孕酮预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制

目的 探讨孕酮预处理对局灶性脑缺血再灌注损伤(focal cerebral ischemic and reperfusion injury,fCIRI)的作用及机制.方法 在建立大鼠fCIRI模型前96、48、1h分别给予孕酮(8mg/kg)1次性腹腔注射.建立大鼠fCIRI模型,在fCIRI后第3～8天,检查大鼠的空间记忆功能和缺血侧海马CA1区存活神经元数量.检测孕酮预处理后1～96 h的海马细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)磷酸化水平和活化ERK1/2核转移.结果 造模前48、1h经孕酮预处理的大鼠海马CA1区神经元存活数量(mm-1)较造模后明显增多(164.3±11.0、218.5±9.1与142.7±12.1,F=29.45,P＜0.01);造模前48、1h经孕酮预处理的大鼠能明显缩短脑缺血导致的水迷宫逃避潜伏期(s)延长(32.4±14.3、10.3±11.1与19.2±9.6;F=35.84,P＜0.01).海马CA1区ERK1/2磷酸化水平在孕酮给药后的12 ～48 h明显增强,96 h恢复基线.核内ERK1/2磷酸化水平在孕酮给药后2h增加,并持续到48 h.孕酮增加胞质ERK1/2及胞核内ERK1/2磷酸化的水平能被RU486阻断.结论 孕酮预处理对缺血引起的海马CA1区神经元死亡有保护作用,并能改善空间记忆功能;孕酮预处理的神经保护作用有48 h以上的有效时间窗;在孕酮的神经保护作用依赖于孕酮受体介导的ERK1/2信号通路.     

脉络宁对大鼠脑缺血-再灌注损伤及血管内皮生长因子的影响

目的探讨脉络宁注射液对大鼠脑缺血一再灌注损伤的治疗作用以及可能的机制。方法将54只sD大鼠按随机数字表法分为假手术组、缺血一再灌注组（IR组）及治疗组,每组各9只。造模后6h进行神经功能缺损评分。治疗组分别在不同时间点（6、24、48h和7d）经尾静脉注射脉络宁注射液（40g·kg-1·d-1）,连用7d。注射体积为1．5m1。假手术组及IR组在相应时间点给予等体积的等渗盐水。疗程结束后（第14天）进行神经功能缺损评分、取材。电镜观测海马CA1区细胞形态,免疫组化检测血管内皮生长因子阳性细胞。结果①第14天疗程结束后,治疗组6、24、48h和7d亚组大鼠神经功能缺损评分分别为3．2±0．8、3．3．±0．5、3．5±0．8、4．5±0．8,均低于IR组评分5．5±1．1;而治疗组48h及48h以内给药亚组大鼠的神经功能缺损评分低于7d亚组。差异均有统计学意义（P〈0．05）。②治疗组（6、24、48h和7d亚组）大鼠海马超微结构较IR组明显改善,其中6h亚组恢复最好。③治疗组（6、24、48h和7d亚组）大鼠脑组织血管内皮生长因子（VEGF）阳性细胞率分别为（19．4±1．3）％、（17．6±1．3）％、（17．2±1．5）％和（12．6±1．6）％,均高于IR组的（6．1±1．3）％,差异有统计学意义（P〈0．01）。尤以6h亚组VEGF的表达水平最高,为（19．4±1．3）％。结论脉络宁注射液对大鼠脑缺血-再灌注损伤早期具有较好的治疗作用,48h以内给药效果更好,可能通过增加血管内皮生长因子的表达而发挥作用。     

蛋白激酶B(Akt)在沙土鼠海马缺血耐受中的表达

目的：探讨沙土鼠海马缺血耐受与CAl区蛋白激酶B(Akt)表达及锥体神经元凋亡之间的关系。方法：沙土鼠16只随机分为A(2min缺血组)、B(5min缺血组)、C：(2min缺血 5min缺血组)、D(假手术组)4组，每组4只。免疫组化(SP法)检测海马CAl区Akt表达，末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)法检测锥体细胞凋亡。结果：A、C两组表达的Akt阳性细胞数明显多于B组，D组无明显从Akt表达;B组锥体细胞凋亡较A、C两组显著，D组未见明显凋亡细胞。结论：Akt可能通过抑制锥体细胞的凋亡参与介导沙土鼠海马缺血耐受。     

囊泡单胺类转运体功能抑制对PC12细胞的毒性及抗氧化剂的干预

目的：研究囊泡单胺类转运体(VMAT)功能抑制对大鼠嗜铬瘤(PC12)细胞产生的内源性毒性及抗氧化剂的保护作用。方法：用流式细胞仪观察VMAT功能抑制以及不同干预方法对PC12细胞存活的影响和细胞死亡方式。结果：单独加入VMAT抑制剂利血平对PC12细胞无毒性作用；利血平协同多巴胺明显增加多巴胺的毒性，使同样浓度的多巴胺诱发PC12细胞的凋亡率明显增加。加入还原型谷胱甘肽(GSH)、二硫苏糖醇(DTF)和脉冲1号使PC12细胞的生存率明显提高。结论：VMAT功能抑制触发了多巴胺内源性毒性可诱发细胞凋亡，具有抗氧化作用的制剂有细胞保护作用。     

阿托伐他汀对大鼠局灶性脑缺血后胡须体觉皮层功能的影响及其机制

目的:探讨不同剂量的阿托伐他汀对大鼠局灶性脑缺血后胡须体觉皮层功能的影响及其机制?方法:30只大鼠训练达标后依随机数字表法分为假手术组?对照组(0.1 ml/kg生理盐水)?低剂量组(1.0 mg/kg)?中剂量组(3.0 mg/kg)?高剂量组(6.0 mg/kg)?对照组及各剂量组采用显微镜下结扎大脑中动脉数根分支构建局灶性胡须体觉皮层缺血模型并分别于造模后24 h开始灌胃,每天1次,连续7天?造模后每天进行胡须依赖实验检测直至达到标准并于术后14天,应用超声多普勒检测缺血区周围的血流量;应用免疫组化检测缺血区周围CD34及VEGF的表达情况?结果:与对照组相比,低?中?高剂量组均增强了胡须依赖辨别能力(P < 0.01,P < 0.01,P < 0.05);同时提高了缺血区周围的血流量(P < 0.01,P < 0.01,P < 0.05);增加了缺血区周围CD34?VEGF阳性细胞数(P < 0.01,P < 0.01,P < 0.05)?而且中剂量组与低剂量?高剂量组相比,差异有统计学意义(P < 0.05,P < 0.01)?结论:阿托伐他汀有助于缺血后胡须依赖辨别能力的改善,其机制可能通过促进VEGF的表达及增加局部的微血管密度从而提高局部血流,且以中剂量效果较好?     

巴曲酶用药次数对脑缺血再灌注沙土鼠脑保护作用的影响

目的 研究巴曲酶用药次数对脑缺血再灌注(IR)沙土鼠脑保护作用的影响.方法 沙土鼠45只,随机分为IR模型组、正常组、巴曲酶3次用药组(3次组)、5次用药组(5次组)和7次用药组(7次组).采用双侧颈总动脉夹闭5 min后再通建立沙土鼠脑IR损伤模型.3次组、5次组、7次组均在造模成功后腹腔注射巴曲酶(8 BU/kg),隔日1次,分别给药3次、5次、7次;IR模型组和正常组腹腔注射等量的生理盐水,共7次.用流式细胞仪检测各组沙土鼠海马区凋亡细胞数,电镜观察海马CA1区细胞形态.结果 巴曲酶3次组、5次组和7次组海马区凋亡细胞数显著少于IR组(均P＜0.05);5次组海马区凋亡细胞数明显少于3次组(P＜0.05),而5次组与7次组之间差异无统计学意义(P＞0.05);正常组仅有极少凋亡细胞.5次组细胞超微结构改变要轻于3次组,与7次组相比无明显差异.结论 巴曲酶3次、5次和7次用药均可减少脑IR后神经元的凋亡;但5次和7次用药的脑保护作用明显好于3次用药.     

胡须刺激对大鼠桶状皮质局灶性脑缺血的神经保护作用

目的:研究胡须刺激对大鼠桶状皮质局灶性脑缺血的神经保护作用及可能机制。方法 :18只雄性SD大鼠先行胡须依赖实验,训练达标后随机分为假手术组、模型组和胡须刺激组。在显微镜下结扎右侧大脑中动脉2~3根分支构建大鼠胡须桶状皮质局灶性脑缺血模型,胡须刺激组于缺血3 d后开始刺激大鼠左侧胡须。造模成功后3组大鼠再次行胡须依赖实验直至再次达标,记录各组所需实验次数,并于术后14 d应用超声多普勒检测缺血区周围的血流量,HE染色观察缺血脑组织形态结构变化,免疫组化检测缺血区周围CD34的表达情况并测量微血管密度。结果:与模型组相比,胡须刺激组能显著减少胡须依赖实验再次达标所需次数(P<0.01),提高缺血区血流量(P<0.01),改善病理组织学,提高缺血区周围CD34阳性细胞的表达,微血管密度增多(P<0.01)。结论:胡须刺激对大鼠桶状皮质局灶性脑缺血有保护作用,其机制之一可能与诱导CD34的表达上调,改善脑缺血区的血流灌注有关。     

脑脊液中β-淀粉样蛋白检测与阿尔茨海默病的早期诊断

目的：检测β—淀粉样蛋白(β—amyloid protein，Aβ)两种主要成分Aβl-40和Aβ1—42在阿尔茨海默病(Alzheier's Disease，AD)脑脊液中的变化，并探讨其对AD的诊断价值。方法：采用敏感的双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)，检测54例AD患脑脊液中Aβ的浓度，并与30例正常对照(normal controls，NC)脑脊液中的相应成分进行对比。结果：①AD患脑脊液中Aβ1—42浓度低于正常对照组，而Aβl-40／Aβl—42比值高于对照组；②以脑脊液中Aβ比值及Aβl—42浓度检测诊断AD的敏感性分别为54．51％、90．00％，特异性为84．25％、84．38％。结论：临床上同时检测脑脊液中Aβl—42浓度及Aβ比值可作为早期诊断AD的辅助指标，具有一定的临床应用价值。     

三七总皂甙对脑出血大鼠血肿周围核转录因子κB表达的影响

目的研究三七总皂甙对大鼠脑出血后核转录因子”B（NF-κB）表达的影响。方法将SD大鼠随机分为正常组、假手术组、脑出血模型组、三七总皂甙治疗组，采用VⅡ型胶原酶注入大鼠右侧苍白球制备脑出血模型，每组分别在术后6、24、48、96 h 4个时点收取脑组织标本，免疫组化检测NF-κBp65蛋白表达，同时测量脑组织含水量。结果正常组和假手术组比较，大鼠脑出血后脑组织NF-κBp65表达以及脑组织含水量显著增高（P〈0．01）；与脑出血模型组比较，三七总皂甙治疗组NF-κBp65水平（P〈0．01）及脑组织含水量（6hP〈0．05，24、48、96hP〈0．01）均显著降低。结论三七总皂甙可以抑制脑出血后NF-κB表达，这可能是三七总皂甙减轻脑出血后脑水肿的机制之一。     

老年期痴呆患者脑脊液tau蛋白的检测及临床研究

探讨脑脊液ｔａｕ蛋白浓度对老年期痴呆（ＳＤ）,主要包括Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ病（ＡＤ）和血管性痴呆（ＶＤ）的诊断价值。方法用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）检测ＡＤ１４例、ＶＤ１２例和年龄匹配的对照组（ＮＣ）３０例脑脊注ｔａｕ蛋白浓度;用简易痴呆量表（ＭＭＳＥ）、Ｈａｃｈｉｓｋｉ缺血指数量表（ＨＩＳ）、日常生活能力表（ＡＤＬ）、汉米尔顿抑郁量表（ＨＡＭＤ）和Ｇｌａｓｇｏｗ量昏迷量表（ＧＣＳ）