诊断超声介导自制微泡造影剂的溶栓效应及参数优化体外实验研究

目的 研究诊断超声介导自制微泡造影剂对血栓的溶解效应以及对影响溶栓效果的超声频率、机械指数、照射时间、微泡浓度四个参数进行探讨,确定最佳的溶栓参数组合.方法 利用统计学L9(34)正交表确定不同的超声频率(1.8 MHz、5 MHz、11 MHz)、不同机械指数(0.5、1.2、1.6)、不同照射时间(10 min、30 min、60 min)、不同微泡浓度(3.5×109/ml、4.2×109/ml、5.0×109/ml)各参数不同水平间的组合,按照正交表所示组合参数条件进行体外溶栓,计算各组间的溶栓率P=[(W0- W1)/ W0]×100%,所得数据进行极差分析,切片HE染色及电镜下观察溶栓后的血凝块结构.结果 作用时间对其溶栓率的影响最大,其溶栓的最佳条件组合为超声频率A=1.8 MHz、机械指数B=1.6、作用时间C=60 min、微泡浓度D=5.0×109/ml.HE切片染色及扫描电镜1000倍观察溶栓后血凝块内部结构松散,并伴有大量纤维素断裂,出现较大的空洞与裂隙.结论 诊断超声介导下的超声微泡造影剂具有助溶作用,并在低频率、高机械指数、延长作用时间、高微泡浓度的参数条件下溶栓效果最佳.     

PDCA循环法在某肿瘤医院国家自然科学基金青年基金申报管理中的运用

专科医院如何提高国家自然科学基金的立项成功率。作者通过介绍某肿瘤医院科研科使用PDCA循环法,分析该院2007年至2016年10年期间国家自然科学基金青年基金申报出现的问题并进行总结,通过提供科研启动资金和一系列激励政策,使医院国家级课题的申报工作初步进入良性循环。     

慢病毒干扰小鼠附睾特异的meClps基因可降低精子的运动能力

目的筛选能有效干扰小鼠附睾特异的类辅脂酶meClps基因表达的RNA靶点,并通过慢病毒介导的RNAi敲低meClps
表达后分析对精子运动的影响。方法构建真核表达载体pDsRed2.0-C1-meClps中并转染NIH-3T3细胞,用meClps抗血清检
测meClps蛋白的表达。针对meClps基因的序列设计并合成3对靶向干扰meClps表达的寡核苷酸序列,构建重组慢病毒载体
pRNAT-U6.2/lenti-RNAi-251、224和286。将重组慢病毒干扰质粒分别与pDsRed2.0-C1-meClps共转染到NIH-3T3细胞,半定
量PCR和Western blotting检测meClps基因在mRNA和蛋白水平的变化。将筛选得到的干扰效果最好的慢病毒载体包装慢病
毒,注射到小鼠附睾头部组织后分析对附睾尾部精子运动性能的影响。结果构建了体外表达meClps 蛋白的
pDsRed2.0-C1-meClps 表达载体和靶向meClps 基因的慢病毒RNAi 载体。靶向meClps 的RNA 干扰载体对转染
pDsRed2.0-C1-meClps后的NIH-3T3 细胞中的meClps 的mRNA和蛋白表达都有抑制,但以转染pRNAT-U6.2/lenti-RNAi-251
对meClps的抑制效果最明显。包装后的慢病毒注射到小鼠附睾头部后附睾尾部组织中的精子运动速率降低（P<0.05）。结论
筛选出RNAi-251能有效干扰meClps表达,通过慢病毒介导的RNAi敲低meClps表达后精子运动性能降低。
     

Brn-2在人脉络膜黑色素瘤细胞系中的表达及其对MART-1基因启动子活性的影响

目的　探讨黑色素抗原转录子Brn-2在人脉络膜黑色素瘤细胞系中的表达及其对T细胞可识别抗原-1（melanoma antigen recognized by T cells 1,MART-1）启动子活性的影响。方法　采用RT-PCR和Western blot检测人脉络膜黑色素瘤细胞系92-1、92-2、Me1285和Ocm3 细胞中Brn-2的mRNA和蛋白表达水平。将含不同长度MART-1基因启动子序列和荧光素酶报告基因的表达质粒pGL3-Luc构建成融合表达载体pGL3-p286-Luc及pGL3-p2956-Luc,与pEV-Brn-2融合表达质粒共转染脉络膜黑色素瘤细胞系细胞。分别测量四种细胞系中p286组、p2956组、p286+Brn-2组、p2956+Brn-2组细胞荧光素酶表达变化,并观察Brn-2对上述细胞MART-1基因启动子活性的影响。结果　人脉络膜黑色素瘤细胞系92-1、92-2、Me1285、Ocm3细胞系均可检测到Brn-2 mRNA和蛋白的表达,Brn-2蛋白电泳带大致在相对分子质量47 000处。pGL3-p2956-Luc及pGL3-p286-Luc重组质粒经ApaI和NheI双酶切可切出2956 bp和286 bp 2个条带,pEV-Brn-2重组质粒经EcoRI和BamHI双酶切可切出1329 bp条带。pEV-Brn-2重组质粒分别对人脉络膜黑色素瘤细胞系Ocm3、Mel285、92-2、92-1进行磷酸钙法转染,Western blot检测可见四种细胞系均表达Brn-2蛋白。缺乏Brn-2时,所有细胞的MART-1的p286均显示出活性,MART-1阳性细胞系（92-1、92-2、Ocm3）p286活性高于阴性细胞系（Mel285）。p2956活性不同细胞系表现不同,92-1、92-2中较高,Ocm3中其活性与细胞密度相关,MART-1阴性细胞系中p2956近乎无活性。共转染Brn-2后明显下调92-1、92-2、Ocm3中启动子p286及p2956活性（P<0.05）;阴性细胞系Mel285中,Brn-2对启动子活性无影响（P>0.05）。结论　Brn-2表达于人脉络膜黑色素瘤细胞,并下调阳性细胞系MART-1启动子活性。     

知识蒸馏算法训练在胎儿心脏超声图像三血管气管切面精细化分割中的应用

目的探索基于知识蒸馏算法训练构建的胎儿心脏超声图像分割网络模型在胎儿心脏超声图像三血管气管切面精细化分割中的应用价值。方法回顾性收集2016年1月至2021年12月在浙江大学医学院附属邵逸夫医院接受胎儿心脏超声检查的正常中晚孕期胎儿1 300例, 分析胎儿心脏超声三血管气管切面二维灰阶超声图像, 将其分为训练集、验证集和测试集。应用训练集与验证集构建辅助诊断网络模型, 再用测试集对不同网络模型(U-Net、DeepLabv3+)进行测试, 由一名有经验的医生收集并注释三血管气管切面作为参考标准。以交并比(IoU)、像素精度(PA)和骰子系数(Dice)为3个定量评估分割精度指标, 评估该知识蒸馏算法训练模型的诊断效能。并对本模型及最常用的分割模型进行识别, 对结果进行比较。随机选取101张图像, 分别交由低年资医生、AI及低年资医生辅助AI判读, 绘制Bland-Altman图像评价其分别与参考标准的一致性, 并对三者结果进行比较。结果知识蒸馏算法训练模型在所有评价指标上均取得了比U-Net、DeepLabv3+模型更好的结果, 平均IoU、PA、Dice分别为68.6%、81.4%、...     

胎儿心脏超声智能导航技术在常见胎儿圆锥动脉干畸形关键诊断切面获得与显示中的应用价值

目的评价胎儿心脏超声智能导航技术（FINE）在常见胎儿圆锥动脉干畸形关键诊断切面获得与显示中的应用价值。 方法选取2018年1月至9月期间在浙江大学医学院附属邵逸夫医院超声科行胎儿超声心动图检查后明确诊断为圆锥动脉干畸形（CTD）的65例胎儿,其中法洛四联症（TOF）胎儿31例,完全型大动脉转位（TGA）胎儿24例,右心室双出口（DORV）胎儿10例,采用时间-空间成像技术（STIC）采集以四腔心切面为初始切面的胎儿心脏三维容积数据,然后通过FINE分析软件对每个容积数据进行分析,比较起始心尖不同位置时容积获取与分析成功率;分别对TOF、TGA、DORV胎儿的切面1周前后获取成功率和诊断符合率及所有CTD胎儿整体结果进行比较;并采用χ²检验对FINE技术的重复性进行分析。 结果心尖任意位置的65例胎儿共采集容积数据337个,可分析245个,成功分析226个,成功率92.24%,TOF、TGA、DORV、CTD胎儿1周前后2次诊断符合率分别为77.42%、80.65%;87.50%、87.50%;60.00%、70.00%;78.46%、81.54%。心尖位于A组（11~1点）的39例胎儿共采集容积数据207个,可分析192个,成功分析182个,成功率94.79%,TOF、TGA、DORV、CTD胎儿1周前后2次诊断符合率分别为94.12%、88.24%;93.75%、87.50%;66.67%、66.67%;89.74%、84.61%。1周前后2次诊断符合率比较,差异均无统计学意义（P均>0.05）。 结论FINE对胎儿CTD的诊断有一定的价值,且重复性高,在CTD的胎儿图像规范化采集与分析、远程会诊、培训及教学方面具有重要的应用前景。     

老年肌少症患者运动干预的最佳证据总结

目的 检索、评价及总结老年肌少症患者运动干预的最佳证据.方法 计算机检索BMJ最佳实践、UP TO DATE、澳大利亚JBI循证卫生保健中心数据库、英国国家卫生与临床优化研究所、加拿大安大略注册护士协会、PubMed、中国生物医学数据库、万方、中国知网、美国运动医学会等专业网站或数据库中关于老年肌少症患者运动干预的文献...     

药学监护模式在妊娠期肝内胆汁淤积症患者中的应用效果

目的 探讨药学监护模式在妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)患者中的应用效果,为药物治疗临床路径的制定提供参考依据.方法 选取2018年于安徽医科大学附属妇幼保健医院接受药学监护的ICP患者42例为监护组,同时选取2017年本院未行药学监护的ICP患者48例作为对照组.监护组实施药学监护模式.分析2组药物治疗情况,比较2组治...     

实时三维超声技术评价下肢动脉粥样硬化病变:与64层螺旋CT三维重建技术对比观察

目的 探讨实时三维超声技术(RT-3DU)评价下肢动脉粥样硬化斑块在定性和定量方面的应用价值,并与64层螺旋CT三维重建技术相对比.方法 对70例下肢动脉粥样硬化患者进行实时三维超声以及下肢动脉CT三维重建检查,进行影像学对比分析.结果 RT-3DU以及3D-CTA均可显示斑块的位置、管壁结构和管腔狭窄程度.RT-3DU可明确显示斑块的回声强度及其在血流冲击下的活动度,最大斑块处管腔狭窄率测量结果(86.52±2.30)%与3D-CTA (89.36±1.74)%比较差异无统计学意义(P>0.05),相关性良好(r=0.90, P<0.01);二者在斑块识别以及管腔的狭窄程度判断上一致性较高(Kappa值为0.80,P<0.05).结论 实时三维超声可较好地定性评价下肢动脉粥样硬化斑块,并具有能定量评价斑块、价廉、无创的独特优势,具有较高的临床应用价值.     

超声背向散射积分技术评价诊断超声结合微泡造影剂助溶静脉血栓的实验研究

目的应用超声背向散射积分技术（integrated backscatter,IBS）对兔股静脉溶栓后血栓状态进行检测,评价诊断超声结合微泡造影剂的助溶作用。方法健康家兔32只,建立兔右股静脉完全梗阻型血栓模型,将其分为单纯尿激酶组（UK组）8只,超声结合微泡造影剂组（US＋MC组）8只,超声结合微泡造影剂＋尿激酶组（US＋MC＋UK组）8只,对照组8只。使用HP5500型彩色超声诊断仪,检测溶栓后管腔内不同回声血栓块超声背向散射积分（IBS）值及管腔外膜IBS值,并计算管腔内血栓块IBS值与管腔外膜IBS值比值,即校正IBS值（IBS%）。并进行组间比较。取各组溶栓后的兔股静脉标本进行免疫组化检测,观察管腔内血栓溶解情况。结果溶栓后,US＋MC＋UK组管腔回声为无回声,其IBS%值0.29&#177;0.05;UK组以弱回声为主的混合回声,IBS%值为0.58&#177;0.03;US＋MC组以中等回声为主的混合回声,IBS%值为0.89&#177;0.06;对照组管腔呈强回声,其IBS%值1.23&#177;0.17;US＋MC＋UK组IBS%值显著低于各组（P〈0.05）;UK组、US＋MC组均低于对照组（P〈0.05）,两组间亦有统计学差异。结论IBS技术可以对溶栓后管腔内的不同回声进行定量分析,其结果表明诊断超声结合自制微泡造影剂对兔股静脉血栓有很好的助溶效应。