定量血流分数在冠状动脉粥样硬化性心脏病诊疗中的应用

冠状动脉计算生理学快速发展,冠状动脉造影衍生的定量血流分数（QFR）用于评估冠状动脉血流动力学狭窄,与侵入性检查指标血流储备分数具有良好的一致性。该文介绍QFR的原理及其在冠状动脉粥样硬化性心脏病中的诊断价值、临床应用和预后研究。     

实时荧光PCR法检测DPYD*9等位基因的单核苷酸突变

目的:建立一种简便、特异的对二氢嘧啶脱氢酶基因DPYD*9进行等位基因分型的方法。方法:以DPYD基因为靶合成含突变位点的野生型引物WF、突变型引物TF和共同的下游引物R,用DNA荧光嵌入染料SYBRG reenⅠ进行荧光PCR扩增,对产物进行溶解曲线分析以确定基因型;同时优化了引物浓度,分析其灵敏度并与普通PCR进行了比较,对20份PCR产物进行了验证。结果与结论:以野生型基因组为模板时,WF和R组合有荧光响应,而TF和R组合无荧光响应;当以突变型基因组为模板时,TF和R组合有荧光响应,而WF和R组合无荧光响应。两者Ct值均为24,Tm值均为83oC。优化引物浓度为0.25μmol/L,荧光PCR可分出10个模板拷贝数的基因型,而普通PCR只能区分模板为8.0×102拷贝数的基因型。PCR产物测序证实荧光PCR法与直接测序结果一致。该方法能准确快速地区分DPYD*9的基因型,敏感性和特异性强。     

多药耐药细胞株A549/Gem的建立及其生物学特性研究

背景和目的多药耐药是导致非小细胞肺癌患者生存期缩短的重要因素。本研究建立了多药耐药细胞株A549/Gem;通过研究其生物学特性,初步从细胞水平分析其获得性耐药的可能机制。方法以人肺腺癌细胞株A549为亲代细胞,采用"临床血浆峰浓度冲击与逐步增加剂量相结合诱导"法,用吉西他滨进行诱导,建立多药耐药细胞株A549/Gem,把诱导过程中的细胞命名为A549/Gem'。分别在诱导前、诱导过程中和诱导成功后的三个不同时间点,应用MTT法检测其耐药指数和对其他化疗药物的敏感性,置于倒置光学显微镜下观察形态学特征,通过绘制生长曲线计算倍增时间,流式细胞术分析细胞周期分布,免疫细胞化学染色检测P53、EGFR、c-erb-B-2、PTEN、PCNA、c-myc、VEGF、MDR-1、Bcl-2、nm23、MMP-9、TIMP-1和CD44v6蛋白的表达,实时荧光定量PCR法检测RRM1 mRNA表达。结果A549/Gem~ 细胞对吉西他滨耐药指数为163.228,对长春瑞宾(耐药指数为5.587±1.210)、多西他赛(耐药指数为102.147±10.259)、氟尿嘧啶(耐药指数为38.694±9.635)、依托泊甙(耐药指数>1000)、顺铂(耐药指数为2.357±11.209)耐药,对紫杉醇(耐药指数为0.264±0.024)、奥沙利铂(耐药指数为0.596±0.128)敏感;倍增时间(146.941h)比A549细胞(186.479h)缩短,G0-G1期细胞(分别为77.07%、71.30%)增多,失去PTEN、PCNA和MDR-1表达,P53、Cerb-B-2和bcl-2表达减弱,出现EGFR( )、c-myc( )表达,nm23表达增强,而MMP-9、VEGF、CD44v6和TIMP-1表达无变化,RRM1 mRNA的相对表达量明显增多。A549/Gem细胞对吉西他滨的耐药指数为129.783,并保持长春瑞宾(耐药指数为4.969±1.203)、多西他赛(耐药指数为58.669±15.206)、依托泊甙(耐药指数>1000)、顺铂(耐药指数为92.594±0.269)耐药性和紫杉醇敏(耐药指数为0.584±0.115)感性,但均较A549/Gem'细胞有所降低,而对奥沙利铂的敏感性(耐药指数为0.259±0.195)和对氟尿嘧啶的耐药性(耐药指数为0.958±0.152)消失,倍增时间(155.749 h)比A549/Gem'细胞稍延长,G0-G1期细胞稍减少,P53、EGFR、PCNA和MDR-1表达与A549/Gem'相同,出现TIMP-1、PTEN表达,Cerb-B-2、MMP-9、c-myc和bcl-2表达增强,nm23表达消失,而VEGF和CD44v6表达始终无变化,RRMl mRNA的相对表达量较A549/Gem'明显减少。与A549细胞相比,A549/Gem细胞逐渐呈现出如下形态学特征:形态不规则、形态各异、大小不一,且透光性减弱。结论A549/Gem细胞的生物学特性较A549细胞发生较大变化,其多药耐药性的发生与多种基因表达有关。     

儿童急性良性肌炎26例临床和实验室检查特点

目的探讨儿童急性良性肌炎的病因、临床及实验室检查特点。方法分析26例患儿的临床及实验室资料。结果26例患儿均呈急性起病，病前有呼吸道感染21例，消化道感染5例；多发生在学龄前期和学龄期儿童，男孩多见；冬春季发病高，主要表现为双下肢肌肉疼痛和步态异常。血清肌酸磷酸激酶（CPK）增高数十倍以上，CPK的下降与临床症状的消失相平行。该病具有自限性，无特殊治疗方法。结论本病起病急，以双下肢肌肉疼痛伴步态异常为特点，CPK异常升高，预后良好。     

片剂,散剂中二甲基硅油含量测定的最优条件选择

二甲基硅油为当今国内外所采用的消泡沫药。其气雾剂用于急性肺水肿的急救,片剂用于非机械性梗阻引起的胃肠胀气,散剂用于胃镜检查。在各种制剂中主药二甲基硅油的含量都采用重量法测定。其测定条件对结果影响很大。为此设计了以下实验,优选出了制剂中二甲基硅     

婴儿肝炎综合症合并胆系感染22例临床分析

22婴儿肝炎综合症(以下简称婴肝)的临床及实验室资料表明,胆系感染是婴儿肝炎综合症常见并发症,黄疸和度越重,消退越慢,胆系感染发生率越高,当可疑胆系感染时,应做十二脂肠引流术,根据细菌学检查结果 先用合适抗生素治疗.     

老年重症呼吸衰竭病人行双正压通气治疗的管理

重症呼吸衰竭 (下称呼衰 )是老年人死亡的重要原因 ,在综合治疗的基础上 ,改善和增加通气以达到纠正机体缺氧和促进二氧化碳排出是治疗呼衰的关键。 1999～ 2 0 0 1年我科采用鼻面罩双水平正压通气治疗呼衰 5 8例 ,临床疗效良好。护理体会如下。1　临床资料1.1　一般资料5 8例中 ,男 4 6例、女 12例 ,年龄 6 5～ 86岁 ,平均 6 9 2岁。原发疾病 :慢性阻塞性肺疾病并肺心病加重 2 3例 ,重症肺炎 8例 ,支气管哮喘 8例 ,慢性喘息性支气管炎 11例 ,肺癌合并肺部感染 5例 ,术后呼吸窘迫 3例。病人明显呼吸困难 ,常规鼻导管给氧无缓解 ,其中 12例合…     

肿瘤多药抗药基因表达几种检测方法的临床应用与评价

多药抗药基因是目前国内外研究和探索的热点，其检测方法较多。本文简介了核酸分子原位杂交、反录－ＰＣＲ、Ｎｏｒｔｈｅｒｎ Ｂｌｏｔ，Ｓｌｏｔ Ｂｌｏｔ和免疫组化技术等下余种常用检测方法的原理、优缺点以及目前在白血病及实体瘤检测中的应用和存在的问题。