PTEN、NF-κB基因在正常核型急性髓细胞白血病患者中的表达意义

目的探讨PTEN和NF-κB基因在正常核型急性髓细胞白血病(CN-AML)中的表达情况及其对预后的影响。方法应用逆转录聚合酶链式扩增反应(RT-PCR)技术检测40例初治CN-AML和10例对照(正常骨髓6例和非恶性血液病4例)骨髓单个核细胞中PTEN、NF-κB p65的表达,分析PTEN、NF-κB与患者年龄、性别、外周血白细胞数、骨髓原始细胞数及总生存时间(OS)的关系。结果对照组PTEN基因表达阳性率为90%,CN-AML组阳性率50%,明显低于对照组(P=0.031);PTEN基因表达与年龄、骨髓中原始细胞百分比有关,(P值分别为0.016、0.01),与性别、外周血白细胞计数、OS无关(P>0.05);对照组NF-κB P65基因表达均为阴性,CN-AML组阳性率为35%,差异有统计学意义(P=0.045),NF-κB p65基因阳性表达与较短OS有关(P=0.024),与性别、年龄、外周血白细胞计数及骨髓中原始细胞百分比均无关(P>0.05)。结论 CN-AML患者存在PTEN、NF-κB基因表达异常,NF-κB阳性者预后较差,是影响CN-AML患者预后的生物学指标之一。     

转染慢性粒细胞白血病总RNA对树突状细胞介导的抗白血病作用的体外研究

目的体外诱导和鉴定慢性粒细胞白血病-树突状细胞（CML—DC）,并探讨人慢性粒细胞白血病（CML）总RNA体外转染对其介导的特异性细胞毒T淋巴细胞（CTLl对慢性粒细胞白血病细胞杀伤作用的影响。方法分离14例CML患者骨髓单个核细胞．加入rhIL-4、rhGbl—CSF、rhTNF-α诱导培养CML—DC。分别于培养第1、3、6、14d用倒置显微镜进行形态学观察．流式细胞术检测免疫学表型,染色体G显带技术检测其染色体核型,逆转录聚合酶链反应（RT—PCRIl检测bcr—abl融合基因。并于CML-DC培养第5d,加人CML细胞总RNA脂质体转染,或裸总RNA转染,或不加任何试剂继续培养的DC,共三种CML—DC．分别致敏T淋巴细胞．另设以IL-2培养的T淋巴细胞为对照组,比较不同组别的致敏T淋巴细胞的杀伤活性。结果CML骨髓单个核细胞诱导前CDlct、CD83表达均在5％以下。而诱导成熟的CML—DC细胞CDla、CD83阳性表达率分别为20．13~3．43％、26．76＋2．79％,较诱导前均明显增高（P〈0．01）。CML-DC细胞均存在Phl染色体,并表达bcr-abl融合基因。总RNA脂质体转染CML—DC、裸总RNA转染CML—DC、单纯CML—DC分别致敏的T淋巴细胞在效：靶比为20：1时对CML单个核细胞的杀伤效率分别为75．33±3．11％、37．23±2．92％、29．62±1．61％,均明显高于对照组f9．87＋3．43％,P〈0．01）。总RNA脂质体转染的CML—DC所诱导的CTL杀伤活性最强．与后三组杀伤活性均有显著性差异（P〈0．001）。结论CML—DC既具有CML白血病源性．又具有DC细胞的特性,并能诱导特异性CTL杀伤白血病细胞。经脂质体转染CML细胞总RNA可以提高CML-DC介导的CTL特异性杀伤慢性粒细胞白血病细胞。     

人骨髓间充质干细胞向胆碱能神经元定向分化的实验研究

目的探讨人骨髓间充质干细胞(BMMSCs)体外定向分化为神经元的潜能。方法体外分离和扩增人BMMSCs。利用扩增后的第2代BMMSCs分为诱导组和对照组。诱导组的细胞经预处理和预诱导后在含全反式维甲酸(ATRA)和音速波状蛋白(Shh)的完全培养基中诱导5 h,对照组不加任何诱导剂。诱导后观察细胞形态变化,采用免疫细胞化学染色法检测神经元样细胞特异标志。结果诱导组BMMSCs经诱导后均能分化为具有典型神经元形态的细胞,并表达神经元特异性烯醇化酶[NSE,(61.00±3.63)%]、胶质纤维酸性蛋白[GFAP,(14.42±2.74)%],且有相当部分神经元样细胞表达胆碱乙酰转移酶[ChAT,(9.92±1.29)%];对照组BMMSCs细胞形态无明显变化,上述特异性标志物表达也均为阴性。结论BMMSCs可跨胚层分化为神经元样细胞和胆碱能神经元样细胞。     

遗传性Sebastian综合征1例家系调查并文献复习

遗传性Sebastian综合征（hereditary Sebastian syndrome．SBS）是一种遗传性出血性疾病，临床较为少见，易误诊为特发性血小板减少性紫癜（ITP）。为了便于临床医师更好地认识该病，我们报道1例SBS患者以及对其家系调查．并复习相关文献如下。     

复方中药抑制免疫反应的研究

目的研究复方中药制剂的免疫抑制作用。方法用卵白蛋白和弗氏完全佐剂(OVA+FCA)免疫小鼠制作免疫反应鼠,观察雷公藤组、复方中药组和对照组用药前、用药后小鼠血清IgG水平的变化及脾脏质量和脾脏系数。结果与对照组相比,雷公藤组和复方中药组均能使脾脏质量和脾脏指数I、gG水平下降,但雷公藤组无显著性差异,而复方中药组有显著性差异(P<0.05)。复方中药组与雷公藤组比较也有显著性差异(P<0.05)。结论复方中药能明显抑制小鼠免疫反应,并比单用雷公藤更有效。     

骨髓增生异常综合征患者骨髓血管新生初步研究

目的　探讨骨髓增生异常综合征 ( MDS)患者骨髓是否存在血管新生 ,及其与患者临床特征的关系。方法　采用免疫组化法 (兔抗人凝血因子 相关抗原多克隆抗体 )标记了 38例 MDS、15例急性非淋巴细胞白血病( ANL L)和 15例正常人骨髓组织内血管内皮细胞。在光学显微镜下计数骨髓切片全片中微血管数 ,计算平均值 ,表达为微血管数 /× 4 0 0视野 ,并与患者临床特征进行相关性分析。结果　 MDS组骨髓微血管数 ( 17± 2支 /× 4 0 0视野 )高于正常人对照组 ( 7± 2支 /× 4 0 0视野 ) ( P<0 .0 0 1) ,但低于 ANL L 组 ( 2 4± 4支 /× 4 0 0视野 ) ( P<0 .0 0 1) ,其中 MDS低危组与高危组骨髓微血管密度差异无显著性 ( P>0 .0 5 )。 MDS患者骨髓微血管数与骨髓原始细胞百分数、外周血白细胞、血红蛋白及血小板等差异无显著性 ( P>0 .0 5 )。结论　 MDS患者骨髓存在明显的血管新生 ,为临床应用抗血管新生方法治疗 MDS提供了实验依据。     

骨髓增生异常综合征患者循环microRNA-144的检测及其临床意义

目的探讨mi RNA-144在骨髓增生异常综合征(MDS)患者外周血中的表达情况及其临床意义。方法收集MDS患者24例,健康对照12例,q RT-PCR检测外周血mi RNA-144相对表达量,统计分析mi RNA-144在MDS中的表达情况及与其预后相关性。结果 mi RNA-144在MDS亚型难治性血细胞减少伴单系病态造血(RCUD)、难治性血细胞减少伴多系病态造血(RCMD)、难治性贫血伴环形铁粒幼细胞(RARS)、难治性贫血伴原始细胞增多-1(RAEB-1)及难治性贫血伴原始细胞增多-2(RAEB-2)中的相对表达量分别为3.81、3.64、4.56、6.49及8.73,均显著高于健康对照组,P<0.01;mi RNA-144在预后好和预后差组中的相对表达量分别为3.81和7.18,差异具有统计学意义,P<0.01。结论 mi RNA-144在MDS中高表达,且可作为潜在的预后评估指标。     

DJ-1基因在急性髓系白血病中的表达及其临床意义

目的 探讨DJ-1基因在非急性早幼粒细胞白血病(APL)的急性髓系白血病(AML)患者骨髓单个核细胞中的表达、临床特征和其对预后的影响.方法 收集135例患者骨髓标本,采用实时荧光定量PCR检测DJ-1表达水平,分析其与临床特征及预后的相关性.结果 在mRNA水平上,初治组与复发难治组的DJ-1表达水平明显高于正常对照组及缓解组(P<0.01);初治组与复发难治组的DJ-1表达水平无明显差异(P>0.05);缓解组DJ-1表达水平与对照组差异不明显(P>0.05);初治组中DJ-1的水平与白细胞计数高低有关(P<0.01),而与患者的年龄、性别、贫血程度、血小板计数高低、幼稚细胞高低、FAB分型、WHO分型无统计学差异(P>0.05).结论 DJ-1基因在初治及复发难治非APL的AML患者中存在高表达,缓解组表达下降,且初诊患者中DJ-1的表达与患者白细胞高低有相关性.