重组杆状病毒／昆虫细胞表达体系在肿瘤研究中的应用

杆状病毒／昆虫细胞表达体系是一套新的真核表达体系，本文介绍了该体系的技术原理，以及利用该体系表达癌基因蛋白产物，肿瘤病毒抗原的应用情况，为肿瘤的基础和临床研究提供有用的分子生物学新技术。     

NK2细胞参与OVA诱导的小鼠哮喘

目的:用卵白蛋白(OVA)诱发小鼠哮喘,观察淋巴细胞亚群的变化以及NK细胞在此过程中的参与情况.方法:以氢氧化铝(Alum)作佐剂,OVA腹腔注射初次免疫14天后,连续6天OVA雾化,诱导小鼠哮喘.分离小鼠肺支气管肺泡灌洗液和肺脏淋巴细胞,用ELISA检测血清和灌洗液中IL-4的表达量,用三色流式细胞术检测肺脏淋巴细胞亚群及胞内细胞因子的表达.结果:随着雾化时间的变化,灌洗液中IL-4表达量上升,但血清中的IL-4基本不变.同时肺脏中直接检测到了表达IL-4的NK细胞群体,即出现NK2漂移现象,且观察到IFN-γ的表达受到抑制.结论:NK细胞参与OVA诱发的哮喘,而且伴随着Th2细胞的逐渐产生,NK细胞群体也向NK2转化,说明NK2细胞在此过程中起重要作用.     

ERK1/2信号传导途径参与调控NK细胞的杀伤活性

目的：阐明NK细胞系持续活化的信号通路ERK1／2在调节NK细胞增殖和杀伤活性中可能发挥的作用。方法：制备NK-92和YT细胞的全细胞提取物，进行Westrn blot，检测在细胞系中持续活化的信号传导途径，信号通路特异性阻断剂PD098059阻断ERK1／2活化，MTT方法评价ERK1／2在调节NK细胞杀伤和增殖活性中发挥的作用，RT-PCR检测阻断试剂作用前后杀伤相关分子表达水平的变化。结果：2个代表性的NK细胞系(YT，IL-2非依赖；NK-92，IL-2依赖)中存在ERK1／2(p44／42MAPK)、NF-kB和STAT3信号通路的持续磷酸化，去除IL-2和血清较长时间后仍保持活化状态，而其它信号途径(STAT1、STAT6、PI-3K、p38MAPK)则未见活化。特异性阻断剂PD098059 200μmol／L阻断ERK1／2活化后，NK细胞杀伤。K562靶细胞的能力显著降低。但细胞的增殖活性不受影响。RT-PCR证实，PD098059阻断ERK1／2抑制NK细胞毒活性的同时，杀伤相关分子IFNγ、FasL 、pcrforin的表达水平也不同程度地下调。结论：NK细胞系中持续性活化的ERK1／2主要传递与NK细胞细胞毒性相关的信号，并不参与调节细胞的增殖，该途径通过控制杀伤相关分子IFNγ、FasL、perforin的基因表达从而主导NK对靶细胞的杀伤。     

癌基因蛋白抗原肽与肿瘤特异性免疫治疗

近年来有关ＭＨＣ－ＴＣＲ与癌基因蛋白抗的肽的研究进展迅速，三者之间在空间结构上相互识别和有机结合，可以诱导以肿瘤特异性ＣＤ８ＣＴＬ增殖为主的细胞免疫应答，在Ｐ＾２１，Ｐ＾１２５，Ｐ＾５３Ｐ＾２１０ＢＣＲ－ＡＢＬ抗原肽的研究中已取得一定成果，有可能利用癌基因蛋白的肽，进行肿瘤特异性免疫治疗。     

人白细胞介素12诱生表达及双启动子真核表达载体的构建

白细胞介素12(IL-12)主要是由抗原提呈细胞产生的一种异二聚体(P40和P35)细胞因子,能显著增强NK/LAK以细胞的杀伤活性,促进特异性CTL细胞的应答能力,诱导T细胞和NK细胞大量分泌IEN-γ,启动Tho细胞向Thl细胞的发育,在抗肿瘤、爱滋等多种疾病中将发挥重要作用.我们用SAC,LPS,IFN-γ和PDBu等刺激剂作用外周血单个核细胞或口腔表皮样癌细胞株KB,成功诱生出IL-12-p40和p35,并插     

IL-2对活化与未活化淋巴细胞凋亡的影响

目的：研究IL-2对活化与未活化淋巴细胞凋亡的影响。方法：RT-PCR法检测两种单向混合淋巴细胞反应体系中Fas/FasL的表达情况,选取一个合适的反应体系作为活化淋巴细胞的模型;加入外源的IL-2,利用FITC-Annexin-V/PI双染色法检测活化与未活化淋巴细胞的凋亡情况;用CFSE区分供体和受体细胞,再用流式细胞术检测细胞表面Fas的变化。结果：未活化的脾脏淋巴细胞,加入IL-2后,细胞凋亡率降低,Fas^＋细胞比例降低;经混合淋巴细胞反应活化的脾脏淋巴细胞,加入IL-2后,细胞凋亡率升高,Fas^＋细胞比例升高,并且这种作用对于供体细胞和受体细胞都是相同的。结论：IL-2可以抑制未活化的淋巴细胞凋亡,促进活化的淋巴细胞凋亡,这种作用与Fas分子表达量的变化有关。     

14种细胞因子基因检测方法的建立及初步临床应用

细胞因子的临床检测正呈上升势头 ,原因是细胞因子表达的增加和降低与多种疾病的病理过程有关 ,细胞因子或细胞因子拮抗剂应用于疾病的治疗时 ,也应参考体内细胞因子的正确检测结果〔1,2〕。ＴＨ1/ＴＨ2理论的提出 ,使体内细胞因子网络初见雏型〔3,4〕,许多新型细胞因子也需要人们更深入地研究其在体内的功能和变化的规律 ,由此可见检测细胞因子的重要性和建立细胞因子检测方法的迫切性。我们在建立肿瘤细胞 5种细胞因子基因检测的基础上〔5〕,进一步建立了ＩＬ 1β、ＩＬ 3、ＩＬ 6、ＩＬ 12Ｐ4 0 、ＩＬ 12Ｐ35、ＩＬ 15、ＴＮＦ β、ＳＣ…     

癌基因蛋白──一类重要的肿瘤抗原

癌基因蛋白产物具备抗原的理化性质和异物性，在肿瘤细胞中可过度表达，在体内能激发机体的免疫系统产生相应的杭体和ＣＴＬ细胞，因而被认为是一类重要的肿瘤抗原，在此基础上利用癌基因蛋白作为肿瘤免疫治疗的靶目标，已取得可喜结果。     

生命科学本科生免疫生物学课程教学体系构建与探索北大核心CSCD

中国科技大学本科生“免疫生物学”课程群是结合生物学和医学免疫学的特点所创建的教学体系。该课程群注重学生正确的价值观和科研精神的培养,建立了具有逻辑关系的“三梯次”免疫生物学整体课程教学体系,同时将课程教学与科研实践、科研诚信教育有机结合,注重将临床问题转化为科学问题,激发学生创新性思维,提升学生解决问题的综合能力,实现了生物学与医学免疫学的交叉融合。