动物模型椎间盘退变全程基因变化的对比

目的：新西兰大白兔的纤维环损伤制作腰椎间盘退变模型，用以证实和比较在人椎间盘退变中明显变化的基因变化情况。方法：2．0只新西兰大白兔L4，5及L5,6纤维环损伤作为实验组，4只作对照组未行损伤。2、4、8、40周分别行核磁共振及计算机扫描摄影拍片证实椎间盘退变情况同时取椎间盘行精确定量逆转录聚合酶链式反应检测金属蛋白酶(matrix metalloproteinase)MMP-1、MMP-2、MMP-3及它们的特意性抑制剂(tissue inhibitors of metalloproteinases)Timp-1、Timp-2的变化。结果：核磁共振及计算机扫描摄影证实了腰椎纤维环损伤后腰椎逐渐退变并与人类退变结果相似，基因表达情况MMP-1、MMP-2、MMP-3、Timp-1、Timp-2早期均上调，MMP-3、Timp-1在退变的晚期出现下调。结论：纤维环损伤可以成功制作出椎间盘退变的模型。在人类腰椎间盘退变中明显上调的基因在此退变模型椎间盘中被发现同样上调，从而在分子水平证实了动物退变模型与人类的相似性。     

自动生化分析仪速率法测定血清D-3羟丁酸的初步研究

采用酶速率法在日立7170A自动生化分析仪上测定血清D-3羟丁酸。结果表明,此法线性范围宽(0～4.0mmol/L),精密度好(批内CV值2.2%,批间CV值2.6%),回收率高(98%)。样本在4℃冰箱放置7d稳定。用此法测定了60例正常人、30例糖尿病人和8例酮症患者D-3羟丁酸含量,结果显示糖尿病酮症酸中毒的病人血清D-3羟丁酸明显升高,本法可作为糖尿病酮症酸中毒特异和快速的诊断试验,并对D-3羟丁酸在糖尿病酮症酸中毒中的意义进行了初评。     

12周是使用卵巢切除法建立雌性C57/BL6J成年小鼠绝经后骨质疏松模型的合适时机

目的评估成年C57/BL6J雌性小鼠行卵巢切除术后不同时间点骨密度及松质骨的变化,探讨使用卵巢切除法建立雌性C57/BL6J成年小鼠绝经后骨质疏松模型的合适时机。方法将60只成年C57/BL6J雌性小鼠随机平均分为8周去势组及12周去势组;前者于8周,后者于12周行双侧卵巢切除术。两组均于手术当天,术后6周、8周、10周及12周各随机抽取6只小鼠进行检测。使用DEXA测量小鼠全身、脊柱及下肢骨密度,并使用micro-CT重建胫骨近端的三维图像及计算松质骨微结构参数。结果两组小鼠使用DEXA测量的组内各时间点的全身、脊柱及下肢骨密度相比均无统计学差异。micro-CT的结果显示:与8周相比,12周小鼠的胫骨近端松质骨骨量有显著的上升(Tb.N:+29.4%,Tb.Sp:-28.9%,均P0.05)。8周去势组的小鼠在术后8周首次观察到BV/TV(-46.1%,P0.05),Tb.N(-52.2%,P0.05)及Tb.Sp(+57.0%,P0.05)较术前的显著性改变,上述参数的变化在随后的时间点有所减缓。12周去势组小鼠则在去势6周后即可观察到上述参数的显著性变化(BV/TV:-26.6%,Tb.N:-37.1%,Tb.Sp:+59.6%,均P0.05),并在随后的随访时间中进入平台期。结论与DEXA相比,micro-CT更适合于评估小鼠模型的骨密度及骨微结构变化。本研究认为12周是使用卵巢切除法建立雌性C57/BL6J成年小鼠绝经后骨质疏松模型的合适时机。     

人工髓核防滑脱装置的设计及生物力学评价

背景:人工髓核置换治疗腰椎间盘病变能减轻或消除腰腿痛的临床症状、维持椎间盘高度、保留脊柱节段的稳定性和活动度,但因假体移位而再手术率较高。目的:设计人工髓核防滑脱装置(用阔筋膜包裹人工髓核)并进行生物力学评价。设计:自身对照,生物力学体外实验。材料:成年人新鲜尸体腰椎(L1～S1)标本3具;尸体大腿阔筋膜标本2片;人工髓核为自制,材料为聚甲基丙烯酸甲酯。方法:将3具腰椎标本制成6个运动节段的试验模型,L3～4及L4～5各3个,制成椎间盘髓核摘除后单纯人工髓核置入模型,施加前屈后伸、左右侧弯和左右轴向旋转6个方向6.0N·m的纯力偶矩疲劳实验。然后取出人工髓核,用备用的阔筋膜包裹缝合,制成椎间盘髓核摘除后用阔筋膜包裹人工髓核置入模型,进行相同的生物力学测试。主要观察指标:不同状态各个方向髓核假体移位的变化。结果:与单纯人工髓核置入相比较,阔筋膜包裹人工髓核置入在脊柱屈伸与旋转时髓核在水平方向上移位减小(P<005),在脊柱侧屈时髓核在水平方向上移位减小(P<001);而在脊柱屈伸、旋转或侧屈时人工髓核在冠状面和额状面上的成角移位均减小(P<001)。结论:阔筋膜包裹人工髓核置入在体外人体标本测试中能较好地减小或防止人工髓核假体移位。     

唑来膦酸钠在抑制钛颗粒诱导骨溶解中作用的体外实验研究

目的：研究唑来膦酸钠（ ZOL）对钛颗粒诱导的骨溶解的影响。方法分离6～8周C57BL/6J小鼠长骨中的前体破骨细胞（ OCP）并分为6组,A组：OCP＋细胞培养液,B组：OCP＋巨噬细胞集落刺激因子（M-CSF）＋NF-κB 受体活化因子配体（RANKL）＋细胞培养液,C组：OCP＋钛颗粒＋细胞培养液,D组：OCP＋上清液（钛颗粒刺激巨噬细胞24 h后上清液）＋细胞培养液,E组：OCP＋M-CSF＋RANKL＋ZOL＋细胞培养液,F组：OCP＋上清液＋ZOL＋细胞培养液。每组细胞分别接种在玻璃盖玻片、皮质骨磨片和含骨检测表面的96孔板上,10 d后检测玻璃盖玻片上细胞抗酒石酸磷酸酶（ TRAP）的表达及皮质骨磨片上骨吸收陷窝的形成,并以骨检测表面的骨吸收面积为指标比较各组破骨细胞的骨吸收活性。结果 B组、D组、E组和F组的OCP均能分化为能被TRAP染色成阳性的破骨细胞并形成骨吸收陷窝,其余组均未发现TRAP染色阳性的破骨细胞和骨陷窝。加入ZOL的F组骨吸收面积（5.54％±1.25％）较D组（10.34％±1.69％）明显减少,差异具有统计学意义（t＝5.61,P＜0.01）。结论在体外实验中钛颗粒并不能直接刺激前体破骨细胞向破骨细胞转化;唑来膦酸钠可以抑制钛颗粒诱导的骨溶解作用。     

输尿管插管在妇科复杂手术中的意义

目的 探讨输尿管逆行插管在复杂妇科手术中预防输尿管损伤的作用.方法 对我院行易造成输尿管损伤的复杂妇科手术患者,在手术当日麻醉后先行膀胱镜下输尿管插管,再实施妇科手术,术后拔除输尿管导管,留置导尿管.结果 40例均顺利完成手术,本次研究患者平均手术时间为（45±3.6）h,与常规手术时间（55±6.7）h相比,明显较短（P＜0.05）;本次研究患者未发生输尿管损伤,而常规患者输尿管损伤的发生率为15％,高于实施输尿管插管的患者（P＜0.05）.术后无肾功能损害及尿路感染等并发症.结论 在易伤及输尿管的复杂妇科手术中行输尿管插管作为术中辨认输尿管的标志,可有效预防输尿管损伤.     

类表皮生长因子域7在高体积分数氧致新生大鼠新型支气管肺发育不良中的表达及其意义

目的 观察类表皮生长因子域7(EGFL7)在高体积分数氧(高氧)致新生大鼠新型支气管肺发育不良(BPD)中的表达,探讨EGFL7在新型BPD发生发展中的可能作用.方法 足月新生 SD大鼠64只在出生12 h内,根据吸入氧浓度的不同随机分为实验组和对照组.实验组持续暴露于600 mL·L-1氧气中,对照组吸入空气.分别取2组大鼠生后4 d、7 d、10 d和14 d肺组织标本,HE染色观察其肺组织病理改变,免疫组织化学方法检测其血小板内皮细胞表面黏附分子-1(PECAM-1)的表达,以PECAM-1阳性染色的内皮细胞面积与肺实质细胞总面积的百分比代表肺微血管密度,采用实时荧光定量-PCR技术和Western blot法分别检测其EGFL7 mRNA和蛋白表达.结果 1.实验组600 mL·L-1氧气暴露14 d后,大鼠肺组织结构发生类似新型 BPD 的病理改变.2.PECAM-1蛋白主要表达于肺微血管内皮细胞的胞质中,实验组 PECAM-1蛋白和肺微血管密度均下降,与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05,0.01).3.实验组新生大鼠肺组织EGFL7 mRNA和蛋白表达在出生4 d、7 d、10 d、14 d均低于对照组(Pa<0.05,0.01).4.实验组EGFL7蛋白水平与肺微血管密度呈正相关(r=0.432,P<0.01).结论 EGFL7参与了新型BPD发生发展的整个过程,可能与肺微血管发育障碍有关.     

Toll样受体2和4在髋关节滑膜巨噬细胞中的表达

目的　探讨TLR2和TLR4在髋关节滑膜巨噬细胞中的表达。 方法　收集2007年至　2010年因髋关节疾病在我院行髋关节手术患者的髋关节滑膜标本共47例,其中股骨颈骨折24例（A组）,股骨头坏死18例（B组）,人工髋关节置换术后假体无菌性松动5例（C组）。采用免疫组化SP法检测TLR2和TLR4在3组的髋关节滑膜巨噬细胞中的表达,在高倍镜（×400）视野下对阳性的巨噬细胞的进行观察及计数,并作统计分析。 结果　各组用histoscore计算阳性巨噬细胞百分数得分,每高倍视野下A组中TLR2（0.27±0.33）,TLR4 （0.69±0.18）;B组中TLR2 （0.31±0.19）,TLR4 （0.71±0.31）;C组中　TLR2 （1.78±0.18）,TLR4 （2.00±0.39）。TLR2和TLR4在C组中表达较A组、B组高（P＜0.001）,而且3组中TLR4均较TLR2表达要高（P＜0.001）。 结论　TLR2及TLR4在人工关节无菌性松动患者的假体周围组织巨噬细胞中表达明显增多,可能参与了巨噬细胞介导的假体无菌性松动过程。     

人工腰椎间盘置换术治疗退变性腰椎间盘疾病

目的　探讨应用人工腰椎间盘置换术治疗退变性腰椎间盘疾病的效果。方法　对 4 6例 5 4个间隙诊断为腰椎间盘退变性疾病的患者采用改良型SBChariteⅢ型人工腰椎间盘假体行置换术。结果　所有病例获得随访 ,随访时间 18～ 5 2个月 (平均 32 5个月 )。临床评价优 35例 ,良 9例 ,可 1例 ,差 1例。术后腰椎节段平均有 5 0 °(2 0～ 8 6 °)前屈和 6 2 °(4 2～ 9 8°)后伸活动 ,椎间隙高度较术前平均增加 4 0 (1 0～ 8.0 )mm。术后 9个月出现滑动核轻度前脱位 1例 ,但无临床症状。结论　人工腰椎间盘置换术为治疗腰椎间盘退变性疾病提供了一个疗效好而并发症少的新方法。长期效果仍需进一步观察     

腰椎间盘炎的诊断和治疗探讨

目的　探讨腰椎间盘炎的诊断和治疗方法。方法　回顾性总结 17例腰椎间盘炎的诊治情况。 6例给予大剂量抗生素和激素 ,11例手术清除病灶。手术分前后入路两种 ,清除病灶后根据需要局部植骨 ,其中 3例加用内固定 ,以JOA疗效评价系统为标准评价其疗效。结果　随访时间 6个月至 3年 ,平均 1年 3个月。总体疗效 :优 14例 ,良 2例 ,一般 1例。其中非手术治疗组优 3例 ,良 2例 ,一般 1例 ,手术组均为优 ,所有植骨全部融合。结论　大剂量抗生素对部分腰椎间盘炎患者有效 ,但大部分病例需手术清除病灶 ,手术清除病灶可以加快其痊愈 ,且手术治疗效果优于非手术治疗。