趋化因子受体阻断剂与艾滋病防治

化学趋化因子受体作为协同受体,主要包括CCR5与CXCR4,为人免疫缺陷病毒(HIV-1)进入细胞所必需. HIV协同受体的发现为治疗艾滋病开辟了新的途径. 利用趋化因子拮抗剂与天然配体封闭趋化因子受体可阻止HIV的感染;以靶细胞表面的趋化因子受体为靶点治疗HIV感染的新方法已成为国内外研究的热点,现对这一方面研究进展作一综述.     

骨髓间充质干细胞移植对心肌梗死大鼠血管新生和内皮功能的影响

目的:通过检测血特异的内皮细胞标记物管性假血友病因子,观察骨髓间充质干细胞移植治疗急性心肌梗死后大鼠局部新生血管情况,并探讨内皮血管功能指标E-选择素与新生血管的关系。方法:实验于2005-09/2006-06在唐山工人医院中心实验室完成。①选用清洁级健康近交系SD大鼠40只,随机数字表法分为假手术组、模型对照组、干细胞移植组、细胞培养基组,10只/组。②另取1只大鼠用于骨髓间充质干细胞的提取。大鼠处死后无菌条件下分离股骨和胫骨,应用密度梯度法分离培养骨髓间充质干细胞。待细胞80%贴满培养瓶底时,用乙二胺四乙酸和胰蛋白酶混合消化传代。将50mg/L4,6-二脒-2-苯基吲哚加入第3代细胞培养基中,制成细胞悬液备用。③术前各组大鼠均行气管插管,建立急性心肌梗死模型,以远端供血区心肌组织颜色苍白、心电图检测Ⅱ导联ST段持续抬高为模型建立成功的标志。假手术组仅开胸予以前降支穿线但不结扎。④造模成功后1～3h,干细胞移植组用微量注射器吸取4,6-二脒-2-苯基吲哚标记好的第3代骨髓间充质干细胞悬液50μL,直接注入梗死区边缘心肌组织。细胞培养基组按干细胞移植组的方法于相同部位注射等量无血清DMEM低糖培养基(pH值为6.9),模型对照组仅制作心肌梗死模型不作其他处理,假手术组亦不作其他处理。⑤造模后2,4周各组处死半数大鼠,切取心脏组织,于梗死边缘区心肌组织制作切片,荧光显微镜下观察4,6-二脒-2-苯基吲哚标记的供体细胞。链霉亲和素免疫组化法检测心肌细胞中血管性假血友病因子评估新生血管情况,酶联免疫吸附法测定血清E-选择素含量,评估内皮功能。结果:40只大鼠均进入结果分析。①各组大鼠心脏标本4,6-二脒-2-苯基吲哚标记移植细胞存活状况:骨髓干细胞移植治疗后,荧光显微镜下可见成团和散在的DAPI阳性细胞,其余3组大鼠心脏标本中均未见荧光细胞。②各组大鼠血清E-选择素的检测:心肌梗死后2,4周模型对照组及细胞培养基组E-选择素明显增高,与假手术组比较差异显著[2周:(36.04±4.47),(34.10±2.04),(13.37±3.01)μg/L;4周:(33.02±4.78),(33.96±5.18),(13.94±2.87)μg/L,P<0.01],干细胞组移植组E-选择素较模型对照组明显降低[2周:(24.29±3.51),(36.04±4.47)μg/L;4周:(17.45±3.22),(33.02±4.78)μg/L,P<0.05]。③各组大鼠心肌组织血管性假血友病因子表达情况:链霉亲和素免疫组化法显示,造模后2周干细胞移植组心肌细胞血管性假血友病因子呈强阳性表达,模型对照组和细胞培养基组血管性假血友病因子表达减弱。造模后4周干细胞移植组心肌细胞血管性假血友病因子表达仍呈强阳性,模型对照组和细胞培养基组血管性假血友病因子表达有减弱趋势。结论:①移入的骨髓间充质干细胞存活。②骨髓干细胞移植治疗实验性大鼠心肌梗死模型后,可提高心肌细胞血管性假血友病因子水平,促进局部血管新生。③移植后心肌梗死大鼠血清中E-选择素的降低,可能与其参与血管新生有关,同时也提示骨髓干细胞移植不会诱发E-选择素增高而加重动脉硬化。     

Splenic injury from colonoscopy: a review and management guidelines

Splenic injury is an uncommon complication of colonoscopy. Less than 100 cases are reported in the English language literature. The exact mechanism of injury to the spleen during colonoscopy is unknown; various authors propose several risk factors and possible mechanisms. Splenic injury can be graded or classified according to the extent of laceration and the severity of the resultant hematoma. The management options range from observation to emergency splenectomy. Computed tomography scan is the most important imaging modality to diagnose splenic injury. Early recognition and appropriate management is of paramount importance in the management of this condition. A high index of suspicion in a patient with persistent abdominal pain after colonoscopy is key especially when a perforated viscous is ruled out. This article outlines the clinical presentation of splenic injury after colonoscopy and delineates a management algorithm.     

兔活体主动脉脂质斑块的腔内超声显像和病理的对照研究

１１条新西兰兔进行血管腔内超声（ＩＶＵＳ）研究。其中８条经高胆固醇饲养６个月；另３条予正常饮食对照。采用６．２Ｆ，频率２０ＭＨｚ腔内超声导管。由腹主动脉下端水平插入超声导管至升主动脉，然后逐步退出，观察主动脉内膜、中膜和外膜的形态特征。结果发现，正常兔主动脉在腔内超声观察下均无内、中和外膜三层结构之分。３９个切面管壁弥漫性增厚，其形态看似管壁的三层结构，病理证实３４个切面有脂质斑块。平滑肌增生的脂质斑块，回声影低于血管壁。部份脂质斑块存在弥漫性纤维化、胆固醇结晶和少量镜下可见的钙化灶，回声影致密，与血管壁的回声相同，但其后无声影。腔内超声测定的斑块面积和厚度与病理结果比较，差别无显著意义（Ｐ＞０．０５），两者高度相关（分别为ｒ＝０．９７，Ｐ＜０．０００５和ｒ＝０．９６，Ｐ＜０．０００５）。     

应用Ⅳ型胶原黏附法进行人表皮干细胞的体外快速分离与鉴定

目的:以Ⅳ型胶原黏附法体外快速分离人表皮干细胞,利用其特异性标记物β1整合素及角蛋白19鉴定所培养细胞是否为表皮干细胞。方法:实验于2004-05/2005-03在南昌大学医学院烧伤研究所完成。①包皮来自行包皮环切术的儿童,由南昌大学第一附属医院提供,患者及其家属均签署知情同意书。②取手术刚切下的新鲜包皮,剔除皮下组织,采用DispaseⅡ酶和胰蛋白酶两步法分离出角朊细胞和成纤维细胞。收集处于对数生长期的第2～3代成纤维细胞的上清液,过滤除菌后与角朊细胞无血清培养基等比例混合,再加入体积分数为0.1的胎牛血清、表皮生长因子5μg/L、氢化可的松400μg/L、氯化钙0.05mmol/L、L-谷氨酰胺0.1mol/L、牛垂体提取物1.0mg/L,组成表皮干细胞培养液。分离的表皮片浸入2.5g/L胰蛋白酶-0.2g/L乙二胺四乙酸消化液中5min,所得细胞以表皮干细胞培养液悬浮。③将获得的角朊细胞悬液接种于预铺Ⅳ型胶原的六孔板中,每孔接种约1.5mL,室温静置10min,吸除未贴壁细胞,磷酸盐缓冲液漂洗至无细胞悬浮,即为富集分离的人表皮干细胞。加入人表皮干细胞培养基常规培养,第3天换液,后每隔1d换液一次。以同一标本同一批次培养的角朊细胞作为对照。④通过检测β1整合素、角蛋白19的表达水平及其克隆形成率和克隆维持时间,对其进行鉴定,以角朊细胞作为对照。结果:①人表皮干细胞形态学观察:倒置显微镜下,从角朊细胞中分离出的表皮干细胞体积小,呈单个、圆形贴壁,分散生长;培养12d后呈克隆样生长。②人表皮干细胞的克隆形成率:与同一标本同一批次培养的角朊细胞比较,人表皮干细胞的克隆形成率高[(8.72±0.73)%,(17.04±1.01)%,P<0.01],克隆维持时间更长[(9～10)d,(15～18)d,P<0.01]。③人表皮干细胞β1整合素和角蛋白19的表达:β1整合素及角蛋白19免疫组织化学染色均呈阳性。结论:①应用Ⅳ型胶原黏附法可对人表皮干细胞进行体外快速分离。②结合细胞形态学、细胞高克隆形成率和特异性标记物阳性表达等多种手段,鉴定所培养细胞为表皮干细胞。     

心肌梗死大鼠外周血中血管内皮因子水平与参芍宽心合剂的干预作用

目的:验方参芍宽心合剂已应用于临床,取得满意疗效;实验观察了参芍宽心合剂对心肌梗死模型大鼠血清细胞黏附分子1及E-选择素水平的影响,从动物实验方面探讨其对血管内皮功能的影响。方法:实验于2005-10/2006-06在唐山工人医院中心实验室完成。①实验干预:选用雄性SD大鼠50只,鼠龄10周。采用结扎心脏左前降支的方法建立心肌梗死模型,将40只造模成功的大鼠随机分为4组:模型组,宽心合剂小、大剂量组及治疗对照组,每组10只。取10只大鼠设为假手术组,仅开胸前降支穿线不结扎。于造模后24h模型组、假手术组开始灌胃生理盐水10mL/(kg·d);宽心合剂小、大剂量组:于造模后24h开始灌胃含宽心合剂生药15和30g/(kg·d)混悬液,参芍宽心合剂成分为丹参、黄芪、赤芍等;治疗对照组灌胃消心痛混悬液10mL/(kg·d),连续灌胃4周。②实验评估:采用酶联免疫吸附法测定血清中血管内皮细胞黏附分子1、E-选择素的含量。结果:进入结果分析的大鼠保持为50只。①给药4周后血清内皮细胞黏附分子1水平:假手术组低于其他各组,差异有十分显著性意义(P<0.01);经治疗对照组与小剂量宽心合剂组低于模型组,差异无显著性意义(P>0.05);宽心合剂大剂量组低于模型组,差异有十分显著性意义(P<0.01)。②给药4周后血清E选择素水平:假手术组低于其他各组,差异有十分显著性意义(P<0.01);治疗对照组和宽心合剂组低于模型组,差异有十分显著性意义(P<0.01)。且宽心合剂两个剂量组低于治疗对照组及模型组,差异有十分显著性意义(P<0.01)。宽心合剂大剂量组低于宽心合剂小剂量组,差异有显著性意义(P<0.05)。结论:参芍宽心合剂可以降低心肌梗死模型大鼠血清内皮因子的表达,保护内皮功能,这可能是参芍宽心合剂有效治疗心肌梗死的机制之一。     

Young girl presenting with exercise‐induced myoglobinuria

Introduction: The sarcoglycanopathies are a heterogeneous group of autosomal recessive limb‐girdle muscular dystrophies that cause varying degrees of progressive proximal muscle weakness. Methods: We describe the case of a Caucasian girl who presented with exercise intolerance, myalgia, and dark urine. Onset of symptoms was at age 4, and she had myalgia with physical activity throughout childhood. Creatine kinase levels were as high as 18,000. Results: Immunostaining of a muscle biopsy showed mildly diminished alpha sarcoglycan staining, and SGCA gene sequencing revealed n.C229T; p.Arg77Cys (R77C) and n.C850T; p.Arg284Cys (R284C), which is associated with alpha sarcoglycanopathy. Conclusions: This patient presented with exercise intolerance, myoglobinuria, and almost normal muscle strength into adolescence, which is uncommon in sarcoglycanopathies. This uncommon presentation should be kept in mind, so that early recognition and intervention may prevent future comorbidities and help preserve the quality of life. Muscle Nerve 54 : 161–164, 2016