As2O3处理前后K562细胞基因表达变化的基因芯片检测

目的应用基因芯片研究三氧化二砷(As2O3)处理前后K562细胞基因表达的变化.方法提取As2O3处理前后K562细胞的总RNA,纯化为mRNA后再反转录为cDNA.cDNA经限制性内切酶Sau3AI切割后,cDNA片段分别用Cy3和Cy5标记,与自制的包含348个基因片段的胎盘库芯片杂交.结果杂交结果经扫描和软件分析,发现了11个差异表达的基因片段,其中有3个基因片段与细胞凋亡密切相关.结论我们构建的胎盘库基因芯片可以成功地用于研究药物作用前后基因表达的变化.     

地塞米松对布比卡因诱导小鼠神经元毒性的影响

Objective To investigate the effect of dexamethasone on the toxicity of bupivacaine in murine neurons.Methods Murine neuroblastoma cell line N2a was obtained from ATCC cell bank (USA). The cells were cultured in 10% fetal cow serum/MEM culture medium and divided into 4 groups voup I control (Con); group II bupivacaine ( Bup); group Ⅲ dexamethasone (Dex) and group IV Dex + Bup. The culture medium contained bupivacaine 900 μmol/L in group Bup and dexamethasone 1 μmol/L in group Dex respectively. In group Dex + Bup ( IV ) Bup was added to the culture medium with a final concentration of 900 μmol/L at 12 h after pretreatment with Dex 1 μmol/L. The cells were inoculated in 24 well plates (0.5 ml in each well, 24 wells in each group) and 10 cm culture dishes (7 ml in each dish, 4 dishes in each group). The release rate of LDH was calculated and the morphology of the cells and nucleus condensation (by Hoechst 3334224 fluorescent staining) was detected at 9 h of incubation in 24 well plates. The mitochondrial transmembrane potential (by JC-1 assay) and phosphorylation of Akt and ERKs (by Western blot) were measured at 5 h of incubation in 24 well plates and in culture dishes respectively. ResultsBupivacaine caused severe damage to the N2a cells as evidenced by increase in LDH release and nucleus condensation (apoptosis), dephosphorylation of Akt and ERKs, decrease in mitochondrial transmembrane potential and severe morphological changes. Dexamethasone pretreatment significantly attenuated bupivacaine-induced neurotoxicity. Conclusion Dexamethasone can protect N2a cells from bupivacaine-induced neurotoxicity through stabilization of mitochondrial transmembrane potential and inhibition of dephosphorylation of Akt and ERKs.     

IN VITRO ANALYSIS OF τ PHOSPHORYLATION SITES AND ITS BIOLOGICAL ACTIVITY

INTRODUCTIONThemicrotubule－associatedprotein蚲ishyperphos－phorylatedandglycosylatedinAlzheimerdisease（AD），andtheseabnormalmodificationsformedthebasisofprogressivelyretrogradeneurofibrillarydegenerationseeninADbrainandtherebythedementia（１，２）．ADab－normallyphosphorylated蚲notonlyismicrotubuleas－semblyincompetent，butalsoinhibitsassemblyanddis－assemblesthepreassembledmicrotubulesinvitro（３）．Inthetangle－bearingneuronsinADbrain，thenormalcytoskeletonisdisruptedandreplacedwi…     

Agilent 2100 Bioanalyzer在基因差异表达研究中的应用

目的观察Agilent 2100 Bioanalyzer 芯片分析系统(以下简称Bioanalyzer)在基因差异表达研究中的应用。方法应用限制性显示技术分别从正常和热休克处理后的酿酒酵母细胞中分离出cDNA片段,然后再用Bioanalyzer和传统的琼脂糖凝胶电泳技术对RD-PCR产物进行检测分析。结果Bioanalyzer能更快速、敏感地分离和显示差异表达的基因片段,并且通过对差异片段进行定量比较,发现了数个表达有明显差异的基因片段。结论Bioanalyzer在基因差异表达研究中具有重要的应用价值。     

HBsAg母婴传播的研究

对HBsAg(+)母亲所生婴幼儿,连续两年的动态观察,发现这些婴幼儿的感染绝大多数皆在出生3个月后,其感染频率与母亲HBsAg的滴度成正相关,表明母婴传播阻断应以HBsAg(+)母亲所生之子女为重点对象。     

人血清胰岛素抗体、猪胰岛素原抗体和胰多肽抗体的放射免疫检测法

作者用自制的[~(125)I]标记激素,参考国外经验,建立了人血清胰岛素抗体、猪胰岛素原抗体和胰多肽抗体等三种放射免疫检测法,并对方法的主要实验条件进行了优选,对方法的质量控制参数作了验证。结果发现:在使用国产胰岛素的糖尿病人血清中,三种抗体的检出率分别为90.8％、48.3％和36.5％;抗体特异性结合值分别为21.2±17.4％、41.8±27.4％和25.6±28.4;而正常人和糖尿病人未用胰岛素者全部为阴性,显示国产胰岛素具有明显的免疫原性。     

镰旁大型脑膜瘤外科治疗的探讨

目的：探讨影响镰旁大型脑膜瘤手术治疗的相关问题。方法：回顾性分析1994年8月至2001年8月经治的12例镰旁大型脑膜瘤的临床资料及手术经过。结果：12例肿瘤均全切除，无手术死亡。随访预后良好，无肿瘤复发。结论：镰旁大型脑膜瘤的手术应充分利用影像学资料及病人出现的阳性体征进行分析，选择合适的手术径路全部切除肿瘤，同时注重脑功能区及重要血管的保护、瘤基底部大脑镰的切除及周边组织的电灼处理。     

同种原位肝移植围手术期的处理

目的 总结我院自1999年8月以来,开展的3例同种异体原位肝移植（Orthotopic livertransplantation,OLT）围手术期的处理过程及经验体会。方法　2例原位肝移植、1例肝-肾联合移植术。均在术前12h口服环孢霉素A（CsA）和骁悉（MAP）,术中用甲基强的松龙（MP）1000 mg静脉冲击防止排斥,术后MP+CsA+MAP三联用药。结果 ①文中3例病人手术均获成功,其中2例原位肝移植病人存活至今,生活质量良好。肝肾联合移植病人于术后第76d死于严重混合感染。②移植肝的功能维护是肝移植术后处理的重点,其中包括急性排斥反应的诊断和处理,以及其它可能引起肝移植肝功能损害、衰竭等问题的处理。③全身非移植器官的功能恢复:包括呼吸系统、感染、出血、胸水、腹水等并发症的处理过程。结论 肝移植围手术期的处理是肝移植成功与否的关键,其中包括肝移植的排斥反应及各系统的功能支持与维护。     

影响利培酮治疗精神分裂症疗效因素分析

目的　探讨影响利培酮对精神分裂症疗效的关键因素。方法　对 57例单用利培酮治疗的精神分裂症患者 ,采用一系列标准评定工具对 39个临床指标进行定量或半定量评估。并作Logistic回归分析。将治疗后简明精神病评定量表 (BPRS)减分率≥ 30 %者确定为“有效”。结果　单因素分析显示 :服药依从性 ,MMPI中Sc、Si、D因子 ,治疗前BPRS 2和BPRS 4因子 ,TESS 3因子 ,家族史 ,起病形式 ,意识模糊 ,住院时间与利培酮疗效有关 ;经多因素分析有服药依从性 ,MMPI(Sc) ,BPRS 2 ,家族史 ,意识模糊等 5个指标选入回归方程。结论　影响利培酮对精神分裂症疗效的关键因素依次为服药依从性 ,MMPI中精神分裂因子 ,阴性症状 ,家族史及意识模糊