抗体基因芯片应用于检测鼻咽癌组织切片蛋白质表达谱的研究

目的研究应用抗体基因芯片检测鼻咽癌组织特异性蛋白质表达谱的新技术方案。方法利用噬菌体抗体库筛选出抗鼻咽癌的特异性抗体库,以扩增抗体基因V-D-J片段作为标识分子用于制备抗体基因芯片;通过特异性抗体库与鼻咽癌肿瘤组织结合后,使标记引物扩增的V-D-J序列与抗体基因芯片进行杂交后显示癌组织的蛋白质表达谱,从而选择性通过免疫组织化学显示其中关键性蛋白质原位表达状况。结果肿瘤组织结合的抗体滴度可达到106～108数量级,标记的DNA分子效价约为10-6～10-8,以该文一次检测20个抗体为例,基因芯片检出有10～14个阳性蛋白质表达谱;免疫组织化学可显示阳性抗体在细胞中的结合部位。结论以抗体基因芯片为核心的技术方案,能在组织切片上同时检测含多个蛋白质表达谱,可以广泛应用于基础研究和临床诊疗过程。     

一株罕见发酵蔗糖的贝坎道夫沙门菌鉴定与探讨

目的:对一株从冻贻贝中分离的沙门菌进行鉴定与探讨。方法:结合传统生化反应、荧光定量PCR检测、16S rDNA检测以及血清学分型鉴定方法。结果:该菌生化反应及PCR反应符合沙门菌属,经16S rD-NA鉴定为肠道沙门菌,血清学抗原式为9,46:e,h:1,2。结论:该菌是一株罕见的发酵蔗糖的贝坎道夫沙门菌(S.Bergedorf)。该菌为国内首次报道检出。     

库欣病显微外科手术的疗效分析

目的 分析库欣病的显微外科手术方法和疗效. 方法 对89例库欣病经蝶垂体腺瘤切除术患者的临床资料进行回顾性分析,分析总结手术前后患者临床症状和体征的变化,并检测其垂体相关性激素水平,判定库欣病经蝶垂体腺瘤切除术治疗的疗效. 结果 89例库欣病患者术后73例治愈（73/89,82％）,12例于术后2月内缓解（12/89,13.5％）,余4例未缓解的患者中2例行伽马刀治疗后缓解,1例行药物治疗后缓解,1例术后症状稳定未再进展.手术前后血皮质醇、尿游离皮质醇水平均明显下降（P＜0.05）. 结论 经蝶垂体腺瘤切除术是目前治疗库欣病安全有效的首选方法.术后血清皮质醇水平、24 h尿皮质醇水平是评估术后疗效的有效指标.     

广西医疗机构检验结果互认项目质量分析

目的对广西互认检验项目的质量情况进行分析,为推进医院间检验结果互认工作提供研究基础。方法分析2011年、2012年广西二级以上医疗机构临床化学、全血细胞计数、临床免疫学、尿液化学分析的34个互认项目室间质量评价结果,了解各项目的合格率,分析其可比性。结果（1）三级医院实验室大部分项目合格率较高,实行检验结果互认有较好的质量基础;（2）二级医院实验室各项目合格率总体上低于三级医院,其中钙离子2011年、2012年合格率分别为78．10％和74．39％,肌酐分别为75．61％和86．72％,尿液化学分析pH分别为79．28％和83．2％,HBeAb分别为65．16％和87．75％,HBcAb 分别为77．87％和86．96％。结论广西三级医院实验室互认检验项目质量较好,二级医院实验室部分项目检验质量尚需进一步提高;各实验室需通过规范开展室内质控、参加室内质控数据的实验室间比对和室间质量评价,不断提高检验质量,实现实验室间检验结果的可比互认。     

N-乙酰半胱氨酸对大鼠脑出血后核因子-κB表达的影响

目的 探讨N-乙酰半胱氨（N-acetylcysteine，NAC）在大鼠脑出血（ICH）继发脑损伤中的作用机制。方法 采用立体定向技术注入自体不凝血制作实验性ICH模型，造模后即刻和6h后用NAC干预，行免疫组化染色观察血肿周围惦组织核因子κB（NF—κB）和细胞间黏附分子-l（ICAM-1）的表达变化。结果 ICH后6h血肿周围脑组织NF—κB开始表达，48h迭高峰，ICAM—l12h开始表迭，72h迭高峰。各组与假手术组之间有显著差异（均P〈0．05）；脑出血后NF—KB与ICAM—l呈正相关（r=0．868，P〈0．05），NF—κB表达从开始到高峰均早于ICAM—l。NAC可明显降低ICH24h、72h亚组NF—κB、ICAM—l的表达（P〈0．05）。结论 ICH时，NAC可通过抑制NF—κB的活性，下调ICAM—l的表达，从而发挥脑保护作用。     

补体在脑出血后脑组织损伤机制中的作用

目的研究补体C9在大鼠实验性脑出血(ICH)后血肿周围组织中的表达情况,探讨补体C9在ICH后脑水肿中的作用以及应用眼镜蛇毒因子(CVF)干预后对血肿周围组织C9表达及脑组织含水量变化的影响。方法采用立体定向技术,将自体不凝血注入大鼠尾状核制备ICH模型,将动物分为假手术组、出血组和CVF干预组,分别在不同时间断头取脑,连续切片分别作补体C9免疫组化染色和HE染色,并进行脑组织含水量测定(干湿重法)。结果ICH后2h血肿周围脑组织开始表达C9,24h达高峰。血肿周围脑组织含水量在ICH后2h开始增加(P<0.05),6h明显增加,24～72h达高峰(P<0.01),此后逐渐回落,1周基本恢复正常水平,脑组织含水量与C9的表达呈正相关关系(r=0.938,P<0.01);对侧半球相应部位及假手术对照组脑组织含水量没有明显变化;经CVF干预后,血肿周围组织C9表达明显下降,干预组与出血组之间比较有显著差异(P<0.01)。CVF干预组脑组织含水量明显低于常规ICH组(P<0.01)。结论脑出血后补体级联激活C9表达明显增加,并证明通过CVF干预后,C9表达下降,脑水肿减轻,能达到神经保护作用。     

雅培i2000全自动免疫发光仪与艾克美免疫荧光分析仪检测总前列腺特异性抗原的比对研究

目的 探讨雅培i2000全自动免疫发光仪用化学发光免疫分析法,与杭州中翰盛泰科技有限公司艾克美免疫荧光分析仪用免疫荧光干化学层析法检测总前列腺特异性抗原(TPSA)的可比对性.方法 对免疫荧光干化学层析法定量检测TPSA进行了性能评价,内容包括批内重复性、线性、准确度.结果 该法重复测定高、低值样CV＜10%;线性回归方程Y=0.9748X+0.048;与化学发光免疫法的相关性分析,r=0.984.结论 免疫荧光干化学层析法定量检测系统与雅培i2000全自动大型化学发光仪具有良好的重复性、线性和方法学的相关性,非常适合临床实验室门诊急诊及小批量样本时使用.     

ELISA法检测ら珠蛋白链在广西东南亚缺失型α-地中海贫血筛查中的应用价值

目的 评价并比较酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测ら珠蛋白链与聚合酶链反应(PCR).方法 在诊断广西东南亚缺失型α-地中海贫血中的临床应用价值.方法 收集广西壮族自治区人民医院门诊部和产科住院病例210份血样标本(其中82例各型α-地中海贫血,13例各型α-地中海贫血,115例为正常对照;地中海贫血组均有MCV＜80fl、MCH＜27pg,Hb在25～128g/L之间,采用ELISA法和聚合酶链反应(PCR)方法进行检测,最后对ELISA法筛查--SEA携带者总的敏感度、特异度、准确度、阴性预测值、阳性预测值与聚合酶链反应(PCR)方法进行分析并比较其诊断--SEA携带者的临床应用价值.结果 ELISA法诊断--SEA携带者总的敏感度、特异度、准确度、阴性预测值和阳性预测值分别是96.2％、98.3％、97.6％、98.3％和96.2％,而聚合酶链反应(PCR)法检测的相应指标均为100.0％(P＞0.05),两者无显著性差异.尽管ELISA法对--SEA携带者有很高的检出率,但其检测α-地中海贫血时有明显的漏检率,尚不属于成熟检测方法,需要进一步研究变流.结论 ELISA法能很有效地检出--SEA携带者,加之该法简便快速、技术要求不高且经济实用,适用于常规实验室筛查.但从本次评价的结论看,该方法漏检率较高,还不适宜推广作为大规模筛查方法.     

仅有癫痫表现颞叶肿瘤的外科治疗和预后分析

目的 探讨仅有癫痫表现的颞叶脑肿瘤适合的治疗方式、策略和预后评估.方法 对仅有癫痫表现的38例颞叶脑肿瘤患者进行手术治疗,按病灶位于左侧和右侧分组,术中通过皮层脑电图监测对病灶和致痫灶准确定位,术前后对患者进行韦氏智力量表测试,术后随访.分析肿瘤的病理学特点.结果 38例患者行病灶切除术、致痫灶切除术、前颞叶切除术、海马杏仁核切除术、软膜下多处横切术或皮层热灼术.术后平均随访3.5年,按Engel术后效果分级,Ⅰ级28例(73.6%),Ⅱ级5例(13.2%),Ⅲ级3例(7.9%),Ⅳ级2例(5.3%).随访期间本组无复发.术后MQ下降有显著性(P＜0.05),病灶位于左侧组的患者术后IQ和MQ的下降有显著性(P＜0.05).结论 仅有癫痫表现的颞叶脑肿瘤有趋向良性的病理学特点.手术切除病灶或致痫灶的疗效满意.而术后短期内的认知功能受到影响.     

U251细胞系中脑肿瘤干细胞耐药性的初步研究

目的 探讨脑肿瘤干细胞对抗肿瘤药物的耐药性及其机制.方法 通过磁珠分选(MACS)将U251细胞中的CD133+与CD133-细胞进行分选,用MTT法和流式细胞技术比较CD133+与CD133-细胞对抗肿瘤药物替尼泊苷(Vm-26)、卡莫司汀(BCNU)和顺铂(DDP)的敏感性、细胞凋亡率及细胞内药物蓄积的差异性,通过RT-PCR检测CD133+与CD133-细胞耐药基因谱的差异.结果 U251细胞系中,CD133+细胞约占5.4%.分选后的CD133+细胞的阳性率可达92.4%,CD133-细胞对抗肿瘤药物替尼泊苷、卡莫司汀和顺铂的敏感性明显高于CD133+细胞;流式细胞仪试验显示,在中等浓度的替尼泊苷作用下,CD133-细胞的凋亡明显,并出现明显的"亚G1峰",而CD133+细胞并未受到明显抑制和杀灭;流式细胞仪检测显示CD133+细胞内的药物蓄积明显低于CD133-细胞;RT-PCR实验显示MDR1、BCRP、MRP、MGMT和Bcl-2表达在CD133+明显高于CD133-细胞.结论 CD133+是U251细胞系中的耐药细胞亚群,高表达ABC转运体,DNA修复和抗凋亡基因可能是CD133+细胞耐药的重要机制.