抗乙酰胆碱受体单链抗体基因克隆与表达

目的重建含有抗乙酰胆碱受体(AChR)单链抗体1929#(single-chain Fv antibody 1929#,scFv1929#)基因的载体并在大肠杆菌(E.coli)进行表达,提高scFv1929#的可溶性表达量。方法用聚合酶链反应法(PCR)扩增载体pHEN1中的scFv1929#结构基因,将扩增产物定向克隆至载体pET32a(+)的多克隆位点中构建新的载体pET32a(+)-scFv1929#,经EcoR v和NotⅠ双酶切后进行鉴定,并将所构建载体转化入表达宿主E.coli BL21(DE3)plysS菌株内诱导表达后集菌并裂菌,将诱导前菌体、诱导后菌体,以及裂菌后所得诱导后上清、诱导后沉淀进行十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析,并采用Western blot(WB)法进行鉴定。结果鉴定结果显示载体pET32a(+)-scFv1929#中所插入的scFv1929#基因片段大小为730bp,与预计相符,经测序确定该基因序列无误。SDS-PAGE电泳结果显示37℃下诱导前菌体、诱导后菌体、诱导后上清、诱导后沉淀中均可在相对分子质量(Mr)接近44 000处见到蛋白条带,其中诱导后菌体及诱导后沉淀中的条带较粗大。经WB法证实融合蛋白scFv1929#具有较高特异性。结论 scFv1929#表达载体pET32a(+)-scFv1929#被成功构建,并可在大肠杆菌中高效表达,其表达产物具有较好特异性。     

中西医结合治疗腰椎间盘突出症的体会

腰椎间盘突出症是骨科常见病和多发症,为腰腿病最常见原因[1]2009年4月～2012年7月笔者采用中西药物结合治疗腰椎间盘突出症患者,取得比较好的效果。1临床资料1.1一般资料:本组106例,男68例,女38例;年龄28岁～76     

右美托咪定用于减轻颅内动脉瘤患者麻醉诱导期血流动力学波动的临床价值

目的 探讨右美托咪定在颅内动脉瘤介入手术全身麻醉诱导期减少血流动力学波动中的应用.方法 选择全身麻醉下行颅内动脉瘤介入手术的患者60例,采用随机数字表法分为低剂量芬太尼组、高剂量芬太尼组和低剂量芬太尼复合右美托咪定组(复合组),每组20例.麻醉诱导前,复合组经微量泵持续静脉注射右美托咪定,总量1μg/kg,泵注时间10 min;低剂量芬太尼组和高剂量芬太尼组注射等量0.9％氯化钠.麻醉诱导时,低剂量芬太尼组和复合组静脉注射芬太尼3μg/kg、高剂量芬太尼组静脉注射芬太尼5μg/kg,余用药相同.记录入手术室平静休息3 min (T0)、气管内插管前即刻(T1)、插管后即刻(T2)、插管后3 min (T3)的收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、心率(HR).将每例患者麻醉诱导期间(T0～T3)SBP、DBP、HR最大值与最小值之差定义为各参数的波动值:△SBP、△DBP、△HR.记录诱导期间麻黄碱、阿托品的使用情况.结果 复合组△SBP、△DBP、△HR[(26.9±14.8) mm Hg(1 mm Hg =0.133 kPa)、(10.7±8.9) mm Hg、(12.5±4.3)次/min]均低于低剂量芬太尼组[(40.4±15.6) mm Hg、(20.3±9.4) mm Hg、(30.1±15.0)次/min](P＜ 0.05),高剂量芬太尼组△SBP、△HR [(29.8±16.8) mm Hg、(19.5±7.4)次/min]均低于低剂量芬太尼组(P＜0.05),复合组△HR低于高剂量芬太尼组(P＜0.05).麻醉诱导期三组阿托品使用率比较差异无统计学意义(P=0.364),高剂量芬太尼组麻黄碱使用率高于低剂量芬太尼组[30％(6/20)比5％(1/20),P=0.032].结论 麻醉诱导前应用1μg/kg右美托咪定,既能够良好抑制插管反应,又不会导致插管后血压严重下降,达到了稳定血流动力学的目标,特别适用于颅内动脉瘤患者的麻醉诱导.     

麻城市自杀死亡水平时间序列模型分析及预测研究

目的分析1984～2007年湖北麻城市人口自杀死亡水平的变化趋势,探讨求和自回归移动平均(ARI-MA)模型在自杀死亡率拟合中的应用,为制定针对性的干预措施提供参考依据。方法利用麻城市1984～2007年自杀死亡率资料,采用最大似然法估计模型参数,依据AIC和BIC准则确定拟合优度,以平均相对误差判断预测精度,建立最优预测模型,预测麻城市2008～2012年自杀死亡率。结果 1984～2007年期间该地区人群的自杀死亡率呈下降趋势(χ2=940.32,P<0.0001),24年的下降幅度为67.34%。所建立的ARIMA((3),1,(3))模型较好地拟合了既往时间序列的自杀死亡率,AIC=155.97,BIC=159.37,平均相对误差为5.77%,2008～2012年的预测自杀死亡率分别为27.08/10万,28.08/10万,21.55/10万,22.55/10万,16.02/10万。结论麻城市的自杀死亡率总体上呈下降趋势,ARIMA模型适用于该地区自杀死亡率的短期预测。     

冠状动脉内支架置入术在冠心病治疗中的价值

目的 评价冠状动脉内支架置入术在冠心病治疗中的临床应用价值。方法 对157例206支冠状动脉病变内置入203只支架，其中置入左前降支103只，右冠状动脉57只，左回旋支42只，左主干1只。结果 157例全部置入成功。置入后经冠状动脉造影证实狭窄消失，效果良好。其中5例急性心肌梗死患者由于急诊置入支架后，病情迅速缓解。择期冠状动脉支架置入术全部置入成功，无一例发生严重并发症。结论 冠状动脉内支架置入术是治疗冠心病的一种安全可靠、效果良好的介入性治疗方法、有良好的应用价值。     

超声引导下经皮肺穿刺活检术诊断矽肺周围型病变的应用价值初探北大核心CSCD

目的探讨超声引导下经皮肺穿刺活检术诊断矽肺周围型病变的应用价值。方法对36只健康西兰兔采用非暴露法气管注入石英粉尘制备兔矽肺模型,观察染尘2个月后肺部影像学改变。对照CT结果,对肺内周围型病变行经皮超声引导下穿刺活检术。计算取材成功率、穿刺活检与解剖病理结果的诊断符合率及并发症发生率,并以成功取材、穿刺活检与解剖病理结果相符且无并发症为严格意义上的穿刺成功。比较穿刺成功组与失败组体重、心率、呼吸、体温、病变大小、与胸壁距离及尘肺期别等指标的差异。经耳缘静脉注入10000U肝素抗凝处理后,用10％氯化钾5ml处死矽肺兔,留取肺组织标本行HE染色,观察矽肺兔肺部病理改变。结果36只矽肺兔模型中,30只肺内出现周围型病变。对30只矽肺合并周围型病变模型兔进行穿刺活检,总的穿刺成功率70％（21／30）。其中,取材成功率93％（28／30）,诊断符合率86％（24／28）,并发症发生率10％（3／30）。与穿刺失败组比较,穿刺成功组病变较大,距离胸壁较近,呼吸频率低,差异均有统计学意义（P〈0．05）。两组矽肺兔体重、心率、体温、尘肺期别差异均无统计学意义（P〉0．05）。穿刺活检及解剖病理显示周围型病变内见典型的矽结节,并可见肺小动脉肌化,内膜增厚,管腔闭塞等血管重构表现。结论超声引导下经皮对矽肺周围型病变穿刺活检安全可行,可作为监测矽肺周围型病变进展过程的重要技术手段,为矽肺病的临床诊断提供参考价值;通过肺穿刺活检观察矽肺结节内细小血管改变,有助于临床进行针对性的干预治疗。     

条形码扫描技术在患者血液透析中的应用

目的利用条形码扫描技术完善血液透析信息电子化管理系统,优化血液透析患者身份识别及治疗过程管理。方法应用条形码标签打印软件打印血液透析患者身份相关信息的条形码标签,通过平板电脑运行第三方应用程序扫描条形码标签进行血液透析患者就医身份识别及治疗过程的管理。结果将条形码扫描技术运用于血液透析患者就医身份识别后,血液透析患者在登记和透析治疗前、透析治疗中、透析治疗结束及护士在透析治疗过程中用药医嘱的执行等护理操作环节中的身份核对准确率达100%。结论将条形码扫描技术应用于血液透析患者就医身份识别及治疗过程管理,有利于提高血液透析患者身份识别的准确率,减少护理不良事件的发生,保证医疗安全,提高医疗工作的效率和信息化水平。     

不同剂量桃仁提取物对急性胰腺炎大鼠肠道黏膜屏障功能及免疫功能的作用

目的:研究不同剂量桃仁提取物对急性胰腺炎大鼠肠道黏膜屏障功能及免疫功能的作用。方法:48只大鼠制备SAP模型后随机分为模型对照组、桃仁提取物低剂量、中剂量和高剂量组,每组12只。另取12只大鼠作为假手术组,造模麻醉苏醒即开始干预,桃仁提取物低剂量组、中剂量组和高剂量组分别灌胃给予桃仁提取物0.12、0.248和0.36 g/kg,假手术组及模型组给予等体积蒸馏水灌胃,各组灌胃均1次/6 h,连续4次。给药后24 h应用10%水合氯醛麻醉各组大鼠,打开胸腔和腹腔,腹主动脉分别抽取5 ml血样于EDTA抗凝管和非抗凝管内,分别应用荧光直接标记法和流式细胞仪进行CD4+、CD8+和Treg细胞测定,采用免疫比浊法测定Ig A、Ig G和Ig M,采用EPS-G7底物法测定血清淀粉酶水平,采用酶学分光光度法检测血清D-乳酸水平,采用活性比色法测定血清二胺氧化酶;取小肠组织HE染色后采用光学显微镜进行病理学检查;取小肠组织采用放射免疫法进行s Ig A测定以及采用RT-PCR法进行TLR4和NF-κBp65 mRNA测定。结果:(1)中剂量和高剂量组大鼠血清淀粉酶、D-乳酸和二胺氧化酶水平均较低剂量组大鼠显著降低(P0.01),小肠黏膜s Ig A较低剂量组显著升高(P0.01),并且高剂量组和中剂量组差异具有统计学意义(P0.01);(2)桃仁提取物中剂量和高剂量组血液CD4+、CD4+/CD8+较低剂量组大鼠显著升高(P0.01),CD8+、Treg细胞较低剂量组大鼠显著降低(P0.01),并且高剂量组和中剂量组差异均具有统计学意义(P0.01);(3)桃仁提取物中剂量和高剂量组血清Ig A、Ig G、Ig M较低剂量组大鼠显著升高(P0.01),并且高剂量组和中剂量组差异均具有统计学意义(P0.01);(4)假手术组大鼠小肠黏膜无显著损伤,模型对照组大鼠小肠黏膜显著损伤,低剂量组大鼠小肠黏膜病理情况与模型组基本相似,中剂量和大剂量组大鼠小肠黏膜损伤显著降低;(5)桃仁提取物中剂量和高剂量组小肠组织TLR4和NF-κBp65 mRNA较低剂量组大鼠显著降低(P0.01),并且高剂量组和中剂量组差异均具有统计学意义(P0.01)。结论:桃仁提取物对急性胰腺炎大鼠肠道屏障功能具有保护作用,并且显著改善急性胰腺炎大鼠的免疫功能。     

桃红四物汤加减预防老年髋部骨折术后LEDVT的疗效探究

目的:分析桃红四物汤加减预防老年髋部骨折术后下肢深静脉血栓形成的效果。方法:选取2016年1月~2017年3月我院收治的71例老年髋部骨折患者为研究对象,根据随机数字表法分为对照组(36例)和观察组(35例)。对照组予以常规低分子肝素钠皮下注射,观察组在对照组基础上联合桃红四物汤加减治疗。比较两组治疗后血小板与血红蛋白水平、下肢深静脉血栓发生率、用药不良反应以及大腿、小腿周径差。结果:治疗后,两组血小板水平比较无显著性差异(P0.05);观察组血红蛋白明显高于对照组,下肢深静脉血栓发生率及大腿、小腿周径差明显低于对照组(P0.05);两组用药期间均未出现明显的不良反应。结论:桃红四物汤加减治疗可有效改善老年髋部骨折术后血液高凝状态,缓解患肢术后肿胀,预防下肢深静脉血栓形成。