加速康复外科理念联合微创技术在结直肠癌手术中的应用价值

结直肠癌是常见的消化道恶性肿瘤之一,据我国最新研究报道,其发病率及死亡率均呈上升趋势[1].对于结直肠癌的临床治疗,尽管放化疗、分子靶向药物治疗及综合辅助治疗愈发成熟,但目前最核心的治疗手段依然是规范性的外科手术治疗.近年来临床研究证实,相对于存在创伤大、并发症多等明显不足的传统开腹手术,结直肠癌微创外科治疗更具有优势.腹腔镜、机器人外科系统等微创技术的发展,在保证肿瘤根治性及手术安全性前提下,可以达到减少创伤、加速康复、改善患者生活质量等治疗效果.加速康复外科(enhanced recovery after surgery,ERAS)理念在临床外科领域普及发展[2],经一系列临床研究及Meta分析已证实,ERAS方案可改善结直肠癌手术康复过程,具有减少手术创伤及应激,减少术后并发症,缩短住院时间,降低住院费用,促进患者快速康复等优点[3,4].因此,加速康复外科联合微创外科技术在结直肠癌外科手术治疗的应用前景倍受关注.本文旨在初步探讨加速康复外科理念在结直肠癌微创手术的临床应用价值,以期促进ERAS理念在结直肠癌微创手术中进一步推广.     

KDR启动子驱动的双自杀基因对人肝癌细胞及脐静脉内皮细胞的特异性杀伤作用

目的 探讨腺病毒介导的KDR启动子驱动的双自杀基凶系统CDglyTK对人肝癌细胞及脐静脉内皮细胞的特异性杀伤作用.方法 用腺病毒AdKDR-CDglyTK感染表达KDR的BEL-7402、HUVEC细胞和不表达KDR的HepG2细胞,观察其感染效率并以RT-PCR方法检测重组腺病毒及转基因细胞CDglyTK的表达,然后给予不同浓度的前药5-FC及GCV处理,MTT法检测该系统对不同细胞株的杀伤效应和旁观者效应.结果 以感染复数MOI为100的腺病毒AdKDR-CDglyTK分别感染各细胞株,重组腺病毒对三种细胞具有相似的感染效率.RT-PCR检测发现,重组腺病毒及感染AdKDR-CDglyT的三种细胞均有目的基因CDglyTK的表达.感染腺病毒的BEL-7402、HUVEC细胞对前药具有较高的敏感性,而HepG2细胞对前药不敏感(P<0.001).将感染腺病毒的细胞与未感染细胞以不同比例混合培养,观察到该系统有明显的旁观者效应.结论 KDR启动子驱动的双自杀基因系统CDglyTK对肝癌细胞及人脐静脉内皮细胞具有特异性的杀伤作用.     

AdKDR-CDglyTK融合基因系统治疗胰腺癌的实验研究

目的 观察腺病毒介导的KDR启动子驱动的CD/TK融合双自杀基因系统(以下简称为AdKDR-CDglyTK)对胰腺癌的治疗作用.方法 采用培养细胞移植法,将人胰腺癌细胞系Capan-2接种于裸鼠背部皮下,建立裸鼠人胰腺癌移植瘤模型.将20只裸鼠随机分为4组,每组5只.分组方法:Ⅰ组:注射重组腺病毒AdKDR-CDglyTK与前药5-FC与GCV;Ⅱ组:仅注射前药5-FC与GCV;Ⅲ组:仅注射重组腺病毒AdKDR-CDglyTKⅣ组:空白对照,不施加任何处理.重组腺病毒AdKDR-CDglyTK采用瘤体内多点注射,5-FC与GCV给药方法采用腹腔内注射的方法,观察各组小鼠的生存状况及肿瘤体积、瘤重、肿瘤生长抑制率、常规病理等指标;应用透射电镜观察细胞超微结构,用TUNEL法检测细胞凋亡率,比较观察各治疗组的治疗效果;并对各组的肿瘤组织行RTPCR的检测,以了解有无双自杀基因CDglyTK的表达.结果 第Ⅰ组裸鼠移植瘤的生长显著受到抑制,第Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组肿瘤生长情况无明显差别.第Ⅰ组肿瘤细胞凋亡指数为(34.20±4.60)%,较对照组显著增加(P=0.00).结论 AdKDR-CDglyTK联合前药5-FC及GCV对人胰腺癌Capan-2细胞具明显的抑制作用,并且诱导裸鼠体内人胰腺癌Capan-2细胞的凋亡.其可能的机制是通过下调凋亡抑制基因Bcl-2的表达.     

"蓝碟"手助技术在腹腔镜腹部手术的应用——附78例报告

目的探讨“蓝碟”（Lapdisc）手助器辅助腹腔镜手术（hand—assisted laparoscopic surgery，HALS）用于腹部手术的可行性。方法建立CO2气腹，根据病变部位和手术的要求，放置trocar和“蓝碟”手助器，对78例腹部疾病施行HALS，观察“蓝碟”手助器在腹部HALSA的实施过程，术中效果及术后临床效果。结果经Lapdisc完成70例HALS，术中出血量100—300ml，平均186ml；手术时间60—240min，平均140min；住院时间9—15d，平均10．2d。8例因腹腔镜下操作复杂危险而中转开腹。结论“蓝碟”手助器使用简单、感觉舒适，对切口提供完美保护，术中能维持良好的气腹状态。“蓝碟”简化传统腹腔镜的操作，可应用于绝大多数腹部外科疾病的HALS，安全可行。     

26 280例结直肠癌患者MLH1和PMS2基因表达情况及临床病理特征的多中心回顾性研究

目的研究MLH1和PMS2蛋白表达情况与临床病理特征。 方法本研究纳入2010年1月至2018年12月包括中国医学科学院肿瘤医院在内7家医院的结直肠癌数据平台的患者205 071人次,其中26 280例免疫组化信息和病例信息满足研究标准。分析MLH1和PMS2基因蛋白表达情况与患者发病年龄、性别、肿瘤大小、病理分期等因素的关系。 结果MLH1缺失率4%,PMS2缺失率3.25%。两种蛋白表达缺失的患者男女比例差异存在统计学意义（均P<0.05）,其发病年龄均小于正常表达组患者（均P<0.0001）。其第二原发癌的发病率也高于正常表达组（均P<0.0001）。MLH1和PMS2蛋白表达缺失的患者肿瘤最大径大于正常表达组（均P<0.0001）,清扫淋巴结总数目也高于正常表达组（均P<0.0001）。此外,与正常组相比,MLH1表达缺失组呈现明显家族聚集倾向（P=0.001）。而在部位上,肿瘤部位发生在右半结肠的患者数据显示,MLH1和PMS2蛋白缺失的发生率高于蛋白表达正常组。肿瘤分期方面,MLH1和PMS2蛋白的T分期在表达缺失组与正常组差异具有统计学意义（均P<0.0001）,M分期中,PMS2蛋白缺失患者的远处转移率低于正常组患者（P=0.0008）。 结论MLH1与PMS2表达缺失的患者发病年龄更早,肿瘤体积大,右半结肠比例相对较高,第二原发癌的发生率更高,伴有更高的淋巴结清扫数目,且与病理分期存在密切关联。     

实时荧光定量RT—PCR检测胃癌细胞中MRP2、MRP3及MRP5mRNA的表达

目的 研究多药耐药相关蛋白2(MRP2)基因及MRP3、MRP5基因在正常胃细胞系GES-1、胃癌细胞株(BGC-823)及胃癌耐药细胞株BGC-823/ADM的表达差异,并探讨其在胃癌耐药中的意义.方法 分别提取GES-1、BGC-823及BGC-823/ADM细胞的总RNA,逆转录cDNA,利用实时荧光定量PCR,根据标准品绘制标准曲线,检测MRP2、MRP3、MRP5基因的表达水平.结果 MRP2基因在胃癌耐药细胞株BGC-823/ADM细胞中的表达量明显高于在胃癌细胞株(BGC-823)的表达,而与其在正常胃细胞系GES-1的表达没有显著性差异;MRP3、MRP5基因表达量在三种细胞中均有显著性差异.结论 MRP2可能参与了胃癌的内在性耐药,而MRP3、MRP5可能与胃癌的获得性耐药有关,实时荧光定量方法是一种灵敏度高,特异性强,重复性好的定量检测方法.     

ceRNAs在结直肠癌中的研究进展

结直肠癌在我国乃至全球范围发生率和死亡率都居于前列,严重危害着人体的健康,虽然结直肠癌的诊断和治疗技术不断提高,但中晚期结直肠癌患者的生存期仍然不佳,因此需要深入理解结直肠癌的发生发展机制,竞争内源性RNA理论的提出加深了对肿瘤形成机制的理解。竞争内源性RNA理论认为假基因转录本、长链非编码RNA、环状RNA、mRNA能作为竞争性内源性RNA,它们拥有编码蛋白mRNA相同microRNA反应元件,能竞争结合microRNA的结合位点,影响功能蛋白的表达而发挥促癌或抑癌的作用。近来大量研究表明竞争性内源性RNA分子在结直肠癌恶性行为中发挥重要功能,因此有必要对这些研究进行归纳梳理,本文目的在于将这些在结直肠癌中研究的竞争性内源性RNA分子进行归类,并阐述这些分子在结直肠癌中的作用。     

手术联合氩超冷刀治疗晚期巨块多灶型肝脏恶性肿瘤

巨块多灶型肝脏恶性肿瘤目前尚无理想的治疗方法。甚至被视为“无法外科治疗”。氩超冷刀是美国最新研制的低温手术系统,我院在国内率先开展该项新技术体外治疗原发性肝细胞癌(HCC)。由于体外治疗受部位、穿刺深浅、并发症等方面的影响,尤其对巨块多灶型的HCC体外治疗比较困难。为此,我们设计采用手术切除,或减体手术切除巨块型肝脏肿瘤.术中联合氩超冷刀(简称枪头)对残余瘤体和肝脏其他段病灶进行治疗,临床观察5例.取得初步疗效,现报告如下。     

明胶酶原A在实验性肝纤维化过程中表达变化

目的研究实验性肝纤维化过程中明胶酶A(mmp-2)酶原蛋白表达的动态变化.方法建立四氯化碳大鼠肝纤维化模型,采用Western印迹法和免疫组化方法,对肝纤维化不同阶段肝内mmp-2的酶原蛋白的表达水平与分布进行了检测.结果在正常大鼠肝组织中有mmp-2的酶原表达.在肝纤维化发生发展过程中mmp-2酶原蛋白表达水平逐渐增强,至肝纤维化中期到达最高峰,到肝纤维化晚期及肝硬变阶段其表达较中期下降,但仍高于正常对照水平.正常肝组织内,mmp-2的表达主要位于汇管区的胆管壁和毛细血管壁及肝窦壁的间质细胞;纤维化时,增生的纤维间隔附近亦有较高表达.结论 mmp-2在肝纤维化的发生、发展直至肝硬变形成过程中发挥着重要作用.