H CM V 兔胚肺细胞体外感染模型的建立

为探讨人巨细胞病毒（ＨｕｍａｎＣｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ,ＨＣＭＷ）ＡＤ１６９毒株体外感染兔胚肺细胞（ＲａｂｂｉｔＥｍｂｒｙｏＬｕｎｇｃｅｌ,ＲＥＬ）的敏感性,建立ＨＣＭＶＡＤ１６９毒株感染模型,将ＨＣＭＶＡＤ１６９毒株定量接种于ＲＥＬ,观察细胞病理变化;用单克隆抗体－免疫组化方法检测细胞内ＨＣＭＶ抗原;电镜检测细胞内病毒颗粒,用ＥＬＩＳＡ方法检测经ＲＥＬ增殖病毒培养物ＨＣＭＶ抗原滴度,用人胚肺细胞（ＨｕｍａｎＥｍｂｒｙｏＬｕｎｇｃｅｌ,ＨＥＬ）滴定病毒毒力变化。结果表明,接种病毒后,ＲＥＬ于４８ｈ出现细胞肿胀,胞浆内出现折光性颗粒,逐渐变圆、脱落,其病变特征与该病毒在ＨＥＬ增殖出现的病变一致;用免疫组化法在胞浆及其核内查到ＨＣＭＶ抗原;用透射电镜观察,在细胞核内查到大量病毒颗粒;用ＥＬＩＳＡ方法在ＲＥＬ病毒培养物中查到ＨＣＭＶ抗原,抗原滴度与ＨＥＬ增殖的病毒一致;与ＨＥＬ增殖物比较,经ＲＥＬ增殖的病毒培养物毒力降低１００ＴＣＩＤ５０。表明ＲＥＬ是ＨＣＭＶＡＤ１６９毒株的敏感宿主细胞。     

NK细胞免疫调节功能的前沿问题--"NK-reg"是否存在

免疫系统通过识别自我和非我保护机体免受外来病原体的侵袭，同时又通过对自身抗原的免疫耐受来防止自身免疫性疾病的发生。不适当的免疫应答，如对自身抗原产生应答，对外来病原体产生免疫耐受或应答过强，均会对机体造成严重损伤。为维持机体内环境的平衡，在免疫系统进化过程中，机体形成了多方位、多层次的免疫调控体系，如细胞因子网络、抗体的独特型网络、免疫细胞间的网络调节等。     

粘附性NK细胞的制备及免疫学特性初探

目的：初步探讨粘附NK细胞的制备方法及免疫学特性。方法：首先经淋巴细胞分离液，贴壁粘附及尼龙毛柱粘附对外周血NK细胞进行初步分离，然后联合使用Percoll不连续密度梯度离心法和T细胞Panning法进一步纯化NK细胞，应用流式细胞仪鉴定NK细胞并检测其纯度，rhIL-2(6000IU/ml)诱导纯化的NK细胞（R－NK）转变为粘附NK（A－NK）细胞，然后利用细胞计数法，MTT法和RT－PCR方法检测A－NK细胞的增殖和杀伤等免疫学特性。结果：经过纯化，诱导获得较高纯度，较高活性的A－NK细胞。结论：初步建立了利用人外周血NK细胞制备A－NK细胞的方法。     

重组人白细胞介素-18的高浓度复性、纯化和活性检测

目的摸索大规模生产重组人白细胞介素 18(rhIL 18)高效简便、成本低廉的生产工艺。优化rhIL 18高浓度下最优复性、纯化方案 ,建立快速准确的活性检测方法。方法采用液相色谱和光谱学方法检测复性效率 ,筛选确定rhIL 18最优复性条件 ,再用SepheroseFFANX阴离子交换柱结合分子筛HiPrepSephacrylS 10 0进行纯化。采用3 H 掺入法检测rhIL 18产品对人外周血单个核细胞的促增殖作用 ,用流式细胞术检测其促γ 干扰素生成能力。结果建立了一套rhIL 18复性、纯化、活性检测方案。结论液相色谱和光谱学方法相结合 ,可用于检测rhIL 18的复性效率 ,流式细胞术也可用于检测rhIL 18的生物活性。     

肿瘤逃逸NK细胞攻击的分子机制及逆转作用

通过分析NK细胞活化性受体、抑制性受体以及它们相应的配体,概括了NK细胞的天然肿瘤免疫监视功能和肿瘤细胞逃逸NK细胞杀伤的分子机制,在此基础上提出阻断NK细胞的抑制性信号,激发活化性信号,可以提高NK细胞的杀瘤效应,为肿瘤生物治疗探索新路.     

IL-6和IL-6R在脑胶质瘤发病中的作用初探

目的：初步探讨ＩＬ－６和ＩＬ－６Ｒ与脑胶质瘤发生发展的关系。方法：采用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法检测白细胞介素６（ＩＬ－６）和ＩＬ－６受体（ＩＬ－６Ｒ）基因在脑胶质瘤组织标本和正常人脑胶质细胞中的表达。结果：３０例脑胶质瘤组织标本中有２４例（８０．０％）表达ＩＬ－６、２６例（８６．７％）表达ＩＬ－６Ｒ、２２例（７３．３％）同时表达ＩＬ－６和ＩＬ－６Ｒ。人脑正常胶质细胞仅有ＩＬ－６基因弱表达,而玩ＩＬ－６Ｒ表达。结论：脑胶质瘤可能存在与肿瘤的恶性增殖有关的ＩＬ－６／ＩＬ－６Ｒ自分泌或旁分泌环路。     

照射后NK-92细胞对人鼻咽癌细胞体外杀伤活性的研究

目的研究NK-92细胞对人鼻咽癌细胞的体外杀伤活性,以及放射线照射后对其杀伤活性的影响。方法应用4 h51Cr释放法检测不同效靶比情况下体外培养的NK-92细胞对人鼻咽癌细胞CNE的杀伤活性,以K562细胞株作为对照。应用医用电子直线加速器对NK-92细胞进行照射处理(0、400 cGy)后,检测其杀伤活性的变化。结果NK-92细胞0 cGy照射组,效靶比较低时(1∶1、5∶1)对CNE细胞杀伤率为11%~24%,随效靶比升高,杀伤率随之上升,10∶1时杀伤率为36%,20∶1时杀伤率为42%;对于K562细胞,杀伤率为35%~70%。400 cGy组照射后2 d,NK-92细胞对CNE细胞不同效靶比的杀伤率与0cGy组相比稍有降低,其杀伤率为8%~38%,对K562细胞杀伤范围在31%~62%。结论在合适的效靶比情况下,NK-92细胞对人鼻咽癌细胞CNE具有杀伤作用,经放射线照射后对CNE细胞仍具有一定的杀伤活性。     

小儿肾母细胞瘤Th1／Th2类细胞因子的漂移及临床意义

采用逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）技术,检测正常儿及肾母细胞瘤患儿肿瘤组织,手术前后外周血Th1/Th2类细胞因子的基因表达,观察肾母细胞瘤患儿手术前后Th1/Th2类细胞因子的表达和漂移情况,结果显示肾母细胞瘤患儿外周血,肿瘤组织均出现明显的Th2类细胞因子偏移趋势,手术和化疗可促进Th1/Th2平衡向Th1漂移,肾母细胞瘤患者体内Th2类细胞因子的强势表达,可能与肾母细胞瘤的发生发展有关,Th1/Th2平衡漂移是观察机体抗肿瘤免疫动态变化的良好指标。     

肾母细胞瘤Th1/Th2类细胞因子的表达

目的：观察肾母细胞瘤患儿体内Th1/Th2类细胞因子的表达情况。方法：用逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）技术,检测正常儿及肾母细胞瘤患儿外周血、肿瘤组织及瘤旁正常肾组织中Th1/Th2类细胞因子的基因表达。结果：肾母细胞瘤患儿外周血、肿瘤组织及瘤旁肾组织均出现明显的Th2类细胞因子偏移趋势。结论：肾母细胞瘤患儿体内Th2类细胞因子的强势表达,可能与肾母细胞瘤的发生发展有关。     

人外周血单个核细胞表达细胞因子mRNA的临床意义研究

目的 建立细胞因子的基因检测方法,观察其在临床上的初步应用情况。方法 利用RT-PCR技术检测部分免疫相关性疾病和肿瘤病人外周血或组织中14种细胞因子的表达情况。结果 20例支气管哮喘病人外周血单个核细胞和23例肿瘤病人癌组织主要表达Th2类细胞因子(Ⅱ-4、6、10、13),15例肾病综合征病人主要表达炎性细胞因子(IL-1β、IL-6),16例自身免疫性甲状腺疾病病人主要表达IL-2、IL-4、IL-6,而5例正常人外周血单个核细胞中未检出细胞因子。结论 RT-PCR法检测细胞因子可用来反映多种疾病的病理变化。