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目的探讨建立基于干细胞的小鼠胃幽门部类器官体外长期培养体系的方法,分析实验操作中的注意事项,为促进胃发育、生理、感染和肿瘤发生等研究提供理想的实验模型。方法培养和收集R-Spondin1、Wnt-3A条件培养基,按生长因子比例制备类器官培养基。处死C57BL/6小鼠,分离胃幽门部,彻底清洗、消化并收集胃腺体。基质胶包埋后加入类器官培养基,显微镜下观察类器官生长状况。收集生长时间为1个月和5个月的类器官,制成石蜡标本,行HE和Ki67免疫组织化学染色,比较两个时间点的类器官形态和增殖能力。结果在基质胶和类器官培养基的作用下,胃幽门部类器官能长期持续培养达7个月以上。组织形态上,生长时间为1个月和5个月的类器官均显示由单层柱状上皮构成。Ki67阳性细胞数前者稍高,但后者仍具一定的生长增殖能力。结论成功建立了小鼠胃幽门部类器官体外长期培养体系,建立了类器官的石蜡样本处理方法并优化步骤,提供了具广泛应用前景的新兴的实验模型。 相似文献
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刘春玲刘春菊刘希陈玉洁李志怀隰艳华 《中国药师》2017,(6):1139-1141
摘 要 目的:建立超高效液相色谱-质谱联用法(UPLC-MS/MS)检测雷迪帕韦原料药中潜在基因毒性杂质1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(EDC)的残留量。方法: 色谱条件:采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(75 mm×4.6 mm,3.5 μm),流动相为甲醇-0.1%甲酸溶液(50∶50),流速为0.3 ml·min-1,柱温为30 ℃,进样量为5 μl。质谱条件:采用电喷雾离子源(ESI),多级反应监测(MRM),正离子扫描模式,离子喷雾电压为2 500 V,离子源温度为500 ℃,雾化气为379.0 kPa,辅助气为275.6 kPa,气帘气为137.8 kPa,碰撞气为41.3 kPa,离子碰撞能为15 V,扫描时间为100 ms,用于定量分析的MRM离子对为m/z→156.2/86.1。结果: EDC的线性范围为0.03~2.25 μg·mL-1(r=0.999 0);检测限为0.03 ng,定量限为0.08 ng;平均回收率为98.3%(RSD=5.7%,n=9)。结论:本方法操作简便、快捷、结果准确,可用于雷迪帕韦原料药中潜在基因毒性杂质EDC的质量控制。 相似文献
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医患纠纷不但给医方造成严重的不良影响,同时也带来许多危害.医患纠纷已成为困扰医院管理者和医务人员的难题之一.
一、原因
1.医德医风问题:有一部分医务人员服务态度不端正,缺少服务意识,当患者对诊疗效果不满意时即转化为医疗纠纷. 相似文献
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88.
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的:利用维生素K3(VK3)复制HeLa细胞氧化应激模型,探讨细胞外信号调节激酶(ERK)途径在氧化应激诱导自噬过程中的作用。方法:将人宫颈癌 相似文献
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