大鼠胰岛分离纯化及功能测定

目的探讨分离和纯化高纯度、高活率、功能佳的大鼠胰岛的方法,并为胰岛移植等实验建立基础。方法采用胶原酶P逆行胆总管灌注,消化分离成年大鼠胰岛,Ficoll 400非连续密度梯度离心法纯化胰岛。形态观察,双硫腙（DTZ）染色鉴定胰岛,AO／PI染色检测细胞活率,胰岛素释放试验评价胰岛的功能。结果分离纯化后大鼠胰岛形态完整,平均获得量为（512±89）IEQ,胰岛细胞纯度大于90％;胰岛细胞活率大于90％。在低糖和高糖刺激下,胰岛素分泌量分别为（25．42±4．22）mIU·L-1和（38．75±4．56）mIU·L-1,差异具有统计学意义（P〈0．01）。结论胶原酶P逆行灌注消化胰腺、Ficoll 400非连续密度梯度离心法可获得形态、功能完好、高纯度、高活率的胰岛。