肝复康不同浓度含药血清对肝星状细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原及细胞基质的影响

背景：既往的动物实验已多次证实了肝复康对肝纤维化组织具有预防及治疗作用。目的：观察中药肝复康不同浓度含药血清对肝星状细胞T6细胞株Ⅰ、Ⅲ型胶原、a-平滑肌肌动蛋白和金属蛋白酶组织抑制因子1基因表达的影响，以及探讨其抗纤维化的作用及分子机制。设计、时间及地点：随机对照动物实验，于2005-07／2006—07在大连医科大学病理生理学教研室完成。材料：清洁级SD大鼠25只，体质量300～350g，用于制备含药血清；鼠肝星状细胞T6细胞株由上海中医药大学肝病研究所徐列明教授惠赠；中药肝复康由柴胡、当归（补血合血）、黄芪（益气）、赤芍、白芍（活血化瘀）、丹参（活血化瘀）等组成。方法：按肝复康高、中、低剂量（8．32，4．16，2．08mL／只）灌胃制备药物血清。实验分为5组，空白对照组：加含体积分数0．1正常对照血清的DMEM；模型对照组：加含体积分数0．1正常对照血清＋60ug／L血小板衍生生长因子的DMEM；肝复康低、中、高剂量组：分别加含体积分数0．1低、中、高剂量药物血清＋60ug／L血小板衍生生长因子的DMEM；各组均培养24h。主要观察指标：反转录-聚合酶链反应检测不同浓度肝复康药物血清干预后Ⅰ、Ⅲ型胶原、a-平滑肌肌动蛋白和金属蛋白酶组织抑制因子1mRNA的表达。结果：空白对照组肝星状细胞T6细胞各指标表达呈相对低水平，而模型对照组表达明显升高（P〈0．01）；肝复康各剂量组则均具有能明显抑制这种升高的作用（P〈0．01），其中以中剂量组干预效果最为明显。结论：中药肝复康对肝纤维化具有明显的抑制作用，其作用机制可能是通过抑制Ⅰ、Ⅲ型胶原、a-平滑肌肌动蛋白及金属蛋白酶组织抑制因子1mRNA的转录，从而减少细胞外基质的形成，以达到抗纤维化的作用。     

肝复康对肝纤维化大鼠肝组织JAK2和STAT3表达的影响

目的观察中药肝复康对肝纤维化大鼠肝组织Janus激酶2（JAK2）及信号转导子和转录激活子3（STAT3）表达的影响,并对其在JAK2/STAT3信号通路上治疗肝纤维化的作用机制进行初步探讨。方法采用10%四氯化碳皮下注射制备肝纤维化模型,于造模第9周给予肝复康治疗12周。通过测定血清中ALT、AST活性及白蛋白和总蛋白的含量来反映肝脏功能,HE染色法观察肝组织病理学变化,RT-PCR观察JAK2和STAT3 mR-NA的表达。结果经肝复康治疗后,中剂量治疗组与模型组相比较,肝脏的组织学和血清学指标均明显改善,肝组织JAK2、STAT3 mRNA的表达显著减少（P〈0.01）。结论 （1）JAK2/STAT3信号通路在肝纤维化的形成过程中起重要作用;（2）肝复康对肝纤维化有疗效,其作用机制可能与降低肝组织JAK2和STAT3的表达,阻断JAK2/STAT3信号通路有关。     

疏肝祛瘀通络降浊法对大鼠非酒精性脂肪性肝炎的保护作用

目的探讨非酒精性脂肪性肝炎大鼠内毒素性肝损伤机制及中药对其影响。方法用喂饲高脂饮食的方法建立非酒精性脂肪性肝炎大鼠模型。4周后用疏肝祛瘀通络降浊法分小、中、大剂量进行治疗,12周后处死测定血脂、ALT、内毒素(ET)、肿瘤坏死因子(TNF-α)和白细胞介素(IL-1β)的含量;免疫组化法观察肝组织CD14和核转录因子(NF-κB)的表达;RT-PCR检测脂多糖结合蛋白(LBP)和4型Toll样受体(TLR-4)mRNA的表达。同期正常饮食饲养大鼠作对照。结果第12周时,模型组大鼠腹主动脉血清内毒素水平较正常组明显升高,有显著性差异;中剂量治疗组大鼠血清ET、TNF-α、IL-1β水平明显低于模型组,差异有显著意义。模型组大鼠肝组织CD14阳性细胞数量明显增多,主要分布于肝窦内,部分呈灶型聚集;与模型组相比,中剂量治疗组大鼠肝组织CD14阳性细胞数量明显减少。模型组可见少量细胞核染色的NF-κB阳性细胞散在分布于汇管区。模型组肝组织LBPmRNA和TLR-4mRNA表达均明显上调,与正常组比较差异均有显著意义;中剂量治疗组大鼠肝组织LBPmRNA和TLR-4mRNA表达均较模型组明显下调,且有显著性差异。结论疏肝祛瘀通络降浊法对非酒精性脂肪肝有疗效,可能与其降低血清内毒素水平和下调肝组织内毒素相关受体表达继而减轻炎症性肝损害有关。     

铜绿假单胞菌注射液辅助治疗恶性肿瘤的应用进展

铜绿假单胞菌注射液的基础研究和临床应用均表明其具有较强免疫原性,不仅调整机体体液免疫,使机体产生不同菌属的高效价广谱抗体;同时也可全面调整机体细胞免疫,增强机体抗感染能力.配合手术后的放化疗治疗,可以降低术后感染的并发症及肿瘤复发率、增强放化疗效果,提高肿瘤患者的生存质量,在多种恶性肿瘤的临床治疗中被证实使用有效,且安全可靠,无明显毒副作用.现将铜绿假单胞菌注射液辅助治疗恶性肿瘤的现状做一综述.     

留学生病理生理学实验教学探讨

近年来,随着我国教育事业的深入发展和对外交流的增强,留学生教育已成为高校一项重要的教学任务,是教师面临的一个崭新课题.经过多年的留学生医学基础课全英文授课[1],我们取得了一定的成绩,积累了很多经验,同时也发现了许多不足,笔者结合几年来病理生理学实验全英文教学的体会,在此与同行们从几个方面共同探讨,以进一步提高留学生的病理生理学实验课的教学水平.     

丹参及β-七叶皂甙钠对烫伤大鼠AⅡ/ANP比值调节作用的实验研究

目的 观察血管紧张素Ⅱ(AⅡ)/心房肤(ANP)比值失衡在烧伤后急性肾损伤(acute renal in-jury,ARI)发病机制中的重要作用,探讨丹参及β-七叶皂甙钠通过调节AⅡ/ANP比值来减轻肾内血管收缩所引起的肾功能损害的治疗作用及其机制,为临床治疗烧伤后AKl提供理论依据.方法 制作30%TBSAⅡ度大鼠烫伤模型,并随机分盐水组(M)、丹参组(S)、β-七叶皂甙钠组(A)及联合组(C,丹参+β-七叶皂 甙钠).另设假烫对照组(N),每组8只.烫伤后24 h取静脉血测血清BUN、Cr、Na及尿Cr、Na,检测血浆及肾组织血管紧张素Ⅱ(AⅡ)、心房肽(ANP)含量.结果 盐水组及治疗各组血浆及肾组织AⅡ、ANP含量均增高,盐水组AⅡ增加幅度明显高于ANP增加幅度,存在明显AⅡ/ANP比值失衡.3个治疗组AⅡ增高幅度明显降低,与盐水组相比AⅡ/ANP比值显著降低,联合组最低.结论 AⅡ/ANP失衡引起肾血管持续收缩,导致肾缺血性损伤,可能参与了烧伤后肾小球滤过功能及肾小管回吸收功能的损害.丹参及β-七叶皂甙钠通过降低AⅡ/ANP的比值,减轻肾内血管的收缩.从而提高肾小球滤过率和改善肾小管的回吸收功能,对烧伤后肾损伤有一定防治作用,联合应用效果更佳.     

留学生教育中病理生理学教学的体会

在留学生医学教育中,理生理学是一门重要的基础学科.结合本校留学生的特点,者对病理生理学教学方式进行了一定的调整,括充分备课,强与学生的沟通;突出教学内容的实用价值,发学生的学习兴趣;培养学生的辩证思维能力;帮助学生构建病理生理学点、线、面知识框架;帮助学生抓住重点、突破难点等.上述教学方法改革极大地提高了病理生理学的教学质量.     

银杏叶提取物EGb761对实验性变态反应性脑脊髓炎的影响

目的:探讨银杏叶提取物EGb761对实验性变态反应性脑脊髓炎的免疫机制的影响。方法:以豚鼠全脊髓均浆与福氏完全佐剂为抗原免疫豚鼠诱导实验性变态反应性脑脊髓炎(experimentalallergicencephalomyelitis,EAE)模型。同时以醋酸泼尼松和EGb761分别于免疫当日开始灌胃,连续5周。分为正常对照组、模型组、醋酸泼尼松治疗组和EGb761治疗组,观察EAE症状并评分。全部动物内眦采血,留取血清,采用双抗夹心酶联免疫吸附法(ELISA法)和放免法测白细胞介素12(IL-12),白细胞介素10(IL-10)含量。第5周后全部动物乙醚麻醉后内灌注固定,取出脑、脊髓,以多聚甲醛固定,石蜡包埋、切片,应用免疫组化法测定转化生长因子-β(transforminggrowthfactor-β,TGF-β)、一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase,NOS)表达。结果:与模型组相比,醋酸泼尼松治疗组和EGb761治疗组推迟了EAE发病,其临床评分在疾病的起始期、高峰期、缓解后的复发期都明显下降(P<0.05);IL-12含量在模型组、醋酸泼尼松治疗组、EGb761治疗组均较正常对照组明显升高(P<0.05),并且与疾病程度正相关(P<0.05);醋酸泼尼松治疗组和EGb761治疗组与模型组比较IL-10明显上升(P<0.05),TGF-β显著升高(P<0.05),NOS显著下降(P<0.05),且IL-10与TGF-β明显正相关(P<0.05)。结论:EG     

生长抑素和栀子联合应用治疗重症急性胰腺炎的实验研究

目的探讨生长抑素联合栀子对实验性急性坏死性胰腺炎(ANP)的治疗作用。方法经胰胆管逆行注射1.5%去氧胆酸钠0.05ml/100g体重建立大鼠ANP模型。实验动物随机分为5组对照组、ANP组、善宁组、栀子组、联合组(善宁 栀子),观察各组3d死亡率、血清淀粉酶、NO、内毒素、TNF-α、IL-6的变化,并对胰腺组织进行病理学检查。结果与对照组比较,ANP组3d死亡率、血清淀粉酶、NO、内毒素、TNF-α、IL-6均明显升高(P<0.05),光镜下胰腺组织病理损害明显;栀子组、善宁组及联合组上述各检测指标均较ANP组明显改善(P<0.05),但以联合组降低最明显(P<0.05)。结论联合应用善宁和栀子治疗ANP有协同作用,疗效优于单一的西药或中药治疗。     

丹参和β—七叶皂苷钠对烧伤后外周血白细胞粘附聚集的调节

目的：探讨丹参和β-七叶皂苷钠对烧伤后外周血白细胞粘附聚集（LAA）的影响及LAA与肺组织损伤的关系。方法：采用大鼠30%TBSAⅢ度烫伤模型。45只大鼠随机分为假烫组，盐水组、丹参组、β七叶皂苷钠组及联合用药组，烫伤后24h取静脉血检测外周血白细胞粘附聚集（LAA）。取肺组织检测髓过氧化物酶（MPO）含量。结果：盐水组，丹参组、β-七叶皂苷钠组及联合用药组外周血LAA、肺组织MPO均升高，盐水组升高最明显，联合用药组最低，外周血LAA与肺组织MPO含量呈正相关。结论：LAA可反映中性粒细胞（PMN）在肺内的聚集程度，丹参及β-七叶皂苷钠均可降低外周血LAA的粘附，聚集，减轻肺损伤，联合用药效果更佳。