空肠弯曲菌致鸡格林─巴利综合征动物模型的初步研究

我们对１０７只鸡进行了ＣＪ致ＧＢＳ动物模型研究。其中８只发生瘫痪，５只双侧坐骨神经为节段性脱髓鞘，３只坐骨神经Ｗａｌｌｅｒｉａｎ样变性，由此证明，实验菌株（自病人大便中培养获得，属ＣＪ生物学Ｉ型）为ＧＢＳ致病原因之一，且ＧＢＳ中，存在一类的运动轴索变性为主的亚型。     

空肠弯曲菌的双向电泳系统可重复性评价

目的:对空肠弯曲菌(Cj)的双向电泳(2DE)系统可重复性和稳定性进行评价,为空肠弯曲菌的蛋白质组学研究奠定基础。方法:选取一株空肠弯曲菌,培养48小时后制备全菌蛋白,进行双向电泳。比较不同上样量和不同批次对实验结果的影响。结果:不同批次和不同上样量的胶进行比较,蛋白质的匹配率均可达到90.89%;未匹配蛋白主要是一些低丰度蛋白;增加上样量可增加低丰度蛋白的检出,但可产生蛋白质的共迁移,因此选择合适的上样量很重要;不同批次蛋白质点在等电点方向的位置偏移为0.62±0.37mm,在SDS-PAGE方向的位置偏差为0.72±0.51mm,相对含量的相关系数为0.973。结论:表明空肠弯曲菌2DE的系统具有很好的稳定性及很高的可重复性,符合蛋白质组学的要求,实验结果具有可比性。     

甘油果糖对人RBC、大鼠RBC的作用及输液安全性的研究

目的:探讨甘油果糖注射液(Glycerol and Fructose Injection)对人红细胞(Red blood cell,RBC),大鼠RBC的作用及对大鼠输液安全性的研究,以指导临床应用。方法:以40例健康成人RBC、32只sD大鼠RBC为研究对象,进行体外溶血试验;以72只SD大鼠为研究对象,进行输液安全性研究,研究组为甘油果糖注射液,对照组为生理盐水注射液,应用改良酸化甘油溶解实验测定甘油果糖注射液对人RBC和大鼠RBC的溶解程度,应用邻-甲联苯胺氧化显色法测定甘油果糖注射液对上清液游离血红蛋白(Hemoglbin,HB)含量的影响。同时测定研究组和对照组大鼠血浆游离HB、蛋白非结合胆红素(间接胆红素)、尿素氮(Blood urea nitrogen,BUN)、肌酐的含量,以对甘油果糖注射液安全性进行研究。结果:体外试验为甘油果糖注射液对人RBC和大鼠RBC的溶解程度与生理盐水相似,对上清液游离HB含量无明显影响。对大鼠给予甘油果糖注射液和生理盐水,最快输液速度6ml/min和最大输液量30ml/kg/d,24小时后测定大鼠血浆游离HB、蛋白非结合胆红素、BUN、肌酐的含量,两组结果相似。结论:甘油果糖注射液在体外对人RBC和大鼠RBC无明显溶解作用。在大鼠体内也没有发现有溶血作用,对肾脏功能影响与生理盐水相似。     

不同类型Guillain—Barre综合征患者血清中IL—6和sIL—6R …

目的　探讨白细胞介素 6 (IL - 6 )及可溶性白细胞介素 6受体 (s IL - 6 R)在不同类型 Guillain- Barre综合征 (GBS)免疫发病机制中的作用。方法　采用酶联免疫法对急性运动轴索性神经病 (AMAN)和急性炎性脱髓鞘性多发性神经病 (AIDP)患者血清中 IL - 6及 s IL - 6 R水平进行检测。结果　 AMAN和 AIDP患者急性期血清中 IL -6水平显著升高 ,且与病情有关 ,而 s IL - 6 R水平却无明显升高。 AMAN组与 AIDP组相比 ,IL - 6及 s IL - 6 R含量均无显著差异。结论　 IL - 6在 AMAN和 AIDP免疫发病机制中均起重要作用 ,其作用在两者之间无显著差异。 s IL -6 R在 GBS发病中不起重要作用。     

Ⅱ相酶诱导剂CPDT对大鼠肝脏及中枢神经系统NQO1诱导作用研究

目的:研究Ⅱ相酶诱导剂CPDT对大鼠肝脏及中枢神经系统脑与脊髓NQO1的诱导作用。方法:新鲜配制CPDT豆油溶液,以不同浓度125μmol/kg/day、250μmol/kg/day、500μmol/kg/day灌胃给药7天,另一500μmol/kg/day组连续给药14天后,取出肝脏、大脑皮层及脊髓组织,经WesternBlot技术检测NQO1表达情况。结果:CPDT500μmol/kg/day可明显诱导肝脏NQO1表达上调,而对大脑皮层和脊髓诱导作用不明显。延长给药时间至14天后,NQO1表达无显著增加。结论:血脑屏障的存在可能是CPDT不能诱导大脑皮层和脊髓NQO1表达增加的原因之一。     

抗癫癎药物与大鼠海马CA1区胶质细胞TUNEL阳性表达关系的研究

目的:探讨抗癫癎药物对大鼠海马胶质细胞凋亡的影响。方法:35只60天龄SD大鼠随机分为生理盐水组(NS)、戊四氮(PTZ)组、卡马西平组(CBZ)、丙戊酸钠组(VPA)、苯妥英钠组(PHT)、托吡酯组(TPM)、拉莫三嗪组(LTG)7组,起始体重(200±20)g,戊四氮点燃其中6组制作癫癎模型,再给与抗癫癎药物治疗3周,应用TUNEL法观察大鼠海马胶质细胞的阳性表达率。结果:CA1区胶质细胞TUNEL阳性表达:NS组阳性率4.195%,PTZ组阳性率6.536%,CBZ组阳性率4.321%,VPA组阳性率5.587%,4组之间TUNEL阳性表达率差异无显著性(χ2=1.158,P>0.05);PHT组阳性率24.460%,TPM组阳性率21.605%,LTG组阳性率18.902%,三组之间TUNEL阳性表达率差异无显著性(χ2=1.378,P>0.05)。NS组、PTZ组、CBZ组、VPA组与PHT组、TPM组、LTG组之间TUNEL阳性表达率差异有显著性(χ2=70.227,P<0.005)。结论:大鼠癫癎模型经PTH、TPM、LTG治疗后,海马CA1区存在TUNEL阳性胶质细胞。     

Creutzfeldt-Jakob病1例

患者，男性，56岁，农民。主因失眠、头晕一月余，情绪异常、记忆力减退20天入院。一个多月前因村里分地闹矛盾后出现失眠，伴间断头晕，并且变得沉默，不愿与他人交流。入院20天前逐渐出现精神烦躁、反应迟钝、计算力下降及记忆力减退，主要为近事记忆力差，在外院诊断“病毒性脑炎”，住院治疗12天.     

急性复发性格林-巴利综合征(附临床与电生理随访)

<正> 例1,女,40岁,主因腹泻后双手足麻木、憋胀、烧灼感半月之后,出现双下肢不能走路,双手不能持物,于1994年10月入院。发病一个月出现呼吸困难、咳嗽力弱而已行气管切开。查体:神清,7、9、10对颅神经损害,四肢肌力2～3级,腱反射消失,四肢末端痛觉减退,双下肢深感觉障碍。脑脊液蛋白3.0G/L,细胞数8个。患者于1987,89,91年曾3次发作,经用激素及抗菌素治疗3个月基本恢复正常。临床诊断复发性GBS。本次住院经用激素及抗菌素治疗,2个     

Wistar大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎模型的建立

目的:建立Wistar大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalo-myelitis,EAE)模型,并检测可溶性血管细胞黏附分子-1(soluble vascular cell adhesion molecule-l,sVCAM-1)在EAE大鼠中的动态表达。方法:将豚鼠麻醉后,不用磷酸盐缓冲液(PBS)灌注,直接取新鲜豚鼠全脊髓制备匀浆(Guinea Pig Spinal Cord Homoge-nate,GPSCH)为抗原,免疫Wistar大鼠建立EAE的动物模型。观察其体重及神经功能评分的变化;取脑、脊髓组织石腊包埋,病理切片,光镜观察;采用双抗体夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清中sVCAM-1的表达。结果:Wist-ar大鼠在免疫后10天出现明显的神经系统体征,发病率达100%;脑脊髓组织可见血管周围炎细胞呈袖套样浸润;sV-CAM-1的表达与对照组比较有显著性升高(P<0.01)。结论:采用非灌注法制备的豚鼠全脊髓匀浆作为抗原,能够成功诱发Wistar大鼠的EAE模型,为研究多发性硬化(multiple sclerosis,MS)的发病机制及治疗奠定了一定的基础。     

构建空肠弯曲菌致兔中枢神经系统病变的动物模型

背景:近年来,吉兰-巴雷综合征和眼肌麻痹-共济失调-无反射综合征屡有发现中枢神经系统受累,受累部位包括视神经、脑干和小脑。眼肌麻痹-共济失调-无反射综合征患者的脑干和脊髓小脑束发现MRI异常信号。因此建立空肠弯曲菌感染后脑炎的动物模型并通过影像学、免疫学及病理学等方法手段探讨其形成机制是实验出发点。目的:建立空肠弯曲菌Penner4型感染后中枢神经系统病变的动物模型。设计:随机分组设计、对照动物实验。单位:河北医科大学第二医院影像科、神经内科。材料:实验于2003-08/12在河北医科大学第二医院分子影像实验室完成。选择健康大耳白兔15只,随机分为实验组10只,对照组5只。方法:实验组于第1周将空肠弯曲菌灭活菌液与等体积的完全弗氏佐剂对抽充分乳化后,分别于双腋窝、双腹股沟及背部脊柱旁皮下多点注射免疫,每处1mL,每只总量5mL。以后每2周以单纯空肠弯曲菌灭活菌液腹腔注射加强免疫,每只每次总量5mL,共5次。对照组以相同体积的生理盐水代替空肠弯曲菌菌液,注射方法及时间与实验组完全相同。评价方法:①症状与体征:观察动物精神状态、饮食、尿便及肢体活动状况等。②血清学检查:用酶联免疫吸附法分别检测动物血清中抗空肠弯曲菌抗体、抗IgG型GM1抗体及髓鞘碱性蛋白含量。③影像学观察:使用TOSHIBA1.5T磁共振成像设备分别于每次免疫前随机抽取两组实验动物行MRI检查。扫描序列包括:自旋回波序列T1加权像,扫描参数为500/15ms(TR/TE);快速自旋回波序列T2加权像,4000/108ms(TR/TE);液体衰减反转恢复序列,参数为10000/120ms(TR/TE),翻转角90°,以上扫描层厚4.0mm,层间距0.8mm。④组织学检查:发病动物于初次免疫后4周经心脏灌注致死,立即开颅取视神经、部分白质、海马、脑干、小脑及颈、胸、腰各段脊髓,固定于40g/L甲醛溶液,分别行苏木精-伊红染色、坚固蓝染色及髓鞘碱性蛋白免疫组化染色。免疫后10周于实验组内随机选取5只及对照组5只以同样方法获得组织学标本。主要观察指标:症状与体征;动物血清中抗空肠弯曲菌抗体、抗IgG型GM1抗体及髓鞘碱性蛋白含量;影像学观察;组织学观察。结果:纳入动物15只,14只进入结果分析,实验组中1只动物于免疫后4周时死亡。①实验组1只动物于免疫后2周出现精神症状及肢体活动障碍。②实验组动物血清抗空肠弯曲菌-IgG抗体滴度在2～4周达到高峰,自第2周起,实验组动物血清A值显著大于对照组(实验组、对照组分别为1.923±0.403,0.973±0.633,P<0.05)。IgG型GM1(A值)在第8周时明显升高,但与对照组比较差异无显著性(实验组、对照组分别为0.115±0.042,0.097±0.039,P>0.05)。血清髓鞘碱性蛋白含量(A值)均在第8周时显著上升(0.134±0.041)。③影像学检查发现实验组动物在免疫后2～4周出现不同程度的颅脑MRI异常信号。④组织学改变见实验组动物脑干、延髓、颈髓、胸髓及腰髓等部位髓鞘肿胀,未见炎细胞浸润及髓鞘脱失。对照组上述部位均未见明显改变。结论:空肠弯曲菌Penner4型可诱发中枢神经系统病变。