pcDNA3.1-preS1-GFP重组质粒构建及其小鼠精子表达

目的构建绿色荧光蛋白（GFP）与乙型肝炎病毒（HBV）preS1基因的重组真核表达载体并观察其在小鼠精子内的表达。方法采用PCR方法 ,以HBV全基因组质粒为模板扩增HBVpreS1基因片段,利用DNA重组技术将其定向插入到含有GFP的真核表达载体pcDNA3.1-GFP,经酶切及测序鉴定后,用脂质体介导法转染小鼠精子,在荧光显微镜下观察并应用PCR技术检测HBVpreS1基因的存在与表达情况。结果成功构建了pcDNA3.1-preS1-GFP真核表达载体,将其转染小鼠精子后,在荧光显微镜下观察到转染精子头部有绿色荧光,PCR扩增得到位于HBVpreS1基因区域内长约589bp的片段。结论重组质粒pcDNA3.1-preS1-GFP的成功建立及其在小鼠精子内的表达,为建立新的HBVDNA垂直传递的小鼠模型奠定了实验基础。     

胃去门静脉循环断流术犬模型的建立

目的设计胃去门静脉循环断流术的方法 ,并建立胃去门静脉循环断流术犬模型。方法应用缩窄门静脉主干1/2加丝线慢性栓塞术制作犬肝前型门静脉高压食管静脉曲张模型。然后,实施胃去门静脉循环断流术,即行脾切除后,保留贲门周围血管、食管曲张静脉及迷走神经,从根部离断胃冠状静脉等汇入门静脉系统的胃静脉血管,使胃的静脉血流经门奇间的交通支血管进入体循环。将已形成肝前型门静脉高压食管静脉曲张犬12只随机分为脾切除组、贲门周围血管离断术组、胃去门静脉循环断流术组。于开腹后、手术后即刻及术后3周末测量门静脉及食管曲张静脉压力。术前及术后3周末测定肝功能指标。结果犬模型均存活。手术后即刻及术后3周末与开腹后相比,胃去门静脉循环断流术组门静脉压力显著下降(F=7.386,q=3.503、3.121,P<0.05);食管曲张静脉压力亦显著下降(F=8.026,q=3.661、3.240,P<0.05)。手术前后肝功能指标变化不明显(t=0.268～1.325,P>0.05)。结论胃去门静脉循环断流术犬模型存活率高,制作方法简单易行,模型质量可靠,有助于研究胃去门静脉循环断流术对门静脉血流动力学参数的影响。     

侵袭性垂体腺瘤smac,XIAP,caspase-3的表达

目的 探讨凋亡基因XIAP,caspase-3,smac与侵袭性垂体腺瘤侵袭发生的关系及三者之间的相关性.方法 59例垂体腺瘤手术标本按侵袭性垂体腺瘤综合判定方法 分为侵袭组和非侵袭组,采用免疫组化检测XIAP,caspase-3和smac蛋白的表达,RT-PCR法检测XIAP,caspase-3和smac mRNA的表达,分析侵袭组和非侵袭组XIAP,caspase-3和smac表达水平的差异和相关性.结果 59例垂体瘤患者中,31例为侵袭性垂体腺瘤,28例为非侵袭性垂体腺瘤.,侵袭性垂体腺瘤组的XIAP蛋白和mRNA表达均较非侵袭性腺瘤组增高,而caspase-3和smac蛋白和mRNA表达较非侵袭性腺瘤组降低.Pearson相关分析显示:侵袭性腺瘤组中caspase-3和smac mRNA的表达成正相关(r=0.50,P＜0.01);caspase-3与XIAP mRNA表达呈负相关(r=-0.69,P＜0.01);smac与XIAP mRNA表达呈负相关(r=-0.56,P＜0.01).非侵袭性垂体腺瘤组中XIAP,caspase-3和smac mRNA的表达无明显相关性.结论 XIAP,caspase-3,smac三者相互协同作用,导致垂体腺瘤侵袭性增强,三者可以作为垂体腺瘤侵袭性的有效参考指标.     

应用核糖体展示技术筛选制备抗TNF-α人源抗体的研究

目的:构建人源核糖体展示抗体库,筛选制备抗TNF-α的特异性、高亲和力三结构域抗体(VH/K).方法:应用核糖体抗体库技术,从类风湿关节炎患者的外周血淋巴细胞中分离、构建核糖体展示VH/K基因库;体外转录翻译后,以TNF-α重组蛋白作纯化抗原,采用亲和富集法淘选TNF-α特异性抗体基因;将筛选获得的VH/K基因克隆并在原核系统pET22b(+)/BL21(DE3)中实现可溶性表达;表达产物经进行ELISA鉴定,并对阳性克隆的生物学特性进行初步研究.结果:成功构建了库容量约为6.7×1012核糖体展示VH/K抗体基因库,在180个筛选克隆中,其中两株抗体TRB21、TRB409显示出极高的ELISA值,序列分析表明两株克隆具有全新的人源抗以TNF-α抗体基因,他们不仅可以特异识别TNF-α而且可以抑制以TNF-α对L929细胞的细胞毒性.结论:人源抗TNF-α特异性抗体的获得,为进一步研制抗TNF-α的特异性、高亲和力基因工程抗体奠定了基础.核糖体展示技术为体外筛选制备全人源抗体提供了一种简便、有效的技术平台.     

夯实教学训练基础 锤炼应急救援精兵——武警部队应急救援专业教练员培训纪实

强力推进武警部队应急救援力量建设,全面提升抢险救援能力,3月至5日,     

mTOR与非小细胞肺癌

肺癌是当今世界上严重威胁人类健康与生命的恶性肿瘤,每年有超过100万人死于肺癌。世界卫生组织报告肺癌和艾滋病将是21世纪危害人类健康最严重的两种疾病。近年来随着分子生物学的发展,磷脂酰肌醇3激酶     

二维超声与弹性成像技术在甲状腺癌诊断中的价值

目的:探讨二维超声与弹性成像技术在甲状腺癌诊断中的价值。方法:回顾性分析经手术病理证实的66例81个恶性病灶的二维声像图及超声弹性图表现;二维超声诊断甲状腺癌的指标包括病灶大小、边界、形态、纵横比、内部回声、钙化类型、周边声晕、有无后方衰减等;同时分析81个甲状腺恶性病灶的超声弹性图表现,将图像分为0~Ⅳ级,并与病理结果作对比。结果:根据二维超声诊断指标,将可疑恶性病灶归入恶性组内,二维声像图与病理符合率74.07%;将二维声像图与弹性图联合诊断,则联合诊断指标与病理符合率86.42%,二者比较差异有统计学意义(P0.05)。结论:二维超声和弹性成像技术综合判断肿瘤良恶性,明显提高了超声对甲状腺癌诊断的准确性。     

后腹腔镜肾癌根治术患者围术期机体代谢与创伤应激的变化观察

目的 观察与分析后腹腔镜肾癌根治术患者围术期机体代谢与创伤应激的变化情况.方法 选取行后腹腔镜肾癌根治术治疗的33例患者为观察组,同时选取同期进行开放性肾癌根治术治疗的33例患者为对照组,然后检测与比较2组患者围术期的机体代谢与创伤应激指标.结果 术前2组患者的机体代谢与创伤应激指标均无明显差异(P均＞0.05),而术后第1、3及5天观察组的脂代谢指标及创伤应激指标均低于对照组,蛋白代谢指标均高于对照组,P均＜0.05.结论 后腹腔镜肾癌根治术患者围术期机体代谢与创伤应激的变化幅度小于开放性手术患者,对患者术后机体恢复的促进作用更为明显.     

武汉市老年人超重肥胖流行特征与常见慢性疾病的关系

目的 了解武汉市65岁及以上老年人超重肥胖流行特征及与常见慢性疾病的关系。方法 采用2012年武汉市65岁及以上老年人免费体检数据,对372 990名老年人调查问卷、体格检查、实验室检测和腹部B超结果进行分析。结果 老年人总体超重率29.03%,肥胖率8.36%;城市老年人超重率和肥胖率分别为33.37%和9.98%,高于农村的24.82%和6.78%;女性超重率和肥胖率分别为29.35%和9.87%,高于男性的28.66%和6.62%;随着年龄增长,超重和肥胖率均呈下降趋势。多因素Logistic回归分析结果显示在调整区域、性别、年龄等因素的情况下,体质指数增高是高血压、糖尿病、血脂异常、脂肪肝、冠心病、脑卒中患病的危险因素,是慢性阻塞性肺部疾病的保护因素。结论 武汉市65岁及以上老年人超重和肥胖发生率高,超重与肥胖是高血压、糖尿病等心脑血管疾病和代谢性疾病的的重要危险因素。     

基于住院医师规范化培训的神经外科硕士研究生带教体会

目的 总结基于住院医师规范化培训的神经外科专业硕士研究生临床带教体会。 方法 在带教老师转变带教观念的基础上,对2013-2015年在首都医科大学附属北京天坛医院神经 外科六、七病区进行规范化培训的专业型硕士综合运用多种教学方法,包括通过直接“呈现”的方式 开展医德教育,通过“实践”和“强化”的方式进行临床工作作风和临床实践能力的培养,以及通过 “发现”的方式培养研究生的临床科研能力。 结果 研究期间参加规范化培训的专业型硕士累计20人;期间,其研究生临床能力考核、执业医师 资格考试通过率均达到100%;在教学主管部门对带教研究生的反馈问卷中,关于老师带教意识、带 教能力及效果方面,满意率均为100%。 结论 通过综合运用上述4种教学方式,有助于参加规范化培训的专业型硕士在临床以及科研能力 的提升。