小鼠内皮抑素基因的克隆及序列测定

目的 获取小鼠内皮抑素（endostatin)基因并进行序列测定,为今后研究其机制及应用创造条件。方法 以小鼠肝脏总RNA为模板,用RT-PCR法从中扩增endostatin基因,并将所得基因重组入pUC19载体质粒,采用自动测定仪及荧光素标记引物,测定目的基因序列。结果 从小鼠肝组织中成功扩增endostatin基因,莘成功克隆入pUC19载体。经酶切鉴定正确后,命名为pUC-Endo。经测序证实所获基因序列与已知的endostatin基因序列一致。结论 成功构建小鼠endo-statin基因的重组克隆pUC-Endo,为今后利用endostatin进行胶质瘤的抗血管生成治疗研究奠定了实验基础。     

小鼠endostatin基因的克隆、表达及表达产物的活性鉴定

目的 克隆并表达小鼠endostatin基因,并初步检测其血管生长抑制功能,为胶质瘤的基因治疗探索新的途径。方法 从小鼠肝组织用RT-PCR法扩增endostatin基因,重组人pUC19质粒,经测序证实无误后,重组人表达载体pDH,经温度诱导表达,并用鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）实验检测表达产物活性。结果 从小鼠肝组织中成功扩增到endo-statin基因,测序与报道序列一致,重组进pDH后经温度诱导表达,在SDS-PAGE电泳上得到一条新的蛋白表达带。分子质量为20ku,纯化后的蛋白能明显抑制CAM的血管生长。结论 成功构建了小鼠endostatincDNA的重组克隆pDH-Endo,并在大肠杆菌中获得高效表达。在CAM实验中表明纯化后的蛋白具有明显血管抑制作用。为利用endostatin进行脑胶质瘤等实验 全瘤的基因治疗奠定了实验基础。     

Angiostatin kringle(1-3)体外诱导人脐静脉内皮细胞凋亡

目的　探讨 angiostatin kringle (1- 3) [简称 AK(1-3) ]抑制血管内皮细胞增殖的作用机制 .方法　以加入重组人 AK(1- 3)蛋白 (30 0 nmol· L- 1 )的含 10 0 m L· L- 1小牛血清 DMEM培养基培养人脐静脉内皮细胞 ECV30 4,72 h后 ,采用透射电镜、流式细胞术细胞周期分析和核 DNA琼脂糖凝胶 (15 g· L- 1 )电泳检测重组 AK(1- 3)蛋白作用后血管内皮细胞的凋亡情况 .结果　实验组 ECV30 4细胞检测到了典型的凋亡 .透射电镜下可见细胞核染色质浓缩、边集、核碎裂及胞质浓缩等凋亡细胞典型的形态学改变 ;流式细胞术周期分析显示在 G1期峰前存在一个凋亡峰 (2 0 .6 % ) ;核琼脂糖凝胶(DNA15 g· L- 1 )电泳呈梯状 .对照组 ECV30 4细胞表现正常 .结论　重组人 AK(1- 3)蛋白诱导了血管内皮细胞的凋亡 ,这是其抑制血管内皮细胞增殖的机制之一     

代谢型谷氨酸受体拮抗剂MCPG对大鼠弥漫性脑损伤的保护作用

目的 观察和探讨代谢型谷氨酸受体拮抗剂α－甲基,４－羧基苯丙氨酸（ＭＣＰＧ）对大鼠弥漫性脑损伤（ＤＢＩ）的保护作用及其机制,方法 在自由落体致ＤＢＩ模型的基础上,通过测定脑组织含水量、ＴＸＢ２,６ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１α,ＣＡＭＰ,ＣＧＭＰ等水平变化,以及应用硝酸镧标记电镜分析观察血脑屏障的通透性改变,探讨ＭＣＰＧ对ＤＢＩ的保护作用及及其机制。结果ＤＢＩ后脑组织含水量增加,ＴＸＢ２,ＣＧＭＰ,ＴＸＢ２     

人脑胶质瘤PTEN表达的意义

目的 检测ＰＴＥＮ蛋白在人脑质瘤细胞中的表达,探讨ＰＴＥＮ表达与胶质瘤病理分级和预后的关系。方法 应用免疫组化方法,检测６３例人脑胶质瘤标本中的ＰＴＥＮ表达,分析其与胶质瘤细胞恶性程度与预后的关系。结果 ＰＴＥＮ阳性染色颗粒定位于细胞质中,在６３例人脑胶质瘤标本中,有３８例（６０％）ＰＴＥＮ呈阳性表达;低分化组的阳性表达率（Ⅲ和Ⅳ级为３７％,１１／３０）明显低于高分化组的阳性表达率（Ⅰ和Ⅱ级为８２     

江西省一例人感染1型猪链球菌病例的流行病学调查与分析

目的通过对江西省一例人感染1型猪链球菌病例的流行病学调查与分析,查找可能的感染来源,为人感染1型猪链球菌病病例的防治提供科学依据。方法采用描述流行病学方法分析。结果经流行病学调查发现,该病例在发病前1周食用过市场上购买的猪肉,可能通过接触携带1型猪链球菌的猪肉感染。结论 1型猪链球菌一般不导致人类感染,但对免疫功能低下或伴有基础性疾病的老年人有致病性,要进一步关注1型猪链球菌毒力的变化和耐药情况,以便今后更好地应对此类病例,减少死亡。     

整合素β1与胶质瘤侵袭性的相关性研究

目的 探讨整合素β１在人脑胶质瘤细胞粘附和侵袭过程中的作用。方法 用免疫组化ＳＡＢＣ法，检测整合素β１在人脑胶质瘤细胞ＳＨＧ４４中的表达；用细胞粘附实验检测其在ＳＨＧ４４细胞粘附中的作用。结果 整合素β１可在人脑胶质瘤细胞ＳＨＧ４４中表达，抗整合素β１抗体可明显抑制人脑胶质瘤细胞ＳＨＧ４４对胶原蛋白Ｉ和胶原蛋白Ⅳ细胞外基质蛋白的粘附。结论 整合素β１在人脑胶质瘤细胞的粘附和侵袭过程中必不可少，抑制     

次声作用后mGluR1α、mGluR5在CA1区表达的改变及MCPG的保护作用

目的探讨次声作用后鼠脑CA1区mGluR1α和mGluR5表达改变的规律,并观察其拮抗剂MCPG的作用。方法160只SD大鼠随机分为次声作用组及MCPG治疗组。两组再分为对照组及次声作用1次、7次和14次组。用8Hz、130dB的次声按规定次数,每次作用2 h。用免疫组织化学染色和原位杂交的方法检测mGluR1α和mGluR5的表达,光镜下观察MCPG治疗后神经元形态的改变。结果与对照组相比较,次声作用1次后,mGluR1α与mGluR5的阳性细胞数和吸光(A)值即改变( P∨0.05);7次组改变最显著( P∨0.01);14次组恢复至正常水平。形态学研究证实,MCPG对CA1区神经元有明显的保护作用。结论次声作用可通过mGluR1α和mGluR5介导兴奋性神经毒作用, 其活性的改变是导致次声性脑损害的因素之一,MCPG对次声性脑损伤具有保护作用。     

一起甲醛浓度超标引起的幼儿园儿童聚集性流鼻血事件的调查与分析

目的对南昌某幼儿园发生的一起以流鼻血为主要症状的事件开展调查,为处理类似事件提供依据。方法开展现场流行病学调查,并在这家幼儿园分楼层进行室内空气监测及采样。结果该事件共报告病例14例,发病率8.24%(14/170)。根据3家不同检测机构的监测结果,显示幼儿园室内甲醛浓度高于《室内空气质量标准》GB/T18883-2002(0.10mg/m~3)结论这是一起由室内甲醛浓度超标导致的以流鼻血为主要症状的事件,应防范学校室内空气甲醛污染引起的健康损害。     

脐血干细胞移植对脑性瘫痪患儿脑脊液的影响

本研究旨在探讨腰穿及静脉脐血干细胞移植对脑脊液常规及生化检验结果的影响. 1资料与方法 选择确诊为脑性瘫痪患儿40例,男23例,女17例;年龄为2～12岁,平均7.6岁.