病原生物学与感染性疾病

1 病原生物学 “病原生物学”是上个世界末才为医学界提及的一种称谓。其源于1997年国务院学位委员会和国家教育委员会批准颁布的“授予博士、硕士学位和培养研究生的学科专业目录”中出现的一个新的学科专业，称之“病原生物学”，其内容涵盖了微生物学和寄生虫学。     

2006-2008年广东省中医医院泌尿系感染病原菌菌群分布及耐药性分析

目的探讨泌尿系感染的病原菌分布及耐药性的变化,为I临床及时、正确、合理应用抗菌药物提供依据。方法对我院2006年1月-2008年12月尿液标本培养出的1681株病原菌进行菌种分类及耐药性分析,并与既往文献报道的泌尿系感染菌群及耐药性情况进行比较。结果 前4位的病原菌依次为大肠埃希菌（39．08％）、肺炎克雷伯菌（8．98％）、粪肠球菌（6．6％）、白色假丝酵母菌（5．53％）;大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌对氨苄西林、复方新诺明、环丙沙星、左旋氧氟沙星耐药率较高,且超广谱β－内酰胺酶（ESBLs）阳性率分别为59．1％、59．6％;粪肠球菌对四环素、链霉素、左旋氧氟沙星、环丙沙星等药物耐药性较高;真菌的总体耐药率不高。辟论大肠埃希菌仍然为泌尿系感染的主要病原菌;产ESBLs的细菌率上升;泌尿系真菌感染率增高;临床应及早行尿培养及药敏试验,早期可使用含有p内酰胺酶抑制剂的抗生素,不推荐首选喹诺酮类抗生素。     

猪原位肝移植体外静脉转流中门脉系统插管的选择

目的比较在猪原位肝移植体外静脉转流中行门静脉插管或脾静脉插管对血流动力学的影响。方法选健康美国杜洛克猪60头，配对施行原位肝移植术，根据术中转流时门脉系统插管的不同．随机分为两组．即门静脉插管组(n=15)和脾静脉插管组(n=15)。术中连续监测两组动物血流动力学指标的变化。结果门静脉插管组15例中死亡2例．其中1例死于术中转流不畅，1例死于DIC；脾静脉插管组15例中死亡1例，死于失血性休克。脾静脉插管组无肝期为(44．5土7．6)min，明显短于门静脉插管组的(51．5土8．7)minoⅢ、Ⅳ期门静脉插管组血流动力学改变与脾静脉插管组相比差异有显著性意义(P＜O．05)。结论在猪原位肝移植体外静脉转流中采用脾静脉插管转流能缩短无肝期，保持术中血流动力学的相对稳定，减少术后相关并发症的发生，是一种有效的静脉转流途径。     

比格犬ERβ剪切异构体ERβ419沉默表达载体的构建及筛选

目的构建最有效的慢病毒介导RNAi干扰序列,未来将应用于比格犬ERβ419的未知生物学功能的探索。方法模拟比格犬ERβ419靶细胞筛选针对目的基因mRNA设计的最佳干扰序列实验,通过qRT-PCR和Western Blot技术筛选最佳沉默表达载体序列。结果qRT-PCR结果显示,ERβ419-shRNA1(P0.01)和ERβ419-shRNA3(P0.01)的差异表达极显著,Western Blot结果与qRT-PCR结果一致,ERβ419-shRNA3的干扰效果最佳。结论 ERβ419-shRNA3最有效地抑制了目的基因的表达,未来将应用于探索比格犬ERβ419未知生物学功能对比格犬生殖系统影响的研究,并进而预防和治疗比格犬繁殖机能障碍性疾病。     

肺减容术治疗重度肺气肿的临床研究

目的总结肺减容术（LVRS）治疗不均质型重度肺气肿的临床经验及提高远期疗效的措施。方法回顾性分析施行LVRS的78例不均质型重度肺气肿患者临床资料,其中单侧52例,分期双侧17例,同期双侧9例。用切割缝合器切除一侧肺容积为20％～30％,对比术前、术后出院前1天、术后半年、1年和2年患者的活动能力和肺功能指标的变化。结果好转71例,加重2例,死亡5例。术后并发呼吸衰竭8例,持续漏气〉7d14例,73例于术后8～54d康复出院,5例死于呼吸衰竭。术后患者的FEV,等6项指标改善,术后2年患者各项指标较术后半年和术后1年有下降趋势,但差异无统计学意义。结论LVRS能明显改善不均质型重度肺气肿患者的主观症状,增加活动能力,近期疗效确切,但2年后肺功能有减退趋势,远期效果有待进一步观察和提高。     

不同浓度丙泊酚对断指再植手术患者患肢缺血再灌注及一周成活率的影响

目的观察不同浓度丙泊酚对臂丛神经阻滞断指再植手术患者患肢血浆中丙二醛（malondialdehyde,MDA）、缺血修饰白蛋白（ischemiamodifiedalbumin,IMA）、超氧化物歧化酶（superoxidedismutas,SOD）以及术后一周成活率的影响。方法选取60名急诊行断指再植手术患者,美国麻醉协会（AmericanSocietyofAnesthesiologists,ASA）分级I～Ⅱ级。电脑随机将所有患者均分为3组（n=20）：对照组（C组）、低浓度丙泊酚组（L组）以及高浓度丙泊酚组（H组）。所有患者均采用喙突下单点法臂丛神经阻滞,神经刺激仪定位。L组术中丙泊酚靶控血浆效应室浓度设置为0．5μg／ml,H组术中丙泊酚靶控血浆效应室浓度设置为2．0μg／ml。分别于术前（T0）,臂丛神经阻滞完成后15min（T1）,使用止血带60min（T2）,松止血带后10rain（L）、60rain（T4）抽取术侧肘部静脉血,测定血浆MDA、IMA、SOD的浓度。术后一周对所有患者随访,记录患者血管危象次数及再植断指成活率。结果松止血带后10min：C组及L组MDA、IMA值较术前明显增高,H组较术前无明显变化;C组及L组SOD值较术前明显降低,H组较术前无明显变化。松止血带后60min：C组IMA值较术前明显增高。L组及H组IMA值较对照组明显降低;c组及L组SOD值明显低于术前,H组SOD值较术前无明显变化。术后一周随访：H组患者血管危象发生率较C组及L组明显降低。H组再植断指成活率较C组及L组明显增高。结论丙泊酚可有效减轻肢体使用止血带所引起的缺血再灌注损伤,提高机体耐受缺血缺氧能力,且这种保护效果随着丙泊酚浓度的增高而增加。     

细粒棘球绦虫烯醇酶(EgEnolase)基因的克隆和序列分析

目的 细粒棘球绦虫烯醇酶基因(EgEnolase)的克隆和所编码的蛋白质的结构、功能以及应用前景分析.方法 利用美国国家生物技术信息中心(NCBI,http://www.ncbi.nlm.nih.gov/)的在线分析工具BLASTx和瑞士生物信息学研究所的蛋白分析专家系统(ExPaSy.http://ca.expasy.org/),以及CBS Prediction Servers提供的蛋白序列在线分析工具,结合Vector NTI suite生物信息学分析软件,从GenBank中细粒棘球绦虫的表达序列标签(EST)数据库中发现烯醇酶的5'端和3'端的EST序列,根据预测的编码区两端序列设计引物,从细粒棘球绦虫青海绵羊分离株中用多聚酶链式反应(PCR)方法扩增其基凶组序列,PCR产物克隆到T载体,测序并分析序列中的内含子,以内含子两侧序列的合并序列为引物.采用不对称PCR方法去除其中的内含子序列,预测编码蛋白的结构和功能特征,并分析其应用前景.结果 细粒棘球绦虫青海绵羊株烯醇酶基因的基因组序列长为1 449 bp,含有两个长度分别为78 bp和69 bp的小内含子.该基因编码433个氨基酸;预测其氨基酸序列中含有一段跨膜区(aa104-124),N端在膜外,C端在膜内,恰好分为两个不同的功能域,膜内区是执行酶催化功能的主体,Swiss-Model模建的3D结构显示,膜内区由α螺旋和β折叠相间排列形成桶样结构,底物结合位点、催化中心、Mg2+结合位点等关键位点在空间上紧密靠近,位于桶形结构的中心.该蛋白还有一个潜在的核定位序列aa190-199 .该蛋白含有多个T、B细胞表位,且膜外的aa49-57.和膜内的aa228-236兼性的T、B细胞表位,线性B细胞表位aa206-213中包含了催化位点Glu210.结论 细粒棘球绦虫烯醇酶可能是一个位于虫体皮层表膜具有较好的免疫诊断和疫苗应用前景的膜蛋白,同时还可能进入细胞核调节基因表达.     

柔性PET衬底上ZnO薄膜的制备、电学性质及激光辐照效应

室温下采用中频反应磁控溅射技术在柔性PET（Polyethylene terephthalate）衬底上沉积了ZnO薄膜。研究了溅射功率和氩氧流量比对薄膜电学性质的影响,获得室温沉积柔性ZnO薄膜的优化工艺条件为溅射功率20 W和氩氧流量比1：1。采用不同能量密度的激光辐照,有效改善了柔性ZnO薄膜的晶体结构和电学性能。原子力显微镜（AFM）和X射线衍射（XRD）测试结果显示,激光辐照可使薄膜表面ZnO颗粒产生团聚融合,并在（100）和（101）晶面上产生明显的取向生长,薄膜由非晶转为多晶结构。Hall性质的研究结果表明,激光辐照可有效提高ZnO薄膜的载流子浓度,降低电阻率,改善室温沉积柔性ZnO薄膜导电性能。     

马钱苷对AGEs致巨噬细胞极化的影响

目的 观察马钱苷对晚期糖基化终末产物（AGEs）致巨噬细胞极化的影响。方法 建立AGEs刺激巨噬细胞模型,设置空白对照组,模型组,氨基胍组,马钱苷低剂量组（1 μmol/L）和马钱苷高剂量组（10 μmol/L）。除空白对照组外,加入100 mg/L的AGEs刺激24 h后采用ELISA法检测细胞上清促炎性细胞因子IL-12、TNF-α和抑炎性细胞因子IL-10水平,采用流式细胞仪检测巨噬细胞M1型标记蛋白CD86和M2型标记蛋白CD206表达水平;免疫荧光法检测M1型标记蛋白iNOS和M2型标记蛋白CD206表达;Western blot法检测RAGE和巨噬细胞极化相关蛋白RBP-J、IRF8表达。结果 AGEs可上调IL-12、TNF-α水平（P<0.01）,促进巨噬细胞iNOS、RAGE、RBP-J和IRF8蛋白表达（P<0.01）;而马钱苷预孵能够下调IL-12、TNF-α水平（P<0.01）,上调IL-10水平,抑制RAGE、iNOS、RPB-J、IRF8蛋白表达（P<0.05~0.01）。结论 马钱苷可通过抑制RAGE/RBP-J/IRF8通路,抑制M1巨噬细胞极化,下调促炎因子IL-12、TNF-α水平,上调抑炎因子IL-10分泌,改善肾脏巨噬细胞炎症反应。      

A New Prenylated Xanthone from Root Barks of Cudrania cochinchinensis

Objective To study the chemical constituents from the root barks of Cudrania cochinchinensis. Methods The chemical constituents were isolated and purified by silica gel column chromatography. The structures of the compounds were identified on the basis of spectral data (MS, 1H-NMR, 13C-NMR, and 2D NMR) and by the comparison of spectroscopic data with the reported values in the literatures. Results A new xanthone, 1,6,7-trihydroxy-4-(1,1- dimethylallyl)-3-methoxyxanthone (1) and a known prenylated xanthone 1,5,6-trihydroxy-4-(1,1-dimethylallyl)-3- methoxyxanthone (isocudraniaxanthone B, 2) were isolated from the root barks of C. cochinchinensis. Conclusion Compound 1 is a new prenylated xanthone. Isomers 1 and 2 are obtained from this plant for the first time.