白细胞介素-10多克隆抗体对缺氧缺血新生大鼠大脑皮层c-fos表达的调节

目的：探讨白细胞介素-10（IL-10）多克隆抗体对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后大脑皮层c-fos表达的调控作用，以期阐明内源性IL-10对缺氧缺血新生动物神经保护作用的可能机制。方法：建立新生大鼠缺氧缺血性脑病标准化的动物模型，应用免疫组织化学和免疫印迹技术，分别对缺氧缺血、IL-10多克隆抗体预处理后予缺氧缺血、免疫对照组及正常对照组4组新生大鼠大脑皮层c-fos表达进行分析。结果：新生大鼠缺氧缺血后，缺血侧大脑皮层c-fos表达明显高于正常对照组（P<0.01），腹腔注射IL-10多克隆抗体可进一步提高大脑皮层c-fos含量（P<0.01）。结论：c-fos的表达可能在缺氧缺血后脑组织损伤演变过程中起着重要的病理作用；IL-10多克隆抗体可以增强脑内c-fos的表达，提示IL-10对缺氧缺血新生动物的神经保护作用可能与其抑制大脑皮层c-fos表达有关。     

乙型肝炎病毒全基因重组真核表达质粒的构建

目的 构建乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）全基因重组真核表达质粒,旨在转染肝细胞,建立 ＨＢＶ复制状态模型。方法体 外连接 ＨＢＶ（ａｙｗ亚型） ＤＮＡ获得 ６．４ ｋｂ的双拷贝 ＤＮＡ片段,然后将其插入 ｐｃＤＮＡ３载体的 ＥｃｏＲＶ位点。结果通过 聚合酶链反应（ＰＣＲ）和酶切筛选和验证获得头尾串联双拷贝ＨＢＶ全基因重组真核表达质粒。结论成功构建了ＨＢＶ 全基因重组真核表达质粒。     

热惊厥对21 d龄大鼠杏仁核PRL、GFAP和FOS表达的影响

目的：探讨催乳素（PRL）参与热惊厥的机制及免疫、神经、内分泌相互调节的形态学基础。方法：采用热水浴诱导大鼠热惊厥模型。21 d龄大鼠随机分为正常对照组（n=6）和高热处理组（n=14）。根据大鼠是否有惊厥，将高热处理组又分为热应激未惊厥组（n=6）和热惊厥组（n=6）（两只未达到5级惊厥弃用）。免疫组织化学染色观察杏仁核PRL，胶质原纤维酸性蛋白（GFAP）和FOS的表达。结果：热应激未惊厥组和热惊厥组大鼠杏仁核PRL，GFAP和FOS阳性表达细胞数均显著高于正常对照组（P<0.01），并且热惊厥组GFAP和FOS表达显著高于热应激未惊厥组（P<0.01），而PRL表达无显著差异（P>0.05）。结论：①中枢PRL参与热惊厥的病理生理过程与热应激有关而与惊厥可能无关。②在热惊厥的发病过程中，杏仁核GFAP和FOS表达上升，表明GFAP和FOS不但与热应激有关，而且也可能与热惊厥的发生有关，热惊厥是在热应激基础上进一步发展的结果。     

乙型肝炎病毒全基因在肝癌细胞中的转染与表达

目的 建立乙型肝炎病毒（HBV）复制状态模型。方法 体外连接HBV DNA获得6．4kb的双拷贝DNA片段,然后将其插入pcDNA3载体的EcoRV位点,通过聚合酶链反应（PCR）和酶切筛选获得头尾串联双拷贝HBV全基因重组真核表达质粒,再通过脂质体介导法转染肝癌细胞。结果 通过G418筛选,对阳性克隆细胞进行十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS－PAGE）和Western免疫印迹分析,证明已将HBV全基因重组真核表达质粒转染至肝癌细胞并获得稳定表达。结论 通过脂质体介导法将HBV全基因转染至肝癌细胞,成功建立了HBV复制状态的细胞模型。     

~(125)I放射粒子植入治疗前列腺癌的护理

[目的]探讨~(125)I放射粒子植入治疗前列腺癌的护理要点。[方法]回顾分析本院13例经~(125)I放射粒子植入治疗前列腺癌的临床护理资料。[结果]13例~(125)I放射粒子植入治疗的前列腺癌病人经术前、术中、术后精准护理,均恢复良好出院。随访2个月至3年,病人均健在,无严重并发症的发生。[结论]对于~(125)I放射粒子植入治疗的前列腺癌病人,术前做好心理护理及准备工作,术中密切配合手术医生的操作,术后监测生命体征、保持导尿管在位通畅、做好会阴护理、必要的放射防护、预防感染及深静脉血栓形成,是保证病人康复的必要条件。     

新生期大鼠反复惊厥上调大脑皮质可塑性相关基因-1蛋白水平

Objective To explore the dynamic expression of a new phospholipid phosphatase, plasticity related gene 1 ( PRG-1 ) in cerebral cortex following recurrent neonatal seizures.Methods A seizure was induced by inhalant flurothyl daily in neonatal Sprague-Dawley rats from postnatal day 6 (P6).Rats were assigned into the recurrent-seizure group (seizures induced in six consecutive days) and the control group.At 3 h,12 h,48 h,14d after the last convulsion,PRG-1 protein level in cerebral cortex was detected by western blot method.Results At 3 h, 12 h,48 h, 14d after the last convulsion in control group, the expression of PRG-1 in cerebral cortex respectively was 1.363 ± 0.742,1.278 ± 0.687 ,0.763 ± 0.374,1.004 ± 0.113, in experimental group , the expression of PRG-1 in cerebral cortex respectively was 1.818 ± 1.093,1.562 ± 0.782,1.024 ± 0.510,1.378 ± 0.279.At 3 h, 12 h,48 h, the expression of PRG-1 in cerebral cortex was not significantly different between the experimental and control group( t = 0.843,0.668,1.011 ,all P ＞ 0.05 ).However, at 14 d, the level of PRG-1 protein in cerebral cortex of experimental group was significantly higher than that of control ( t = 3.041, P ＜ 0.05 ).Conclusion The up-regulated expression of PRG-1 in cerebral cortex may be associated with the recurrent neonatal seizure-induced brain damage.     

新生期大鼠反复惊厥上调大脑皮质可塑性相关基因-1蛋白水平

目的 探索可塑性相关基因-1(plasticity related gene 1,PRG-1)在反复惊厥大鼠大脑皮质中的动态表达及其意义.方法 用三氟乙醚使新生第6天的SD大鼠呈现反复惊厥状态,每天持续30min,连续6d,分别于末次惊厥后3h,12h,48 h和14d取大脑皮质,并每个时间点设未做任何干预对照组,用免疫印迹方法观察PRG-1蛋白表达.结果 末次惊厥后3 h,12h,48 h、14d大脑皮质可塑性相关基因-1的表达,对照组分别为1.363±0.742、1.278±0.687、0.763±0.374、1.004±0.113,实验组分为1.818±1.093、1.562±0.782、1.024±0.510、1.378±0.279.3 h、12h、48 h大脑皮质PRG-1的表达在实验组和对照组无统计学意义(t=0.843,0.668,1.011,均P＞0.05).14d大脑皮质PRG-1的表达,实验组明显高于对照组(t=3.041,P＜0.05).结论 PRG-1在新生大鼠反复长程惊厥后的远期表达增多,提示参与发育期惊厥性脑损伤的病理生理机制.     

发育期大鼠青霉素点燃后大脑皮质自噬标记蛋白LC-3表达及E-64d干预效应的研究

目的研究发育期大鼠反复惊厥后大脑皮层中自噬标记蛋白LC-3的表达,以及E-64d对其表达的影响。方法生后21 d的SD大鼠随机分成惊厥组、对照组、干预组3组,每组24只。惊厥组大鼠隔日腹腔注射青霉素(4.8×106U/kg),连续6次,诱导惊厥发作;对照组大鼠予同等剂量的生理盐水腹腔注射;干预组大鼠于腹腔注射青霉素诱导惊厥发作前,腹腔注射E-64d(4μg)。惊厥组和干预组大鼠于末次惊厥后3 h、12 h、24 h和出生51 d处死并取其大脑皮质,对照组大鼠也在相应时间点取大脑皮质。采用蛋白质免疫印迹技术(Western-blot)分别检测大鼠大脑皮质中自噬标记蛋白LC-3的表达。结果惊厥组大鼠于末次惊厥后3 h、12 h、24 h大脑皮层LC3II/LC3I较对照组升高,差异有统计学意义(t=2.091～10.353,P均<0.05);干预组与惊厥组大鼠比较,LC3II/LC3I降低,差异有统计学意义(t=2.911～5.980,P均<0.05)。在出生51 d时,三组大鼠间差异无统计学意义(P均>0.05)。结论大鼠惊厥急性期LC-3蛋白明显上调,自噬途径被激活,而E-64d参与了自噬途径的调控。     

热应激和热惊厥幼龄大鼠海马及大脑皮层CCK蛋白表达研究

目的 探讨热应激(heat stress,Hs)和热惊厥(febrile convulsions,FC)对大鼠海马和大脑皮层胆囊收缩素蛋白(cholecystokinin,CCK)表达的影响.方法 采用热水浴诱导21日龄大鼠FC模型,应用免疫组织化学技术对HS和FC大鼠CCK在海马和大脑皮层的表达进行分析.结果 对照组中,大脑皮层偶见CCK零星表达.HS组CCK在大脑皮层有较弱表达,主要分布于杏仁周皮质、内嗅皮质和压部后皮质,海马未见表达.而FC组则于大脑皮层、海马见大量CCK强阳性细胞,呈弥漫性分布,无明显核团分布特征.结论 CCK在FC组中大脑皮层和海马各区明显表达,表明CCK参与海马等前脑结构对惊厥活动的中枢调控机制.