调节性B细胞与自身免疫性疾病

以往认为,B淋巴细胞在自身免疫病中作为致病性淋巴细胞发挥作用.近年却发现,在自身免疫病小鼠模型中,采用B细胞清除疗法会加重疾病进程,提示B细胞具有免疫调节功能.调节性B细胞(Breg)是新近发现的一群新的B细胞亚群,它存在于B细胞多个亚型中.Breg通过刺激其表面分子,诱导释放调节性细胞因子如IL-10发挥调节作用.在不同自身免疫性疾病中,各种免疫细胞都可以成为Breg作用的靶细胞,表明Breg在自身免疫病复杂网络中的强大调节作用.     

补肾益气方对正常早孕期人细胞滋养层细胞生物学行为的影响

目的 探讨补肾益气方对正常早孕期人细胞滋养层细胞增殖、侵袭、分化等生物学行为的影响。方法 体外培养正常早孕期人细胞滋养层细胞,分别设空白对照组、5％含药血清组、10％含药血清组、20％含药血清组,用扫描电镜、噻唑蓝(MTT)法、流式细胞仪、Transwell侵袭实验检测含药血清作用24h、48h、72h后细胞的形态、增殖活性及侵袭力的变化。结果 含药血清培养24h、48h、72h后,细胞滋养层细胞微绒毛变丰富,伪足增多、延长;细胞在酶联免疫分析仪490nm波长的吸光度值增加(P<0．01);sub-G1期细胞减少(P<0．01),S期细胞增加(P<0．01),G2/M期细胞明显减少(P<0．01);每视野穿过PET膜的细胞数明显增多(P<0．01)。结论 补肾中药促进人细胞滋养层细胞增殖及侵袭力,并可能影响其分化能力。     

CXCL16抗体可阻断BCG和LPS诱导的小鼠免疫性肝损伤（摘要）

目的研究CXCL16抗体体内阻断对小鼠免疫性肝损伤的影响。方法克隆、表达和纯化小鼠趋化因子CXCL16活性蛋白，免疫动物制备特异性抗体。抗体体内注射免疫性肝损伤模型小鼠，观察CXCL16抗体对肝脏损伤、ALT水平及小鼠生存率的影响。结果获得了高纯度的活性CXCL16重组蛋白及其特异性抗体，特异性抗体阻断明显改善肝脏的病理损伤，降低血清中ALT水平、延长模型组小鼠的存活时间。结论获得了具有趋化活性的CXCL16蛋白和特异性抗体，CXCL16抗体对卡介苗和脂多糖诱导的小鼠肝损伤具有显著保护作用。     

肺癌患者CD4+CD25high Foxp3+调节性T细胞的格局变化及意义

目的：研究肺癌患者外周血（PBMC）及肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）中CD4^＋ CD25^high Foxp3^＋调节性T细胞（Treg）的比例改变，探讨其在抗肿瘤免疫中的调节作用。方法：分离肺癌患者PBMC及TIL，FACS分析CD4^＋／CD8^＋T细胞的比值及CD4^＋ CD25^highT细胞占CD4^＋T细胞的比例。Real-time PCR检测Treg特异性转录因子Foxp3基因在PBMC及TIL中的表达。结果：肺癌患者PBMC及TIL中CD4^＋／CD8^＋比值降低；而CD4^＋ CD25^high T细胞在CD4^＋T细胞中所占比例升高；Foxp3基因仅在TIL中高表达，而在PBMC中低或不表达，表明肿瘤局部的CD4^＋ CD25^high T细胞主要是CD4^＋ CD25^high Foxp3^＋ Treg。结合临床资料分析显示Treg在肺腺癌比例较高。结论：CD4^＋ CD25^high Foxp3^＋ Treg在肺癌患者肿瘤浸润淋巴细胞中明显升高，可能与其通过细胞与细胞间接触抑制CD8^＋T细胞的杀伤效应，最终发挥免疫抑制效应相关。     

GM-CSF对抗原化抗体基因免疫TH细胞应答的调节作用

目的研究GM-CSF(粒-单核巨噬细胞集落刺激因子)与抗原化抗体联合基因免疫时,GM-CSF对TH细胞应答的调节作用。方法在编码免疫球蛋白重链的质粒中分别克隆黏蛋白1(MUC1)中特异性PDTRP抗原表位和GM-CSF编码基因,构建含PDTRP和GM-CSF编码基因的抗原化抗体表达重组体。经脾免疫和肌肉加强的方式免疫BALB／c小鼠。采用ELISA方法检测小鼠血清中特异性抗体的水平及其亚类并动态观察;RT-PCR方法检测TH细胞分化中细胞因子和转录因子的表达水平。结果抗原化抗体基因免疫能诱导机体产生免疫应答。GM-CSF增强抗原化抗体基因免疫诱生的抗PDTRP特异性IgG抗体水平并且伴随IgG1／IgG2a显著性升高,同时可增强淋巴细胞TH2型细胞因子及转录因子(IL-4、GATA-3)mRNA的表达水平。结论GM-CSF在增强抗原化抗体基因免疫诱导的免疫应答的同时使得免疫应答向TH2方向偏移。     

人黑色素肿瘤相关抗原gp100质粒诱导特异性抗小鼠黑色素瘤的免疫保护效应

目的以人黑色素肿瘤相关抗原hgp100基因免疫小鼠,诱导针对小鼠黑色素瘤的特异性免疫应答及保护效应.方法分别构建含全长人gp100（hgp100）和小鼠gp100（mgp100）编码基因的质粒pcDNA3-hgp100和pcDNA3-mgp100,以100 μgDNA肌肉免疫C57BL/6小鼠3次,每次间隔2周.通过体外免疫功能及体内攻击实验评价hgp100诱导对小鼠黑色素瘤的特异性免疫应答及保护效应.结果与mgp100比较,hgp100能诱导特异性针对mgp100的抗体生成和T细胞增殖及杀伤,产生以IFN-γ分泌为主的特异性免疫应答;hgp100免疫小鼠在小鼠黑色素肿瘤细胞攻击后生存时间显著延长.结论人黑色素瘤相关抗原gp100可诱导特异性抗小鼠黑色素瘤的免疫应答及保护效应.     

IP10对机体抗肿瘤免疫应答的增强作用及其机制

目的：研究IP10对机体整体及肿瘤局部细胞免疫应答的影响，从而探讨其抗肿瘤的作用及机制。方法：基因转染的方法建立稳定表达IP10的4T1细胞株（IP10-4T1）。观察IP10-4T1细胞生长情况，观察荷瘤小鼠的生存情况。^3H-TdR掺入法检测细胞免疫应答水平。Ficoll密度梯度离心法分离肿瘤浸润淋巴细胞，流式细胞技术检测CXCR3的表达。结果：pcDNA3-IP10转染不影响4T1细胞体外生长。IP10-4T1形成的肿瘤生长明显减慢，瘤重显著减轻，该荷瘤小鼠生存率显著增加（P〈0.05）。与对照组比较，IP10-4T1细胞免疫的小鼠脾细胞特异性增殖反应明显（P〈0．05）。IP10-4T1细胞形成的肿瘤内CXCR3^＋细胞浸润增加，肿瘤内分离的淋巴细胞抗原刺激后显著增殖（P〈0．05）。结论：IP10可能通过诱导机体细胞免疫应答、促进肿瘤内淋巴细胞浸润并增强肿瘤内淋巴细胞增殖活性介导抗肿瘤作用。     

从植入载有抗原的海绵中收集肿瘤特异性T细胞方法的应用

将含灭活ＦＢＬ－３瘤细胞的聚氨酯海绵块植入免疫的Ｃ５７ＢＬ／６小鼠皮下，１０天后收集海绵中的浸润淋巴细胞（ＳＩＬｓ），经体外含ｒＩＬ－２的培养系统中扩增后作特异性杀伤试验。结果表明：所获得的ＳＩＬｓ对ＦＢＬ－３瘤细胞显示出明显的特异杀伤活性，而且高于同一宿主脾脏中的致敏Ｔ细胞和未免疫鼠中ＳＩＬｓ。经流式细胞仪分析表明，从免疫鼠中以的ＳＩＬｓ是以Ｌｙｔ２＾＋占绝对优势的Ｔ细胞系列，联合应用化疗与ＳＩ     

OX40和OX40L在免疫应答中的特点及其应用

OX4 0 /OX4 0L是T APC应答过程中的一对重要的协同刺激分子。当T细胞上的OX4 0与APC上的OX4 0L结合 ,OX4 0就将一个协同刺激信号传递给T细胞 ,促进了细胞克隆的扩增和增强其效应功能。OX4 0主要作用于T细胞效应的晚期阶段 ,能促进更多的记忆T细胞生成。在疾病过程中 ,OX4 0仅表达在炎症浸润部位的抗原特异性CD4 + T细胞上 ,因此可为临床诊断和疾病治疗提供依据 ,而且可能成为免疫干预疾病的理想模式     

补肾中药对溴隐亭致流产鼠模型中蜕膜CD56~+NK细胞表面CD69和CD94表达的影响

为了观察补肾中药是否能影响蜕膜CD5 6 + NK细胞比例及其表面CD6 9、CD94的表达 ,从而进一步阐明补肾中药对母胎界面免疫的影响机制。SD大鼠于孕 6～ 8d皮下注射溴隐亭 0 3mg/kg·d ,建立改良的溴隐亭致SD大鼠流产模型 ,随机分为三组。A组为模型组 ;B、C组在孕 1～ 1 1d分别给予大剂量中药 (4 5g/kg·d)、P(8mg/kg·d) ,另设正常孕鼠对照 (D组 )。孕 1 2d处死 ,取蜕膜组织 ,分离成单个细胞悬液 ,用流式细胞分析技术观察 4组蜕膜CD5 6 + NK细胞的量及蜕膜NK细胞表面CD6 9、CD94的表达差异。结果发现 :B组 (P <0 0 5 )、C、D组 (P <0 0 1 )妊娠率与A组相比增加 ,并且有差异 ;B、C组蜕膜CD5 6 + NK细胞比例与A组相比明显增加 ,与D组无差异 ;各组蜕膜CD5 6 + NK细胞表面CD6 9表达无差异 ;B、C、D组CD94的表达与A组相比显著增加 ;A组蜕膜CD5 6 + NK细胞表达CD6 9与CD94相比明显增加 ,B、C组相反。因此 ,补肾中药能影响蜕膜CD5 6 + NK细胞表面CD6 9、CD94的表达 ,可能通过增加CD94的表达 ,抑制CD6 9从而进一步抑制NK细胞的活性 ,起到保胎作用