RNA干扰抑制cyclin E表达对食道癌细胞Eca-109增殖的影响

目的 探讨利用RNAi技术抑制cyclin E的表达,研究cyclin E在食道癌细胞Eca-109生长、增殖过程中的作用.方法 设计针对cyclin E基因的siRNA序列,合成并克隆入pGFU6/neo质粒中,用脂质体转染法将重组质粒转染Eca-109细胞.采用RT-PCR和免疫印迹试验检测稳定转染的Eca-109细胞中cyclin E的表达水平.台盼蓝排斥法、MTT法、3H-TdR掺人试验、平板克隆形成试验检测干扰cyclin E后对细胞活力以及增殖能力的影响,流式细胞仪测定细胞周期时相分布.Westem印迹检测细胞增殖有关蛋白PCNA、p21、bax和bcl-2表达变化.结果 台盼蓝排斥法、MTT法、3H-TdR掺入试验和平板克隆形成试验显示转染组细胞活力及增殖受到抑制;阻滞在G0/G1期细胞比例增加.Western印迹表明PCNA和bcl-2蛋白表达量下降;而p21蛋白和Bax蛋白表达量上升.结论 沉默cyclin E基因能明显抑制食道癌细胞Eca-109的活力及增殖能力,并且细胞周期被阻滞,机制可能与下调肿瘤细胞内PCNA以及上调p21的表达有关.     

CD4+CD25+调节性T细胞在再生障碍性贫血中的表达及意义

目的:探讨再生障碍性贫血(再障)患者治疗前、后外周血T淋巴细胞亚群、CD4+CD25+T细胞的变化及其临床意义.方法:采用流式细胞术检测23例再障患者治疗前、后外周血T淋巴细胞亚群、CD4+CD25+T细胞的比例,并与健康对照组进行比较.结果:(1)再障患者治疗前CD4+,CD4+/CD8+,CD4+CD25+明显低于健康对照组(P＜0.01),CD8+细胞则明显升高(P＜0.05);重型再障组与慢性再障组比较CD4+CD25+降低,但差异不显著(P＞0.05),CD3+,CD4+,CD4+/CD8+,CD4+CD25+无统计学意义.(2)再障患者治疗后与治疗前相比,CD4+,CD4+/CD8+,CD4+CD25+明显升高(P＜0.01).(3)再障患者治疗有效者与无效者比较CD4+,CD4+/CDs+,CD4+CD25+明显升高(P＜0.01).结论:再障患者存在T淋巴细胞亚群的失调及CD4+CD25+T淋巴细胞的异常表达,且检测外周血T淋巴细胞亚群、CD4+CD25+T细胞有助于了解再障患者的免疫状态、疗效评价及预后判断.     

靶向Id-1基因的RNA干扰对人矽肺癌细胞增殖的影响

目的探讨RNA干扰技术沉默Id-1基因表达后对矽肺癌细胞株增殖能力的影响。方法针对Id-1基因mRNA靶向设计合成短发夹RNA,构建重组pGFU6/neo质粒,重组质粒转染矽肺癌YTLMC-90细胞株。反转录-聚合酶链式反应检测转染后Id-1基因的转录;免疫印迹法检测Id-1,核转录因子NF-κB/p50、NF-κB/p65,Bcl-2,Bax,环氧合酶-2,c-Myc基因,血管内皮细胞生长因子,增殖细胞核抗原,β-actin基因的表达;流式细胞术检测细胞周期的变化;~3H-胸腺嘧啶核苷掺入法、四氮唑蓝法和克隆形成实验检测细胞的增殖活力。结果重组质粒经酶切和测序鉴定,证明靶基因序列正确,质粒构建成功;反转录-聚合酶链式反应和免疫印迹法检测结果表明,矽肺癌细胞转染重组质粒后Id-1基因mRNA转录和蛋白合成都明显下降,Bcl-2、环氧合酶-2、c-Myc、增殖细胞核抗原、血管内皮细胞生长因子等与增殖相关基因表达量下降;细胞周期被阻滞在G_0/G_1期,S期细胞明显减少;细胞活力降低,增殖受到抑制。结论构建的重组质粒能靶向沉默Id-1基因,并抑制YTLMC-90细胞株的增殖能力,因此Id-1基因可以作为人矽沉着病并发肺癌基因治疗的候选靶点。     

不同带教模式在神经内科中的应用效果分析

目的 探讨研究不同带教模式在神经内科的应用效果.方法 将本教学医院2009年5月～2010年4月间到本院实习的护理人员114人分别应用不同带教模式所取得效果进行了回顾分析.结果 在理论知识掌握方面,三组间比较差异无显著意义,但在病历分析及神经系统体格检查方面,两个对照组显著优于另一对照组,以问题为中心的教学方式(PBL...     

多羧化酶缺乏症

多羧化酶缺乏症是一种与生物素相关的常染色体隐性遗传代谢性疾病,表现为依赖生物素的多种羧化酶活性缺失,致血中有机酸聚积,从而导致包括皮肤、神经、免疫、呼吸及消化等多系统损害。如果早期采用生物素治疗,该病预后良好,否则将引起中枢神经系统不可逆的损害,在患病早期即可死于代谢性酸中毒。     

毛细血管扩张性环状紫癜

患者男,42岁. 主诉:双下肢红斑、紫癜伴色素沉着3个月. 现病史:3个月前患者无明显诱因足背出现红色丘疹,呈环形,无明显自觉症状,逐渐增多,自足背向下肢近端蔓延,现已累及膝关节下部.曾在外院就诊,诊断为过敏性紫癜,给予维生素C、酚磺乙胺(止血敏)等药物治疗,未见明显疗效.近2年来患者感到双下肢酸胀,偶尔出现足背水肿.     

2000-2019年上海市新发麻风病例的流行病学特征分析

目的 麻风是由麻风分枝杆菌引起的一种慢性传染病.我国大规模的人口迁徙给上海市的麻风病防控带来了新的挑战.分析2000年至2019年上海市新发麻风病例流行病学特征,为制定防治策略提供依据.方法 对上海市2000年至2019年报告的新发麻风病例的人口学和临床资料进行回顾性流行病学研究,重点关注流动人口麻风病例.结果 上海市...     

穿刺小标本改良石蜡块制作方法及评价

目的: 改良现有琼脂预包埋石蜡包埋法,评价该包埋法对空芯针穿刺活检小标本组织完整性、组织学形态、蛋白质和DNA检测的影响。方法: 取10例口腔黏膜鳞癌空芯针穿刺活检标本,分别进行成型包埋模具的改良琼脂预包埋石蜡包埋法及常规石蜡包埋法,前者缩短脱水时间至3.5 h,后者为12 h。样本处理后,分别行H-E染色、组织学形态、免疫组织化学（IHC）和DNA荧光原位杂交（FISH）等检测,并对检测结果进行对比分析。采用GraphPad Prism 9软件包对数据进行组间t检验。结果: 改良琼脂预包埋法较琼脂预包埋法降低了操作难度,易于推广。与常规石蜡包埋法相比,组织脱水时间显著缩短（P<0.001）,对镜下组织学形态及后续IHC和FISH检测无影响。结论: 改良琼脂预包埋石蜡包埋法满足临床病理诊断对组织处理的要求,是值得推广的空芯针穿刺活检标本组织包埋法。