人端粒酶催化亚基反义RNA重组腺病毒载体的构建与鉴定

背景：人端粒酶催化亚基与c-myc在喉鳞状细胞癌中有密切的相关性。目的：构建含有c-myc启动子的人端粒酶催化亚基的重组腺病毒载体,观察人端粒酶催化亚基在细胞中表达后对细胞增长的影响。方法：按照人工合成中反向转录的方法设计基因合成引物,用复式PCR获得目的片段ashTERT（322bp）。将片段ashTERT克隆到pUC57（2.7kb）克隆载体,然后热激转化到E.coli感受态细胞中,菌检、PCR、鉴定阳性克隆后,菌液放大培养,提取质粒pUC57-ashTERT,然后对质粒进行测序。将目的基因片段亚克隆到穿梭载体pshuttle-CMVneo上,然后构建重组腺病毒质粒pAd-ashTERT。转入293细胞中进行病毒包装、鉴定和滴度测定。结果与结论：提取质粒pUC57-ashTERT,测序符合序列要求。质粒pUC57-ashTERT转入293细胞后,成功构建了有较强感染能力的含人端粒酶催化亚基基因的重组腺病毒载体。     

外周神经刺激器定位行腰丛复合坐骨神经阻滞麻醉在下肢手术中的效果观察

目的观察外周神经刺激器定位行腰丛复合坐骨神经阻滞麻醉在下肢手术中的临床效果。方法将81例拟行单侧下肢手术患者分为2组,对照组40例行蛛网膜下腔阻滞麻醉,观察组41例行外周神经刺激器定位行腰丛复合坐骨神经阻滞麻醉,观察2组患者的感觉神经、运动神经的阻滞起效时间和维持时间,比较2组患者麻醉前和麻醉后5 min、10 min、30 min、60 min的血流动力学指标,记录2组患者的不良反应发生情况。结果 2组患者的感觉神经、运动神经的阻滞起效时间比较差异无统计学意义(P均>0.05),但观察组的感觉神经、运动神经的阻滞维持时间要显著长于对照组(P均<0.05);对照组麻醉后各时间段的血压均显著低于麻醉前(P均<0.05);观察组未发生任何不良反应,对照组16例(40%)出现不良反应,2组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论外周神经刺激器定位行腰丛复合坐骨神经阻滞麻醉起效迅速、麻醉维持时间长、对血流动力学稳定性影响小,且不良反应少,是行下肢手术患者较为理想的麻醉方案,具有较高的临床应用价值。     

三种雾化吸入法在急性喉炎患儿中的应用效果比较

目的:比较三种雾化吸入法应用于急性喉炎患儿的临床效果.方法:将120例急性喉炎患儿随机分为A、B、C三组各40例.A组采用氧驱动雾化吸入法,B组采用空气压缩雾化吸入法,C组采用超声雾化吸入法,三组采用相同的护理方法,观察并比较三组患儿SpO2临床疗效、护士及患儿家属认可情况.结果:A组患儿SpO2临床疗效、护士及患儿家属对吸入治疗的认可均明显高于B组、C组(P＜0.05).结论:对急性喉炎患儿采用氧驱动雾化吸入,能改善患儿的氧合状态和提高疗效,操作护士和患儿家属认可性高,值得推广应用.     

小儿慢性鼻窦炎鼻窦负压置换疗法的护理体会

目的探讨小儿慢性鼻窦炎鼻窦负压置换疗法的护理体会。方法选取2013年8月至2014年8月收治的60例小儿慢性鼻窦炎患儿,将其随机分为观察组和对照组,对照组采用常规护理方式,观察组采用优质护理方式,对比两组患儿治疗起效时间、护理疗效以及并发症发生率。结果观察组患儿的起效时间及并发症发生率优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组的护理总有效率为93.33%,对照组的护理总有效率为90.00%,差异无统计学意义(P>0.05)。结论对行鼻窦置换疗法治疗的慢性鼻窦炎患儿实施优质护理,能够有效缩短治疗起效时间,有利于疾病的恢复,值得在临床上推广应用。     

脑外伤患者高压氧治疗的护理

近年来，随着高压氧治疗广泛应用于脑外伤患者，大大提高了脑外伤患者的治愈率，降低了中枢神经功能障碍的病残率，2001～2004年，我院对76例患者进行高压氧治疗及护理，现将护理体会报告如下。     

GEN－S血细胞分析仪异常细胞报警的可信性分析

目的　探讨COULTERGEN S血细胞分析仪异常细胞报警的可信性。方法　将 5 77例GEN S血细胞分析仪报警幼稚细胞 (Blasts)、未成熟粒细胞 (Imm .NE)、异型淋巴细胞 (VariantLY)或有核红细胞 (NRBC)的标本作血涂片 ,经瑞特 姬姆萨混合染色后镜检找异常细胞 ,无异常报警的 2 0 0例标本为对照组 ,分析仪器对异常细胞报警的可信性。结果　有Blasts和Imm .NE报警的真阳性率分别达 6 8.8%和 34.9% ,假阴性率为 0 ;有VariantLY和NRBC报警的真阳性率分别为 10 .5 %和 2 2 % ,假阴性率分别为 3.0 %和 1.5 %。结论　仪器对异型淋巴细胞和有核红细胞的报警并不理想 ,而对幼稚细胞和未成熟粒细胞的报警有较高的可信性。因此 ,对于结果有异常报警的标本必须手工镜检     

人脂肪干细胞脂向分化中长非编码RNA的差异表达

背景：肥胖导致了包括高血压、冠心病、脂肪肝、高脂血症、2型糖尿病在内的诸多疾病,因此深入理解脂肪细胞分化机制对于肥胖的防治具有深远意义。目前对于脂向分化机制的研究多集中在微小RNA上,对于长非编码RNA在脂向分化过程中的作用尚且知之甚少。 目的：获得脂向分化过程中差异倍数明显的长非编码RNA,并进一步筛选在脂向分化过程中可能发挥重要作用的长非编码RNA进行验证。 方法：取人腹部皮下脂肪,采用组织块培养法获取脂肪干细胞,传至第3代后进行成脂诱导分化,通过微阵列技术对脂向分化过程中0,5,12 d长非编码RNA及mRNA差异性表达量进行统计,并结合生物信息学报告筛选出呈现明显差异性表达的长非编码RNA,通过qRT-PCR进行验证。 结果与结论：脂向分化过程中以差异倍数1.5(P < 0.05)为标准,上调长非编码RNA的数量5 d vs. 0 d 748个,12 d vs. 0 d 847个,12 d vs. 5 d 593个;下调长非编码RNA的数量5 d vs.0 d 828个,12 d vs.0 d 1 113个,12 d vs.5 d 750个;结合生物信息学分析结果,在与脂类代谢有关的28个长非编码RNA中根据诱导0,5,12 d差异表达倍数较高且其靶基因可能是已知的与成脂相关的基因中,筛选出3个长非编码RNA：AK304548、BP216319、DA852857。通过PCR验证结果显示AK304548、BP216319及其靶基因表达量呈现先下调后上调的趋势,与微阵列测序结果相符,预示其在脂向分化过程中起到调控作用。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程全文链接：     

高血压病抗凝及张溶活性改变的研究

1 研究对象 1.1 正常对照组59例年龄20～60岁,平均40岁(男30名、女29名)为门诊健康体检者,无心脑血管病、糖尿病、肝脏疾病、一周内未服用抗凝血、抗血小板和抗纤溶药物.     

反应性浆细胞增多症骨髓中出现多核浆细胞的临床意义探讨

目的　探讨反应性浆细胞增多症骨髓中出现多核浆细胞的临床意义。方法　骨髓穿刺涂片常规分类计数浆细胞百分比并观察是否出现多核浆细胞 ;速率散射浊度法检测血清各型免疫球蛋白含量。结果　反应性浆细胞增多症的原发疾病分布在骨髓中出现和未出现多核型浆细胞两者间无明显差异 ;前者骨髓浆细胞百分比 [(7.1± 4 .6 ) % ]、血清IgA水平 [(5 .4± 3.0 ) g/L]及患者年龄 [(5 0 .7± 13.7)岁 ]明显高于后者 [(4.9± 2 .6 ) %、(3.0± 1.78) g/L、(39.8± 16 .0 )岁 ],P <0 .0 5 ) ;前者血清IgG[(2 0 .1± 14 .0 ) g/L]、IgM [(2 .0± 1.0 ) g/L]、总Ig水平 [(2 7.5± 14 .7)g/L]及A/G比值 (0 .9± 0 .5 )与后者 [(17.6± 9.4 ) g/L、(1.9± 1.1) g/L、(2 .3± 9.8)g/L、0 .9± 0 .4 ]无明显差异 (P >0 .0 5 )。结论　反应性浆细胞增多症骨髓中出现多核浆细胞的患者血清IgA水平 ,骨髓浆细胞数明显高于骨髓浆细胞形态正常者的水平 ,提示机体免疫防御机能尤其是粘膜防御功能增强。而且这种细胞生物学异常现象更易出现在年龄高的患者中 ,推测可能与疾病预后不良有关     

术中急性肺栓塞二例

例1,女,36岁,因“左髂骨翼骨折,左胫骨平台骨折”择期行切开复位内固定手术。术前查X线片示：左侧髋臼前柱骨折,左髂骨翼骨折,左耻骨支骨折;下肢超声提示双小腿静脉丛血栓形成,对此未行治疗处理。患者上午10：00人手术室,行L2～3腰-硬联合麻醉,给予0．2％布比卡因10mg,麻醉平面上达T9;给予咪唑安定2mg静注、[第一段]