盾叶薯蓣WRKY转录因子的鉴定和生物信息学分析

目的鉴定盾叶薯蓣WRKY(DzWRKY)转录因子家族基因,分析DzWRKY蛋白的序列特征,检测DzWRKY在根和叶中的表达量。方法以拟南芥WRKY基因的c DNA为查询序列,应用BLASTn进行比对,应用生物信息学方法进行全长开放阅读框(ORF)预测和蛋白序列特征分析,根据转录组数据检测DzWRKY的表达量。结果共检测到27个具有全长ORF的DzWRKY家族基因,其中6个基因编码的蛋白具有2个WRKY结构域。DzWRKY蛋白均为亲水性蛋白,亚细胞预测为核蛋白,WRKY结构域序列保守程度高。进化分析均把27个DzWRKY蛋白和19个At WRKY蛋白分为3个大类群。27个DzWRKY在叶片中的表达量均比根茎低,高表达的DzWRKY基因主要集中在第I类和第IId亚类。盾叶薯蓣WRKY与已知功能的WRKY序列相似性较低。结论首次从盾叶薯蓣中鉴定出DzWRKY基因,为进一步阐明DzWRKY在盾叶薯蓣生长发育和药效成分代谢中的作用奠定基础。     

五味子超临界萃取物对Aβ25-35诱导的PC12细胞损伤后生存状态和活力的保护作用

目的:研究五味子超临界萃取物对β淀粉样蛋白(Aβ25-35)所致的PC12细胞损伤后生存状态和活力的保护作用。方法:体外培养PC12细胞,建立Aβ引起的细胞损伤的AD细胞模型,采用MTT法和LDH法检测细胞生存活力。结果:五味子超临界萃取物能降低LDH含量,升高细胞线粒体脱氢酶的活性,增加活细胞数。结论:五味子超临界萃取物能减轻Aβ25-35损伤后的PC12细胞的受损程度,保护细胞膜,提高细胞生存活力。     

基于文本挖掘分析甲型H1N1流感的中医药治疗特色

从中国生物医学文献数据库(CBM)中检索治疗甲型H1N1流感的文献数据,针对半格式化的原始数据,进行格式化转换,存储于大型关系型数据库;针对格式化的数据,采用基于敏感关键词频数统计的离散导数算法,对文献数据进行挖掘处理;针对文本挖掘的结果,结合原文献人工回溯可疑结果,得到以下结论:(1)在治疗甲型H1N1流感的过程中,中药以清热解毒为主;(2)中成药以连花清瘟胶囊、痰热清注射液、清开灵制剂、双黄连制剂为主;(3)以药测证,可推断甲型H1N1流感的发病特点是毒、火(热)、湿(痰);(4)中成药的使用以西医医生为主,但存在辩证使用问题;(5)针对文本挖掘的可疑结果,回溯原文献是一种不可替代的方法。     

参芎化瘀胶囊预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤后一氧化氮合酶亚型表达的影响

目的：观察参芎化瘀胶囊预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤后一氧化氮合酶（NOS）亚型内皮型（eNOS）、神经元型（nNOS）及诱导型（iNOS）表达的影响,探讨参芎化瘀胶囊对大鼠急性脑缺血再灌注损伤保护作用的机制。方法: 实验大鼠随机分为：假手术组,缺血再灌注组,参芎化瘀胶囊高、中、低剂量预处理 组（480、240、120 mg?kg－1）,各组又分为缺血2 h 再灌注后3、6、12、24、48、72 h 组,每组6 只。灌胃给药7天,每天1 次,第7 天灌胃2 h 后线栓法制作大脑中动脉阻断（MCAO）再灌注模型。免疫组化方法检测 eNOS、nNOS 和iNOS 蛋白表达。结果：①与假手术组比较,缺血再灌注组各时间点（3、6、12、24、48、72 h）eNOS、nNOS 和iNOS 表达均增强（P<0.05 或P<0.01）;于与缺血再灌注组比较,参芎化瘀胶囊预处理组各 时间点eNOS 表达均增强（P<0.05 或P<0.01）,nNOS 和iNOS 表达均减少（P<0.05 或P<0.01）,其中均以高剂量组效果最为显著。结论：参芎化瘀胶囊预处理对脑缺血再灌注损伤具有保护作用,其作用机制可能与调节NOS 分型表达有关。     

穴位贴敷治疗支气管哮喘述要

[目的]从支气管哮喘中西医浅见认识及穴位贴敷治疗的认识,讨论穴位贴敷疗法对支气管哮喘的疗效。[方法]运用三伏天中药穴位贴敷疗法。取穴:肺俞、心俞、膈俞(均为双侧),观察门诊支气管哮喘患者30例。[结果]30例中痊愈12例,占40%;有效14例,占46.67%;无效4例,占13.33%,总有效率为86.67%。[结论]穴位贴敷疗法对支气管哮喘具有显著疗效。值得临床推广应用。     

怀地黄块根中菊花心与非菊花心部位的化学质量特征比较

利用HPLC对怀地黄"北京1号"生育期内块根中菊花心、非菊花心及整体块根三部位中梓醇、毛蕊花糖苷、地黄苷A、地黄苷D、益母草苷进行含量测定,并结合其HPLC指纹图谱进行整体化学质量特征比较。结果表明,生育期内怀地黄主要成分含量变化趋势不同;各成分在菊花心与非菊花心部位富集量差别较大。梓醇、毛蕊花糖苷与地黄苷D在菊花心与非菊花心中的分布相对均匀,非菊花心部位地黄苷A的含量明显高于菊花心部位,而菊花心部位益母草苷的含量则明显高于非菊花心部位;地黄菊花心、非菊花心及整体块根3部位的HPLC指纹图谱色谱行为基本一致,但是化学成分含量相差较大;通过聚类分析,怀地黄菊花心部位与非菊花心部位、整体块根明显被分为2类。因此,怀地黄菊花心与非菊花心部位化学质量特征存在明显差异。该研究为怀地黄的质量评价和道地性的揭示提供依据。     

降脂颗粒联合行为干预治疗痰瘀互结型非酒精性脂肪性肝病的临床研究

目的评价降脂颗粒联合行为干预治疗痰瘀互结型非酒精性脂肪性肝病的临床疗效。方法采用随机区组设计方法将144例患者分为治疗组和对照组各72例,两组均采用行为干预,治疗组同时口服降脂颗粒（10g/次,3次/d）。两组均连续治疗24周,治疗后评价肝脏散射子定量超声、临床症状的改善情况,并进行综合疗效评价。结果治疗组治疗后肝脏B超显示病情较前改善（P〈0.01）,与对照组治疗后比较差异有统计学意义（P〈0.05）;治疗组治疗后症状总积分较治疗前下降（P〈0.05）,且较对照组治疗后为低（P〈0.05）;治疗组、对照组总有效率分别为76.56%和52.54%,组间疗效比较差异有统计学意义（P〈0.01）。结论降脂颗粒联合行为干预能有效改善患者肝脏脂肪浸润,并缓解临床症状。     

粉防己碱调控miR-21表达抑制卵巢癌上皮间质转化的实验研究

目的研究粉防己碱(TET)调控miR-21表达抑制卵巢癌上皮间质转化(EMT)的作用。方法以人卵巢癌细胞(A2780细胞)、人卵巢透明癌细胞(ES-2细胞)和正常人卵巢上皮细胞(IOSE80细胞)作为研究对象,采用MTT法测定0、1.0、2.0、5.0、10.0、20.0μmol/L的TET对上述3种细胞增殖的影响。实验分为IOSE80细胞对照组、A2780细胞对照组、ES-2细胞对照组、A2780细胞TET组、ES-2细胞TET组,采用实时荧光定量PCR法(RT-qPCR)测定各组细胞miR-21表达水平;迁移实验和侵袭实验考察TET对细胞迁移和侵袭的影响;蛋白印迹法(Western blot)测定各组细胞GSK3β、p-GSK3β、β-catenin、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin蛋白表达水平。结果①与对照组相比,TET浓度在1.0～20.0μmol/L时,A2780细胞和ES-2细胞存活率随着TET浓度的增加显著降低(P0.05);为减少TET药物对细胞的毒性,采用TET对A2780细胞和ES-2细胞的处理浓度分别为5.0μmol/L和3.0μmol/L进行后续实验。②与IOSE80细胞组相比,A2780细胞对照组和ES-2细胞对照组miR-21表达水平显著升高(P0.05);与A2780细胞对照组和ES-2细胞对照组相比,A2780细胞5.0μmol/L TET组和ES-2细胞3.0μmol/L TET组miR-21表达水平、迁移能力、侵袭能力、GSK3蛋白磷酸化水平、β-catenin蛋白表达水平、N-cadherin蛋白表达水平、Vimentin蛋白表达水平明显降低(P0.05),E-cadherin蛋白表达水平明显升高(P0.05)。结论 TET可能通过下调miR-21表达水平,从而阻断Wnt/β-catenin信号通路抑制卵巢癌EMT。     

N-(N��,N��-���׻�)���������ᵥ���̴����������ĺϳɡ����ʼ���Ϊ����������о�

??OBJECTIVE To synthesize a novel cationic cholesterol derivative, N-(N??,N??-dimethyl)propyl succinic mono-cholesteryl mono-amide(DMAPA-CHEMS), and evaluate its feasibility as a none-viral gene vehicle. METHODS DMAPA-CHEMS and phospholipid were employed to produce liposomes by thin membrane dispersion method, and the morphology of liposomes was observed under transmission electron microscope. The average diameter and Zeta potential were determined by laser particle size analyzer. The combination to and protection for DNA were investigated via agarose gel electrophoresis. The uptake of FITC-labelled oligonucleotides into HepG2 cells was determined by flow cytometry, while the transfection promotion of liposomes for GFP-plasmid DNA was observed by inverted fluorescence microscope. RESULTS The obtained liposomes showed regular shape and uniform size, with a mean diameter of 94.0 nm and Zeta potential of 24 mV. The liposomes could combine DNA completely and protect DNA from the degradation of DNase I when the charge ratio of cationic cholesterol to DNA was more than 4. The cationic liposomes had low cytotoxicity. Although the uptake efficiency of liposomes made of DMAPA-CHEMS was lower than that of DC-Chol, the gene expression efficiency was higher. CONCLUSION DMAPA-CHEMS is a novel gene carrier with high transfection efficiency and low cytotoxicity, which has a great potential for application.     

中药原生态种植研究

中药原生态种植是一种生态的种植模式,具有一定的安全性、地域性、效益性等基本特征,是我国中医药事业和天然药物产业健康发展的必由之路。中药原生态种植对于提高栽培药材质量,改善生态环境,保证中药资源的可持续利用,实现人与自然和谐共处有着巨大而深远的意义。