定量RT-PCR方法。用此方法测定了60例PBC、60例乙型肝炎肝硬化及60例健康对照者外周血中GNLY mRNA的含量。结果PBC患者GNLY mRNA的表达范围为5.35×107-4.61×109拷贝/μg RNA;健康对照者为9.28×105-7.32×107拷贝/μg RNA。PBC组GNLY mRNA的平均拷贝数显著高于健康对照组(P<0.01)和疾病对照乙型肝炎肝硬化组(P<0.001)。结论成功建立了人GNLY基因表达含量的荧光定量检测方法,PBC患者GNLY mRNA的含量显著高于健康对照组,GNLY表达与PBC的发生发展存在一定的关联性。     

Siglec-1与原发性胆汁性肝硬化的相关性研究

目的 检测Siglec-1(sialic acid-binding immunoglobulin-like lectins,唾液酸结合的免疫球蛋白样凝集素,CD169)在原发性胆汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis,PBC)患者外周血单核细胞上的蛋白及mRNA表达水平,并探讨其在原发性胆汁性肝硬化发生发展中的作用.方法 流式细胞术检测45例PBC患者及36例健康对照者、40例肝炎后肝硬化对照者外周血CD14,CD169双阳性细胞的表达率;实时荧光相对定量RT-PCR方法检测入选对象单核细胞中Siglec-1mRNA的含量;生化常规测定所有入选者血清生化指标水平.结果 流式细胞术检测结果显示:PBC组单核细胞CD14,CD169双阳性率为13.0%±2.5%,显著高于健康对照组(1.0%±0.2%,P<0.01)及肝炎后肝硬化对照组(4.1%±0.5%,P<0.01).PBC组Siglec-1mRNA的相对表达量为健康对照组的3.42倍,差异具有统计学意义(P<0.01).结论 PBC患者单核细胞表面siglec-1蛋白表达显著增高,mRNA含量显著增加,说明PBC患者外周血单核细胞已经发生巨噬细胞化,单核巨噬细胞介导的免疫炎症反应在PBC发生发展过程中起重要作用.     

计算机预警在输血科的应用

随着计算机管理系统在各大医院的广泛应用,大部分医院输血科信息化程度越来越高[1,2]。输血科的工作不同于医院其他科室,一个微小的失误可能会造成严重的医疗事故,甚至危及患者的生命安全[3]。本科利用计算机的自动化功能,在原来输血信息系统上开发了多项预警功能,为临床输血安全提供了优质保障。材料与方法1计算机管理系统要求硬件基本要求为普通办公计算机、网络交换机、打印机、条形码打印机、条形码扫描器等。     

原发性胆汁性肝硬化与人白细胞抗原相关性分析

原发性胆汁性肝硬化(PBC)是一类由自身免疫机制介导的、以肝内小胆管进行性非化脓性破坏性炎症为特征的慢性胆汁淤积性疾病，进一步可发展至肝纤维化与肝硬化。PBC好发于中年女性，临床表现主要为皮肤瘙痒、乏力、纳差、黄疸、肝脾肿大，并伴有高球蛋白血症、碱性磷酸酶(ALP)和7-谷氨酰转肽酶(7-GT)显著升高，且存在多种自身抗体，如抗线粒体抗体(AMA)、AMA-M2、抗核抗体     

我国冠状动脉旁路移植术住院死亡预测模型研究及欧洲心血管手术危险评分系统效能检验

目的:分析并初步建立我国冠状动脉旁路移植术(coronary artery bypass grafting,CABG)风险预测模型,并与欧洲心血管手术危险因素评分系统即EuroSCORE及EuroSCORE对数回归模型对比。方法:回顾性分析2006年1月1日至2007年6月30日,北京安贞医院心脏外科行CABG手术或CABG合并手术的1637例患者资料。收集影响手术死亡的42个术前危险因素,经过单因素与多因素Logistic回归分析确立独立危险因素,并据此初步建立CABG手术死亡危险评估模型,再对模型进行分辨度、校准度检验,并与EuroSCORE及EuroSCORE对数回归模型进行对比研究。结果:全组患者年龄(61.9±9.7)岁,实际病死率4.03%(66/1637),CABG合并手术3.85%(63/1637),多因素Logistic回归分析结果:慢性肺部疾病、外周血管疾病、急性心肌梗死、既往介入治疗(PTCA、溶栓或支架)、心源性休克、主动脉瓣反流及二尖瓣反流为CABG手术死亡的独立危险因素。据此建立CABG手术死亡危险评估模型。并与EuroSCORE及EuroSCORE对数回归模型进行对比研究。受试者工作特征(Receiver-OperatingCharacteristic,ROC)曲线下面积:新建立风险模型(0.83)EuroSCORE对数回归模型(0.82)EuroSCORE模型(0.81),Hosmer-Lemeshowχ2检验新模型P=0.225,P0.05,即预计病死率与实际观测病死率差异无统计学意义;而其他2种模型P0.05。结论:慢性肺部疾病、外周血管疾病、急性心肌梗死、既往介入治疗(PTCA、溶栓或支架)、心源性休克、主动脉瓣反流及二尖瓣反流等7个因素为CABG手术死亡的独立危险因素。据此建立的CABG手术死亡危险评估模型具有良好的分辨度和校准度。     

随机扩增多态性DMA技术与简单序列重复标记法探讨部分黄精属药用植物亲缘关系的研究

目的 为黄精属部分药用植物建立聚类分析,对黄精属药用植物的分类进行研究.方法 采用原植物鉴定、随机扩增多态性DNA(RAPD)、简单序列重复(ISSR)手段,对随机引物进行筛选,通过1.8%琼脂糖凝胶电泳分离PCR产物.结果 筛选23种RAPD引物,5种ISSR引物,经PCR扩增产生足够的多态性谱带用于分析.结论 采集不同产地的玉竹、小玉竹、多花黄精出现了一定程度的变异.RAPD,ISSR方法可以从分子水平区分黄精属药用植物.