人趋化素样因子1促使大鼠心肌梗死后心肌细胞增殖

目的 初步研究人趋化素样因子(CKLF)1改善大鼠急性心肌梗死后心功能的机制.方法 选取18只雄性SD大鼠,随机分为三组,每组6只,分别肌肉电转CKLF1质粒、空质粒及盐水.电转后第6天构建大鼠急性心肌梗死模型.电转后第27天处死大鼠,行BrdU/α-actin、Ki67/α-actin免疫组化染色.结果 CKLF1组梗死周边区BrdU阳性细胞明显多于盐水组及空质粒组(33.11±2.10个/高倍视野比14.16±1.63个/高倍视野、 18.46±2.77个/高倍视野, P<0.05);CKLF1组梗死周边区Ki67阳性细胞明显多于盐水组及空质粒组(35.20±8.06个/高倍视野比15.96±3.58个/高倍视野、 17.52±2.66个/高倍视野, P<0.05).盐水组与空质粒组相比,各指标差异无统计学意义.结论 CKLF1可以促进心肌梗死后大鼠心肌细胞增殖.     

Hallopeau-Siemens型常染色体隐性遗传大疱性表皮松解症一家系的基因突变研究

目的鉴定一Hallopeau—Siemens型常染色体隐性遗传真皮型大疱性表皮松解症家系的基因突变，为进一步开展产前诊断奠定基础。方法提取患者及其父母的基因组DNA，应用聚合酶链反应、DNA直接测序明确突变位点，并使用限制性片段长度多态性分析进一步确定该家系的致病原因。结果发现患者COL7A1基因存在2个突变：①第12号外显子上第4326位碱基由胞嘧啶突变为胸腺嘧啶，使第525位氨基酸由精氨酸（G）突变为终止密码（R525X）；②第105号外显子上第27716位碱基由胞嘧啶突变为胸腺嘧啶，使第2510位氨基酸由精氨酸（G）突变为终止密码（R2510X）。其母为R525X突变杂合子，其父为R2510X突变杂合子。结论COL7A1基因的R525X无义突变和R2510X无义突变是引起该患者临床症状的特异突变。     

早期蕈样肉芽肿采用激光捕获显微切割及基因扫描分子诊断基因重排的研究

目的:研究激光捕获显微切割及基因扫描定性检测T细胞受体(TCR)_γ基因重排在早期蕈样肉芽肿(MF)细胞中表达的可行性.方法:激光捕获显微切割(laser capture microdissection,LCM)分离早期MF中的肿瘤细胞,荧光标记引物双重聚合酶链反应(PCR)和基因扫描(GeneScan)分析TCR _γ基因重排.结果:9例早期MF的TCR_γ/基因重排检出率为66.7%(6/9).2例肿瘤期MF的检出率为100%.结论:激光捕获显微切割技术可用于诊断早期MF的TCR_γ基凶重排检测.     

副肿瘤性天疱疮患者人类白细胞抗原-Ⅱ类基因易感性研究

目的 寻找中国汉族副肿瘤性天疱疮(paraneolastic pemphigus,PNP)患者是否存在HLA-Ⅱ类易感基因.方法 共收入PNP患者19例作为研究对象,采用颜色标记的序列特异性寡核苷酸技术(SSOP)对其HLA-DRB1, DQB1位点进行分型,并与正常人资料进行对比,并进行统计学处理.结果 PNP患者中HLA-DQB1*0301,DRB1*08 和 DRB1*11等的基因频率高于正常人群组,但经过组间校正后,校正的Pc值＞0.05,2组间差异无统计学意义.结论 19例PNP患者中未发现HLA-Ⅱ类易感基因.     

connexin 26基因突变与国人遗传性无综合征耳聋相关性分析

目的分析国人遗传性无综合征耳聋与缝隙连接蛋白26（connexin 26,Cx 26）基因突变相关性,从分子水平探讨该病的发病机理。方法收集国人35个无综合征耳聋家系中138名成员,99例散发的无综合征耳聋患者以及100份健康对照个体的外周血DNA样本共337份;采用聚合酶链反应-单链构像多态性（polymerase chain reaction-single stand conformational     

TCR独特型DNA疫苗诱导抗淋巴系统肿瘤免疫反应的实验研究

本研究观察ＴＣＲ独特型ＤＮＡ疫苗诱导ＢＡＬＢ／ｃ小鼠抗肿瘤免疫反应的情况。用ＣＥＭ淋巴瘤细胞系和ＢＡＬＢ／ｃ小鼠作模型,ＲＴ－ＰＣＲ扩增ＣＥＭ系特异性重排的ＴＣＲ Ｖβ基因,克隆到真核表达载体ｐｃＤＮＡ３中作为ＤＮＡ疫苗。用肌内注射法免疫小鼠,间接免疫荧光法检测小鼠抗体生成和用ＭＴＴ法测定ＣＴＬ活性以检测抗独特型的细胞免疫。结果发现,接种ＤＮＡ疫苗后第４周开始小鼠血清中即可检测到特异性抗独特型抗体     

GLA基因的新突变出现在两个典型Fabry家系

目的 报告2个Fabry家系的GLA基因突变特点。方法 2个经临床和病理检查证实的Fabry家系，家系1中连续3代有12人发病，均表现为发作性肢体疼痛；家系2中连续5代有8人发病，多数患者在经末期出现显著的多器官损害表现。对2个家系中的先证者和部分亲属进行PCR扩增其GLA基因的所有7个外显子包括侧翼序列，对PCR产物直接测序。结果 先证者1的GLA基因第1外显子G132T（TGG→TGT）突变，造成W44C替换；先证者2的第6外显子G874C（GCT→CCT），造成A292P替换。两个先证者的母亲都有同其儿子一样的突变，且均为杂合性。结论 经文献检索，两个Fabry家系各存在一个新的GLA基因点突变。同一基因的不同位点的突变导致的临床表现存在很大的差异。由于女性患者和男性一样出现症状，推测这可能是等位基因随机失活导致的显性遗传表现。     

畸形性肌张力不全9例临床分析

畸形性肌张力不全或称原发性扭转痉挛,病因不明.肌张力不全可发生在全身任何部位,常被误诊.现将1980年以来本院收治的9例分析如下.临床资料9例中男5例,女4例.起病年龄为2～10岁,其中7例为6～8岁.5例以下肢运动障碍为首发表现,     

IL-10基因单核苷酸多态性与急性淋巴细胞白血病易感性的相关性研究

目的 探讨IL-10基因单核苷酸多态性与ALL发病易感性的关系.方法 选取2007年1月至2009年12月北京大学第一医院、北京市道培医院115例ALL缓解患者,同时选取323名体检健康者作为对照组.采集ALL患者的骨髓以及健康对照者的外周血标本,提取DNA.设计IL-10启动子区-819C/T、-592A/C引物做PCR,应用限制性内切酶Msl Ⅰ、HpyCH4Ⅲ分析其限制性片段长度多态性,并测序验证;同时分析IL-10基因-819位点、-592位点各基因型构成及等位基因在ALL患者组和健康对照组间的差异.用实时定量PCR检测ALL患者EB病毒DNA和BCR/ABL融合基因,分析IL-10基因-819位点、-592位点各基因型构成及等位基因在EB病毒阳性和阴性组间、BCR/ABL融合基因阳性和阴性组间的差异.结果 ALL患者组IL-10基因-819位点的-819CC、-819TT、-819CT基因型比例分别为14.8%(17/115)、45.2%(52/115)、40.0%(46/115),-592位点的-592AA、-592CC、-592AC基因型比例分别为43.5%(50/115)、16.5%(19/115)、40.0%(46/115);健康对照组-819位点的-819CC、-819TT、-819CT基因型比例分别为9.9%(32/323)、16.4%(53/323)、73.7%(238/323),-592位点的-592AA、-592CC、-592AC基因型比例分别为11.8%(38/323)、15.5%(50/323)、72.8%(235/323),ALL患者组与健康对照组间-819和-592位点基因型构成差异均有统计学意义(x2值分别为46.000和54.550,P均＜0.05＝.ALL患者组-819T等位基因比例为65.2%(150/230),-592A等位基因比例为63.5%(146/230),而健康对照组分别为53.5%(344/646)和48.1%(311/646),差异均有统计学意义(x2值分别为9.877和15.986,P均＜0.05＝.ALL患者中42例检测了EB病毒DNA,其中EB病毒阳性22例,EB病毒阴性20例.EB病毒阳性组-819位点的-819CC、-819TT、-819CT基因型比例分别为9.1%(2/22)、40.9%(9/22)、50.0%(11/22),-592位点的-592AA、-592CC、-592AC基因型比例分别为31.8%(7/22)、13.6%(3/22)、54.5%(12/22),EB病毒阴性组分别为35.0%(7/20)、45.0%(9/20)、20.0%(4/20)和35.0%(7/20)、45.0%(9/20)、20.0%(4/20),2组基因型构成差异均无统计学意义(P均＞0.05).ALL患者中36例进行了BCR/ABL融合基因检测,其中阳性20例,阴性16例.BCR/ABL融合基因阳性组-819位点的-819CC、-819TT、-819CT基因型比例分别为0%(0/20)、45.0%(9/20)、55.0%(11/20),-592位点的-592AA、-592CC、-592AC基因型比例分别为45.0%(9/20)、5.0%(1/20)、50.0%(10/20),BCR/ABL融合基因阴性组分别为18.8%(3/16)、50.0%(8/16)、31.3%(5/16)和50.0%(8/16)、18.8%(3/16)、31.3%(5/16),2组基因型构成差异均无统计学意义(P均＞0.05).结论 IL-10基因-819位点TT基因型和-592位点AA基因型人群易患ALL.

Abstract：

Objective To observe the relationship of IL-10 gene single nucleotide polymorphism and the susceptibility to ALL. Methods The bone marrow and peripheral blood samples from 115 ALL patients and 323 healthy controls were collected in Peking University First Hospital and Beijing Dao-pei Hospital from January 2007 to December 2009. The DNA were extracted from all samples. The primers of -819C/T and -592A/C in the promoter region of IL-10 gene were designed for the PCR. The restrictive fragment length polymorphism of IL-10 gene was analyzed by using restrictive enzyme Msl Ⅰ and HpyCH4 Ⅲ.Sequencing was done in part of these samples to confirm the results of PCR. The differences of genotypes and allele ratio of -819 and -592 sites were analyzed between the ALL patients and healthy controls. Real-time quantitative PCR was performed to detect the EB virus (EBV) infection and the expression of BCR/ABL fusion gene. The differences of genotypes and allele ratio of -819 and -592 sites were analyzed between the positive and negative group. Results The genotype ratios of -819CC, -819TT, - 819CT, -592AA,- 592CC and - 592AC were 14. 8% ( 17/115 ), 45.2% ( 52/115 ), 40. 0% ( 46/115 ), 43.5% ( 50/115 ),16. 5% ( 19/115 ), 40. 0% ( 46/115 ) in ALL patients, and were 9. 9% ( 32/323 ), 16. 4% ( 53/323 ),73.7% ( 238/323 ), 11.8% ( 38/323 ), 15.5% ( 50/323 ), 72. 8% ( 235/323 ) in the healthy controls,respectively. The genotypes of -819 and -592 sites had statistically significant differences between the two groups(x2 values were 46.000 and 54.550, all P ＜ 0. 05 ). The allele ratio of -819T and -592A were (65.2%, 150/230) and (63.5%, 146/230) in ALL patients, while they were 53.5% (344/646) and 48. 1% (311/646)in the healthy controls. There were statistically significant differences between the two groups (x2 values were 9. 877 and 15.986, all P ＜ 0. 05 ). The EBV DNA were detected in 42 ALL patients,among which 22 were positive and 20 were negative. The genotype ratios of -819CC, -819TT, -819CT,-592AA, - 592CC, - 592AC in EBV positive group were 9. 1% ( 2/22 ), 40. 9% ( 9/22 ), 50. 0%(11/22) ,31.8% ( 7/22 ), 13.6% ( 3/22 ), 54. 5% ( 12/22 ), while they were 35.0% ( 7/20 ), 45.0%(9/20) ,20. 0% (4/20) ,35.0% (7/20) ,45.0% (9/20) ,20. 0% (4/20) in the EBV negative group. The genotypes of -819 and -592 sites showed no statistical differences between the two groups( all P ＞ 0. 05 ).The BCR/ABL fusion gene were detected in 36 ALL patients, among which 20 were positive and 16 were negative. The genotype ratios of - 819CC, - 819TT, - 819CT, - 592AA, - 592CC, - 592AC in BCR/ABL positive group were 0% (0/20) ,45.0% (9/20) ,55.0% ( 11/20), 45. 0% (9/20) ,5.0% (1/20) ,50. 0%( 10/20), while they were 18. 8% ( 3/16 ), 50. 0% ( 8/16), 31.3% ( 5/16 ), 50. 0% ( 8/16 ), 18. 8%(3/16), 31.3 % (5/16)in the BCR/ABL negative group. The genotypes of -819 and -592 sites showed no statistical differences between the two groups ( all P ＞ 0. 05 ). Conclusion The population with - 819TT and - 592AA genotype of IL-10 gene shows susceptibility to ALL.     

不同剂量大豆异黄酮对去卵巢大鼠骨密度和血脂影响的研究

目的探讨不同剂量的大豆异黄酮对去卵巢大鼠骨密度和血脂水平的影响.方法选用43只10w龄性成熟SD雌性大鼠行去势手术,2w后采用完全随机的方法分为5组:阴性对照组(溶媒花生油灌胃)、阳性对照组(戊酸雌二醇500ng/g·BW·d)、大剂量组(大豆异黄酮2500μg/g·BW·d)、中剂量组(大豆异黄酮500μg/g·BW·d)和小剂量组(大豆异黄酮50μg/g·BW·d).分别于给药前和给药6周后测量总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDC)、低密度脂蛋白(LDL),并测量腰椎和股骨的骨密度.结果给大豆异黄酮6周后,大、中、小剂量组和阳性对照组腰椎骨密度均高于阴性对照组;大剂量纽骨密度的增加,有显著性差异(P＜0.05);中剂量组骨密度增加的程度和阳性对照组(戊酸雌二醇组)相似,但与阴性对照组比较无显著性差异(P＞0.05);大豆异黄酮对股骨骨密度无明显影响.大鼠去卵巢后TC和LDL下降,给大豆异黄酮后使TC和LDL进一步下降,以大剂量组最为显著,中剂量组的作用与阳性时照组相似,小剂量组无作用.结论大豆异黄酮具有雌激素样作用,能增加去卵巢大鼠的腰椎骨密度,进一步降低由于去卵巢引起的血清TC和LDL下降,它的作用强度与剂量呈正比.因此大豆异黄酮的作用值得进一步研究,以确定它是否具有临床价值.