遗传性凝血因子Ⅶ缺陷症患者表型与基因型分析

目的:对1例遗传性凝血因子Ⅶ(FⅦ)缺陷症患者进行表型与基因型分析,探讨其致病机制。方法:检测患者血浆凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT),并对其FⅦ促凝活性(FⅦ:C)、FⅦ抗原(FⅦ:Ag)等进行表型诊断;采用DNA直接测序法对患者FⅦ基因的全部外显子及侧翼、启动子区进行分析,寻找基因突变,反向测序证实所发现的突变。结果:患者的PT、FⅦ:C和FⅦ:Ag明显异常,分别为26.5s、6.0%和2.1%。患者FⅦ基因外显子1a存在27delCT杂合突变,引起读码框移位,导致终止密码子提前出现,产生截短蛋白。结论:27delCT突变是影响该患者表型的主要因素。     

自然流产和甲状腺自身抗体的相关性研究

目的 探讨自然流产和甲状腺自身抗体的相关性。 方法 选择浙江省湖州市中心医院妇产科2012年1月-2016年12月原发性流产患者70例作为原发性流产组,复发性流产组患者70例作为复发性流产组,健康体检者70例作为对照组。测定3组血清TSH、FT3、FT4、TPO-Ab、TG-Ab水平。 结果 复发性流产组患者TA阳性率、TPO-Ab阳性率、TG-Ab阳性率均高于对照组(均P<0.05),复发性流产组患者TA阳性率、TPO-Ab阳性率、TG-Ab阳性率与原发性流产组比较差异无统计学意义(均P>0.05),原发性流产组TG-Ab阳性率高于对照组(P<0.05),TA阳性率、TPO-Ab阳性率与对照组比较差异无统计学意义(均P>0.05)。复发性流产组lg(TPO-Ab)高于对照组(P<0.05),复发性流产组lg(TPO-Ab)和原发性流产组比较差异无统计学意义(P>0.05),原发性流产组lg(TPO-Ab)和对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),3组lg(TG-Ab)比较差异无统计学意义(P>0.05)。复发性流产患者中,2次流产组和>2次流产组TA阳性率、TPO-Ab阳性率、TG-Ab阳性率比较差异无统计学意义(均P>0.05)。早期流产组和晚期流产组TA阳性率、TPO-Ab阳性率、TG-Ab阳性率比较差异无统计学意义(均P>0.05)。原发性流产组和继发性流产组TA阳性率、TPO-Ab阳性率、TG-Ab阳性率比较差异无统计学意义(均P>0.05)。 结论 复发性流产患者血清TA、TPO-Ab、TG-Ab阳性率和水平升高,甲状腺自身抗体和复发性流产的发生有关。      

不同复苏液对失血性休克大鼠外源性凝血系统凝血因子的影响

目的探讨不同复苏液对失血性休克大鼠外源性凝血系统凝血因子的影响及意义。方法50只SD大鼠随机分为5组(对照组、假手术组、休克组、林格组和万汶组),每组10只。建立失血性休克大鼠模型后,复苏各组在失血性休克1 h后给予不同复苏液(林格氏液、6%中分子羟乙基淀粉130/0.4),复苏2 h后采血。采用一期凝固法测定凝血因子II、V、VII、X活性(FII:C、FV:C、FVII:C、FX:C)及血浆凝血酶原时间(PT)和活化部分凝血活酶时间(APTT),Clauss法测定纤维蛋白原含量(FIB),并将各组的变化进行比较分析。结果对照组与假手术组比较各指标差异无统计学意义(P0.05)。与假手术组比较,休克组、林格组和万汶组FII:C、FVII:C、FX:C和FIB含量均明显下降,PT、APTT明显延长,差异有统计学意义(P0.01)。与休克组比较,林格组FII:C、FVII:C、FX:C明显下降,PT、APTT明显延长;万汶组FII:C、FVII:C、FX:C明显升高,PT、APTT明显缩短,差异有统计学意义(P0.01或P0.05)。FV:C休克组明显高于假手术组,万汶组明显低于假手术组和林格组,差异有统计学意义(P0.01)。结论大鼠失血性休克外源性凝血系统凝血因子除FV:C外均出现不同程度的降低;单用林格液复苏可出现缺血再灌注损伤,使凝血功能更加紊乱;采用万汶+林格液复苏对凝血功能有改善作用。     

1例复合杂合突变所致的凝血因子Ⅻ缺乏症家系分析

目的 分析1个遗传性凝血因子Ⅻ缺乏症家系表型及基因突变情况,探讨其分子致病机制.方法 对先证者及其家系进行活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、纤维蛋白原(Fib)、凝血因子Ⅻ活性(FⅫ:C)和凝血因子Ⅻ抗原(FⅫ:Ag)测定.用DNA直接测序法进行FⅫ基因突变检测.采用ClustalX-2.1-wi...     

淋巴细胞VCS参数在系统性红斑狼疮患者中的变化及意义

目的:探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者淋巴细胞(LY)VCS参数的变化及临床意义.方法:利用BeckmanCoulter Gen.S自动血液学分析仪的VCS技术,测定90例SLE患者(根据SLEDAI积分判断活动情况分为轻、中、重度 3组)、83 例其他风湿免疫性疾病患者(疾病对照组)及57名健康对照者的WBC、LY%和LY的体积(LYV)、电导率(LYC)、光散射性(LYS)及其平均分布宽度(LYVSD、LYCSD、LYSSD),用ROC曲线评价各参数的敏感度和特异度.结果:LYVSD、LYC、LYCSD、LYS在SLE组、疾病对照组及健康对照组问的差异均有统计学意义(均P＜0.05),以SLE组的上述各参数变化最为显著;SLE患者疾病活动期各组的LYV、LYS、LYVSD、LYCSD、LYSSD明显升高,LY%和LYC显著下降,以重度活动组的LYVSD、LYCSD、LYS变化最为显著(P均＜0.05);LYVSD(cut-off值≥15.9)在区分SLE和其他风湿免疫性疾病时具有较高的敏感度(80.7%)和特异度(71.4%).结论:SLE患者的LY体积、细胞内部结构及胞浆复杂性等发生了明显变化,LYVCS 在区分SLE和其他风湿免疫性疾病时具有一定的诊断价值.     

一个近亲结婚导致的遗传性凝血因子Ⅴ缺陷症家系的基因突变分析

目的 对1个姨表近亲结婚的遗传性凝血因子Ⅴ (coagulation factor Ⅴ,FⅤ)缺陷症家系进行基因分析,探讨其分子发病机制.方法 检测先证者及其家系成员的凝血酶原时间(prothrombin time,PT)、活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)、纤维蛋白原(fibrinogen,FIB)、血浆FⅤ活性(FⅤ∶C)和血浆FⅤ抗原(FⅤ∶Ag)等凝血指标进行表型诊断.用DNA直接测序法分析先证者及家系成员F5基因的全部外显子及侧翼、5’和3’非翻译区,发现突变位点用反向测序予以证实.结果 先证者PT和APTT均明显延长,分别为23.5s和50.5s,其FⅤ∶C(8％)和FⅤ∶Ag(＜1％)极度减低;同样先证者的妹妹PT和APTT也显著延长,分别为24.1s和62.4 s,其FⅤ∶C(7％)和FⅤ;Ag(＜1％)也极度减低;家系其他成员的PT及APTT均在正常参考范围.先证者的F5基因第5外显子测序发现其29170位为纯合突变T→C,导致190位氨基酸苯丙氨酸变为丝氨酸(Phe190Ser),先证者的妹妹同样为纯合Phe190Ser突变;大哥、大姐、大女儿、小女儿和外甥女均为Phe190Ser杂合突变,其FⅤ∶C也有所减低(分别为57％、73％、72％、66％、75％);两个弟弟为正常野生型,其FⅤ∶C和FⅤ∶Ag均在正常水平.结论 该遗传性FⅤ缺陷症家系先证者及其妹妹F5基因第5外显子存在g.29170T→C纯合型错义突变,导致Phe190Ser.其原因推测与其父母近亲结婚有关.Phe190Ser与该遗传性凝血因子Ⅴ缺陷症家系FⅤ水平降低有关.     

凝血因子Ⅻ基因多态性与急性心肌梗死的关联性研究

目的分析急性心肌梗死（AMI）患者凝血因子Ⅻ（FⅫ）基因多态性和急性发作时血浆凝血因子Ⅻ活性（FⅫ:C）的变化及意义。方法收集97例AMI患者治疗前及76例对照血液标本,采用直接测序法检测FⅫ第46位基因多态性和一期凝固法检测血浆FⅫ:C,并进行比较分析。结果FⅫ基因C46T多态位点CC、CT、TT3种基因型以及C、T等位基因频率在AMI组与对照组中的分布均无统计学差异（均P＞0.05）。CC、CT和TT3种基因型分别对应的血浆FⅫ:C水平有统计学差异（P＜0.01）,以CC组活性最高,TT组活性最低。AMI组血浆FⅫ:C显著低于对照组（P＜0.01）。结论FⅫC46T基因多态性与AMI无关联,AMI发病时血浆FⅫ:C显著降低,FⅫ参与血栓形成。     

VCS技术对异常结果标本白细胞分类的可靠性评价

目的 探讨美国贝克曼库尔特GEN-S五分群血细胞分析仪采用VCS技术对白细胞分类的可靠性。方法 分别采用仪器计数分类和手工显微镜分类，对182例正常对照组和8612例患者标本中白细胞分类单核细胞百分率(MO％)＞12％R 共327例各种疾患的标本进行比较分析。结果 正常对照组GEN-S仪器计数分类和手工显微镜分类的五种白细胞结果均无显著差异(P＞0．05)；各种疾患组当仪器分类MO％＞12％时，肝病组、肾病组、癌症化疗组、肺病组的MO％结果仪器法显著高于手工法(P＜0．01)，肾病组、肺病组和癌症化疗组的淋巴细胞百分率(LY％)仪器法显著低于手工法(P＜0．01)；肝病组的嗜中性粒细胞百分率(NE％)仪器法显著低于手工法(P＜0．01)。结论 贝克曼库尔特GEN-S血细胞分析仪对正常结果的血标本白细胞分类结果准确，但对白细胞分类MO％＞12％的标本应手工复检。     

复合杂合性蛋白C基因突变导致的遗传性蛋白C缺陷症家系分析

目的 对1个遗传性蛋白C(proteinC,PC)缺陷症家系进行蛋白 C基因(protein C gene,PROC)突变检测,探讨其分子发病机制.方法 通过检测先证者及其家系成员(共4代15人)血浆蛋白C活性(protein C activity,PC∶A)、蛋白C抗原含量(protein C antigen,PC∶Ag)及其他凝血指标进行表型分析;用PCR法扩增先证者PROC的9个外显子及其侧翼序列,PCR产物纯化后测序,发现突变位点则反向测序予以证实;针对先证者的突变位点,对其家系成员进行相应基因突变检测.结果 先证者PC∶ A和PC∶Ag明显降低,分别为26％和18.60％,家系中其他成员中有7人PC∶A降低,6人PC∶Ag降低.先证者的PROC第7外显子存在g.6128T＞G杂合错义突变导致p.Phe139Val,第9外显子存在g.8478G＞C杂合错义突变导致p.Asp255His;其祖母、父亲、三姑和四姑均存在g.6128T＞G杂合突变,母亲、二舅、妹妹和儿子均存在g.8478G＞C杂合突变.存在g.8478G＞C突变的成员PC∶A下降明显.结论 先证者PROCg.6128T＞G和g.8478G＞C突变分别来自其父系家族和母系家族,该复合杂合错义突变是导致遗传性PC缺陷症的分子基础.     

血液分析仪VCS参数分析应激反应时中性粒细胞形态改变的价值

目的探讨应激反应时中性粒细胞(Neg)VCS参数对Neg核象变化和中毒性改变的可靠性。方法利用Beckman-Coul-ter Gen.S血液分析仪的体积、高频传导、激光散射(VCS)技术,测定50例健康体检者和130例重症患者应激状态下的WBC、Neg百分数(Neg%)、Neg体积(NegV)、电导率(NegC)、光散射性(NegS)及各自平均分布宽度(SD),镜下观察WBC分类和细胞形态学结果,并采用ROC曲线评价各参数的诊断价值。结果与健康对照组相比,重症患者不同程度核左移组及无中毒性改变组、有中毒性改变组的WBC、Neg%和NegV-SD、NegC-SD、NegS-SD明显升高,而Neg-C、Neg-S显著下降(Р均<0.05)。NegV、NegC、NegV-SD的ROC曲线下面积判断有无核象改变分别为0.799、0.823、0.843,有无中毒性改变分别为0.731、0.754、0.761,均有较好的敏感性和特异性。结论重症患者在应激状态下NegVCS参数均可发生明显变化,以NegV、NegC、NegV-SD对预测其形态学改变的敏感性和特异性最佳。