食管鳞癌中bcl-2与nm23-h1基因表达情况与纵隔淋巴结转移的相关研究

目的：研究与探讨bcl-2基因与nm23-h1基因在食管鳞状细胞癌中的表达情况及其与纵隔淋巴结转移的关系。方法：采用免疫组化SP法观察了85例食管鳞癌手术切除标本切片中bcl-2和nm23-h1的表达。结果：63．53％（54／85）肿瘤呈bcl-2阳性表达，bcl-2表达与肿瘤淋巴结转移及TNM分期有关（P均〈0．05）。40％（34／85）肿瘤呈nm23阴性表达，nm23-h1阴性表达与肿瘤侵润深度、淋巴结转移、TNM分期有关（P分别为0．032、0．001、0．001）。单因素分析显示：bcl—2基因与nm23-h1基因表达为影响淋巴结转移的主要因素（OR值分别为6．985、0．014，P〈O．001）。而其他临床病理学参数与淋巴结转移之间未见明显相关（P均〉0．05）。bcl-2基因与nm23-h1基因表达之间呈负相关（0=-0．3849，P〈0．05），在促进肿瘤的进展和转移过程中起联合作用。结论：bcl-2基因与nm23-h1基因联合测定是判断食管鳞癌患者淋巴结转移倾向及预后的一个重要手段。     

上海市社区不同人群乙型肝炎防治健康促进效果评价

目的 了解上海市社区人群乙型肝炎(乙肝)防治知识的认知状况,评价乙肝相关健康促进干预的效果.方法 在调查干预前人群乙肝防治知识认知状况的基础上,采用多种形式健康促进干预措施,比较健康促进前后社区人群乙肝防治知识认知和行为因素的变化.结果 社区人群经乙肝健康促进干预后,对于乙肝传染性、传播途径及疫苗预防的认识由干预前66...     

纤维支气管镜在PICU中的临床应用研究

目的 评估纤维支气管镜(纤支镜)检查及治疗在儿科重症监护中的应用价值.方法 回顾性总结我院PICU 2006年1月至2008年6月收治的97例患儿105例次纤支镜检查及治疗结果.结果 肺炎与肺不张主要原因有气道解剖结构异常、气道严重炎性病变、气管异物、炎性息肉、气管食管瘘;其中气道解剖结构异常最为常见,共45例(42.9%).先天性心脏病(先心病)患儿合并气道解剖结构异常40例(88.9%),明显多于非先心病患儿(P＜0.01);但非先心病患儿合并肺炎及气道严重炎性病变的发生率明显高于先心病患儿(P＜0.05).支气管肺泡灌洗液细菌培养阳性率27.8%,革兰阴性致病菌居多.纤支镜检查有助于气道内出血诊断和气道管理.纤支镜应用过程中,未见与纤支镜应用相关的死亡、大出血、气胸、心律失常等严重并发症的发生.结论 PICU开展纤支镜诊疗安全可靠,具有一定的临床应用价值.     

先天性中枢性低通气综合征1例并文献复习

目的 提高对先天性中枢性低通气综合征(CCHS)的临床和基因特征的认识。方法 总结分析1例CCHS患儿的临床表现、诊断和基因检测结果,并进行文献复习。结果 男,7月龄。以肺部感染、撤机困难入院。入院肺部感染基本控制撤机后,患儿睡眠状态下出现呼吸浅慢,再次予机械通气,模式为双水平正压通气。患儿觉醒时呼吸活跃,入睡后依赖呼吸机,自主呼吸减慢,潮气量减小,出现CO2储留。同时相关辅助检查排除了原发心、肺、脑、神经肌肉及代谢性疾病,临床诊断为CCHS。取患儿及其父母静脉血行PHOX2B基因序列检测,显示患儿PHOX2B第3外显子存在突变（基因型为20/25）,其父母未检出突变,确诊为CCHS。患儿随访至11月龄,呼吸和循环情况尚平稳。结论 CCHS以觉醒时有充足通气,睡眠状态下通气不足为主要表现,行PHOX2B基因突变分析可确诊CCHS。     

上海市1997--2012年戊型肝炎流行特征和基因分型研究

目的 系统分析1997--2012年上海市戊型肝炎(戊肝)的流行特征、血清学和基因分型特点。方法利用国家法定传染病报告数据;采用ELISA检测社区健康人群戊肝病毒(HEV)一IgG抗体,计算标化阳性率;使用巢式RT-PCR、基因测序和GenBank数据构建上海市HEV基因数据库。结果 16年间上海市戊肝以散发为主,发病率呈季节性和周期性,总体略呈下降趋势。男性发病率显著高于女性,患者以30～65岁年中老年人为主。2001--2012年4次社区健康人群抗体水平监测,共采集血清标本3979份,人群HEV-IgG抗体标化阳性率分别为22．32％、18．56％、10．22％和34．43％,抗体阳性率与监测对象的年龄组别和地区分布呈显著关联。对2004--2008年上海市新发现的73株HEV同源性和进化树分析显示,HEV以基因Ⅳ型为主,包含4个已知基因亚型(4a、4d、4h和4i);人病毒株序列与猪基因Ⅳ型病毒株序列(GUl8885l、DQ450072和EF570133)的核苷酸同源性分别为83．09％～97．96％、85．87％一97．26％和83．80％～95．10％;不同区县来源的HEV分离株中,同源性>99％的序列有59对。结论戊肝仍是上海市需长期重点防治的急性传染病之一。其人畜共患命题还有待进一步探索。     

奥沙利铂联合吉西他滨治疗晚期非小细胞肺癌的疗效观察

目的：观察奥沙利铂（OXA）联合吉西他滨（GEM）治疗晚期非小细胞肺癌（NSCLC）的疗效和毒副反应.方法：54例经病理组织学证实的NSCLC初治患者,临床分期Ⅲb-Ⅳ期,随机分为GEMOX组（GEM＋OXA）和GP组（GEM＋ DDP）.GEMOX组（GEM） 1000mg/m2,d1,d8;OXA 130mg/m2,d1.GP组（DDP） 25mg/m2,d1-3;GEM 1000mg/m2,d1,d8,二组均28d/周期.连用3个周期后评价有效率、中位生存时间和毒副反应.结果：GEMOX组28例中,CR 1例,PR 12例,NC 10例,PD 5例,有效率（RR）为46.4％,疾病控制率（DCR）为82.1％;GP组26例中,RR 42.3％,DCR 76.9％ （P =0.761）;中位生存时间GEMOX组7.1个月,GP组6.5个月（P＞0.05）.GEMOX组主要毒性反应为骨髓抑制,消化道反应如食欲不振（P＜0.001）及恶性、呕吐较GP组轻（P =0.006）,未发现明显的肝肾毒性、周围神经毒性等.结论：OXA联合GEM治疗晚期NSCLC的疗效与DDP联合GEM相当,但不良反应较轻,耐受性好.     

紫杉醇联合卡培他滨调控MAPK/mTOR信号抑制食管癌的机制研究

目的探讨紫杉醇联合卡培他滨调控MAPK/mTOR信号抑制食管癌的机制研究。方法选取2017年1月—2018年1月本院收集的80例晚期食管癌患者给予紫杉醇联合卡培他滨治疗2疗程,评价化疗临床疗效。免疫组织化学法检测化疗前后患者食管癌组织内MAPK和mTOR表达。选取食管癌Ec-9706细胞给予紫杉醇联合卡培他滨培养24 h、48 h和72 h,细胞计数CCK-8法检测食管癌Ec-9706细胞的存活率;Capase-3活性试剂盒检测Capase-3活性;Western blot法检测患者食管癌组织内和食管癌Ec-9706细胞中磷酸化蛋白p-MAPK、p-AKT、mTOR、NF-kB、BCL-2和cleaved-Capase-3蛋白表达水平。结果食管癌患者应用紫杉醇联合卡培他滨给药化疗后疗效为65.00%(52/80)。免疫组化法结果显示食管癌患者化疗后MAPK含量显著上升,mTOR含量显著下降,差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot结果显示,食管癌患者应用紫杉醇联合卡培他滨给药化疗后,患者组织内p-MAPK、NF-kB和cleaved-Capase-3蛋白含量显著增加,p-AKT、mTOR和BCL-2蛋白含量显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。给予紫杉醇联合卡培他滨治疗后,食管癌细胞株的细胞存活率随时间的延长明显降低,Caspase-3活性随时间的延长显著升高,食管癌EC9706细胞p-MAPK、NF-kB和cleaved-Capase-3蛋白含量随时间的延长呈显著增加,p-AKT、mTOR和BCL-2蛋白含量随时间的延长呈显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论紫杉醇联合卡培他滨可能通过上调MAPK/mTOR信号抑制食管癌的发生与发展。     

c-Met对三阴性乳腺癌细胞增殖及阿霉素耐药性的影响

目的:研究c-Met对三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231活力及对阿霉素耐药性的影响。方法:构建阿霉素耐药的MDA-MB-231/ADR细胞系,实时荧光定量PCR及Western blotting技术检测不同细胞系中c-Met mRNA及蛋白的表达。脂质体转染c-Met-siRNA及表达质粒或AKT-siRNA,Western blotting检测转染效率;四甲基偶氮唑法(MTT法)检测细胞的活力及对阿霉素的敏感性。结果:对阿霉素耐药的MDA-MB-231/ADR细胞中cMet的mRNA及蛋白表达均显著高于对照的MDA-MB-231细胞,转染高表达c-Met的质粒可增加MDA-MB-231细胞的活力并降低其对阿霉素的敏感性,而利用siRNA抑制耐药细胞株中c-Met的表达后,可以逆转MDA-MB-231/ADR细胞对阿霉素的耐药。此外,c-Met可以磷酸化激活细胞中的AKT,并通过该信号分子增加MDA-MB-231细胞活力并诱导耐药。结论:c-Met可作为一个重要的靶点应用于三阴性乳腺癌的治疗。     

Let －7c 通过阻断雌激素激活的 Wnt 信号通路活性而抑制乳腺癌干细胞的自我更新能力

目的：探究 Let －7c 是否能通过 Wnt 信号通路调控乳腺癌干细胞自我更新能力。方法：分析乳腺癌临床样本中 Let －7家族成员的表达情况,检测 Let －7与 ERα的相关性,进一步探讨 Let －7c 与 Wnt 通路活性分子表达的相关性;在细胞试验中,通过 ALDH 流式细胞仪分选法及微成球实验分选乳腺癌干细胞;采用免疫印迹、荧光素酶报告试验及免疫荧光实验,验证 Let －7c 与 ERα－3＇UTR 是否能直接结合。结果：Let －7家族成员在乳腺癌组织中高表达,并且 Let －7b 和 Let －7c 的表达与患者临床预后显著相关;Let －7c 表达与ERα表达呈负相关,Let －7c 表达与 Wnt 信号通路活性分子呈负相关;Let －7c 能够抑制雌激素受体阳性乳腺癌干细胞自我更新能力;Let －7c 能够直接结合到 ERα－3＇UTR 上,进而抑制 ERα的表达和雌激素激活的Wnt 信号通路。结论：我们的研究首次证实了 Let －7c 通过抑制雌激素激活的 Wnt 通路活性,而对肿瘤干细胞的自我更新能力产生抑制作用。     

p53抑制干细胞的自我更新能力而增敏奥沙利铂诱导肺癌细胞凋亡的作用及机制

目的:研究p53通过增加肿瘤干细胞不等向分裂的比例而增敏奥沙利铂(Oxaliplatin,L-OHP)诱导肺癌细胞凋亡的作用及机制,探索影响肺癌化疗效果的因素.方法:用Nutlin-3(N-3)调控肺癌细胞野生型p53的表达,研究p53对L-OHP诱导细胞凋亡及对肺癌干细胞不同分裂模式的影响;使用Akt激活剂及shRNA-GSK3β调控表达的肺癌细胞系,研究p53通过Akt调控奥沙利铂诱导的肺癌细胞凋亡,并抑制肺癌干细胞自我更新能力.在肺癌标本中检测GSK3β与磷酸化Akt1的表达及与预后的关系.结果:Nutlin-3上调了A549及H460细胞中野生型p53的表达,有效抑制了细胞增殖,增强L-OHP诱导细胞凋亡效果.Nutlin-3抑制磷酸化Akt1,促进肺癌干细胞不等向分裂,进而抑制肿瘤干细胞的比例,增敏L-OHP诱导肺癌细胞凋亡.Akt1磷酸化活性在p53介导的下游GSK3β表达增加的调控中起关键作用.50nmol/L的L-OHP通过抑制Akt1活性促进凋亡,10μmol/L的Nutlin-3对L-OHP诱导的肺癌细胞凋亡有协同作用,是通过共同调控Akt1/GSK3β通路的活性实现,Akt1的激活与GSK3β的抑制均显著地抵消了p53对L-OHP诱导的肺癌干细胞比例降低.结论:p53通过抑制磷酸化Akt1的水平调控GSK3β表达,促肺癌干细胞不均等分裂,增敏L-OHP诱导凋亡.肺癌中GSK3β的高表达与磷酸化Akt1的低表达预示较好的临床治疗效果.