特应性皮炎患者血清过敏原检测

特应性皮炎(atopic dermatitis，AD)是与遗传相关的慢性复发性炎症性皮肤病^[1]。其发病原因和机理目前尚不清楚，一般认为与过敏性疾病的关系密切。我们对2002年1月—2003年8月在我科门诊确诊的100例特应性皮炎患者进行了血清过敏原特异性IgE抗体检测，并与50名正常人对照，现将结果报告如下。     

白癜风患者病程与抗酪氨酸酶抗体的相关分析

目的 应用酪氨酸酶表达肽TYR240-479作为抗原,检测654例白癜风患者血清抗酪氨酸酶IgG抗体水平,分析白癜风患者病程与体内抗酪氨酸酶抗体水平的关联性。方法 以TYR240-479作为包被抗原,应用ELISA法检测白癜风患者血清中抗酪氨酸酶IgG抗体的滴度。不同病程患者抗体阳性检出率的差异以及病程与抗体水平的关联性分析应用卡方检验,多组率的两两比较应用Bonferroni校正。平均滴度差异比较应用one-way ANOVA,组间两两比较应用LSD－t检验。结果 各病程组抗体检测总阳性率具有显著性差异,P＝0.027,r＝0.112。其中病程1～5年（含5年）组与5～10年（含10年）组具有显著性差异,P＝0.007。病程是否超过5年与抗体水平的关联强度分析表明病程与抗体水平有关联,P＝0.025,OR＝1.473,95％CI（1.049-2.068）,但各病程组间抗体平均滴度无显著性差异。 结论 与病程超过5年的患者相比,病程5年之内的患者抗体阳性率更高,与抗体水平的关联更为紧密。白癜风病程与患者抗酪氨酸酶抗体水平有一定的关联性。     

人黑素浓集素受体1抗原表位肽的表达、纯化及其在白癜风患者中的检测

目的 表达及纯化人黑素浓集素受体1抗原表位肽,探讨其在白癜风患者自身抗体检测中的应用。方法 人黑素浓集素受体1抗原表位肽编码基因合成后克隆至原核表达载体pGEX-4T-2,转化大肠杆菌BL21菌株,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导蛋白表达,通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）分析和Western印迹鉴定目的蛋白表达。以提取的黑素细胞膜蛋白作为阻断抗原,进行阻断ELISA分析。以目的蛋白为抗原,检测100例进展期白癜风患者和30例正常人血清IgG抗体情况。结果 成功构建重组表达载体,重组蛋白成功表达并纯化,上样量低于0.0625 μg时纯化率达100％。目的蛋白与白癜风患者血清IgG抗体间的结合能被天然黑素细胞膜抗原抑制。100例进展期白癜风患者血清中有36例与目的蛋白结合反应呈阳性。结论 成功表达并纯化了人黑素浓集素受体1抗原表位肽,该目的蛋白能够结合白癜风患者血清中IgG抗体,可以用于抗人黑素浓集素受体1抗体的检测。     

杭州地区220株外阴阴道念珠菌病的菌种鉴定及药敏试验分析

目的了解杭州地区外阴阴道念珠菌病的菌种类别及药物敏感性.方法采用常规念珠菌培养方法和API 20CAUX方法进行鉴定.药敏试验采用ATB FUNGUS方法.结果220例外阴阴道念珠菌病以白念珠菌为主,检出172例,占78.18%,其次光滑念珠菌17例,占7.73%.念珠菌对伊曲康唑、氟康唑、制霉菌素、两性霉素B、咪康唑、酮康唑、益康唑、5-氟胞嘧啶的敏感性分别为97.73%、96.82%、94.09%、88.64%、73.64%、66.82%、42.32%、23.64%.结论外阴阴道念珠菌病以白念珠菌感染为主,但与以往相比比率有所下降.检测的220株念珠菌对伊曲康唑、氟康唑、制霉菌素、两性霉素B敏感性高,对咪康唑、酮康唑、益康唑、5-氟胞嘧啶的耐药率高.     

黑素细胞移植治疗甲状腺功能异常白癜风的临床观察

【摘要】 目的 探讨自体培养黑素细胞移植治疗甲状腺功能异常白癜风的临床疗效。 方法 白癜风患者分为2组,甲状腺功能异常组30例和无甲状腺功能异常组30例。负压吸疱获取患者正常表皮片,体外培养黑素细胞,经2 ～ 5代体外培养,受皮区应用超脉冲CO2激光磨削去表皮后进行黑素细胞移植。所有患者均至少跟踪观察6个月。 结果 30例甲状腺功能异常患者中,平均复色47%,7例复色面积超过90％,9例复色面积为50% ~ 89％,53.3％达到 > 50%的复色。无甲状腺功能异常组平均复色75%,13例达到 > 90%的复色,11例有50% ~ 89%的复色,痊愈率与有效率分别为43.3%、80%,均较甲状腺功能异常组疗效明显,两组间差异有统计学意义（均P < 0.05）。移植部位位于面颈部、移植面积 > 20 cm2时,组间有效率差异也有统计学意义（均P < 0.05）。表皮吸疱于腰部皮肤的痊愈率与有效率均为最差。 结论 临床或亚临床的甲状腺异常会对白癜风的自体黑素细胞移植疗效产生负面影响。     

银屑I号治疗寻常性银屑病作用机理的临床和实验研究

目的:探讨银屑I号治疗寻常性银屑病的作用机理.方法:用ELISA方法检测银屑I号治疗前后寻常性银屑病患者血清单核细胞趋化蛋白-1(MPC-1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素8(IL-8)表达的变化;用MTT法检测大鼠银屑I号含药血清对HaCaT细胞增殖的影响.结果:银屑病患者治疗后血清MCP-1、TNF-α、IL-8水平较治疗前显著降低,差异有统计学意义(P＜0.01);5%及10%的大鼠银屑I号含药血清对HaCaT细胞的增殖均有显著抑制作用,其中10%含药血清对细胞增殖的抑制最明显.结论:银屑I号治疗银屑病的作用机理可能与下调MCP-1、TNF-α、IL-8的表达有关,银屑I号含药血清对角质形成细胞有显著抑制作用.     

正常人黑素细胞MITF对酪氨酸酶相关蛋白的转录调控研究

目的 研究正常人黑素细胞小眼畸形相关转录因子(MITF)对与黑素生成密切相关的酪氨酸酶相关蛋白(TRPs)家族的转录调控.方法 应用小RNA干扰技术(慢病毒感染),对培养的原代正常人黑素细胞进行MITF基因沉默,然后应用实时定量PCR和免疫印迹方法,分别检测MITF基因沉默前后,MITF、酪氨酸酶(TYR)、酪氨酸酶相关蛋白1(TYRP1)和酪氨酸酶相关蛋白2(TYRP2)的基因与蛋白表达水平.结果 正常人黑素细胞具有显著表达的MITF、TYR、TYRP1和TYRP2; MITF基因沉默后,MITF、TYR和TYRP1的基因表达水平分别下降2倍(P =0.001)、1.5倍(P=0.05)和5倍(P =0.005),TYRP2的表达水平上调3倍(P =0.004);而MITF基因沉默后的MITF、TYR、TYRP1的蛋白表达也显著下降,TYRP2蛋白显著升高.结论 黑素细胞TRPs家族与MITF转录调控密切相关,TYRP2可能存在不依赖于MITF的转录调控.     

InnVit/FBXO11在白癜风中的表达及其对酪氨酸酶输出内质网的影响

目的 通过检测InnVit(即FBX011)在白癜风患者中的表达及其对内质网形态和酪氨酸酶输出内质网的影响,探讨INNVit基因对黑素细胞功能的影响.方法 收集10例表皮片移植白癜风患者皮损区与正常供皮区组织,免疫组化检测InnVit蛋白的表达情况.化学合成InnVit基因特异性siRNA片段及构建过表达质粒载体P3XF-P120,Lipofectamine TM 2000脂质体方法转染BIOBr细胞,电镜观察不同处理组细胞的内质网形态变化;激光共聚焦显微镜观察酪氨酸酶蛋白及钙网蛋白在内质网中的共定位情况;Western印迹检测转染细胞中InnVit蛋白、酪氨酸酶及钙网蛋白的表达水平.结果 10例白癜风患者皮损区InnVit蛋白表达明显低于正常供皮区.未处理组与质粒转染组的黑素细胞内质网形态正常,而siRNA转染组的细胞内质网有明显膨胀,且其相对膨胀率(1.97±0.48)与未处理组(1.28±0.09,P=0.001)和质粒转染组间(1.24±0.13,P=0.001)比较,差异均有统计学意义.未处理组与质粒转染组细胞中酪氨酸酶的表达范围部分地超出了钙网蛋白的标记范围,而siRNA转染组细胞中酪氨酸酶几乎与钙网蛋白共定位于内质网中.siRNA转染组InnVit蛋白的相对表达量(0.030±0.004)低于未处理组(0.320±0.020)和质粒转染组(0.710±0.040),质粒转染组高于未处理组(均P＜0.01);钙网蛋白3组间差异无统计学意义(P＞0.05);siRNA转染组酪氨酸酶(1.040±0.060)高于质粒转染组(0.720±0.030)和未处理组(0.350±0.030),质粒转染组高于未处理组(均P＜0.01).结论 白癜风患者皮损区InnVit蛋白表达下降;InnVit基因的表达影响了黑素细胞内质网的形态,并可以调控酪氨酸酶在内质网中的输出,进而影响黑素细胞的功能.     

窄谱中波紫外线对自体黑素细胞移植治疗白癜风疗效影响的研究

目的:评价不同方式联合窄波UVB照射对于自体黑素细胞培养移植治疗白癜风疗效的影响.方法:将符合纳入标准的稳定期白癜风患者随机分为四组,A组:移植前进行窄波UVB照射20次;B组:移植后予窄波UVB照射30次;C组:移植前予窄波UVB照射20次,移植后再予窄波UVB照射30次;D组:仅进行自体黑素细胞移植,未照射窄波UVB.治疗后至少随访6个月观察复色效果.结果:共治疗221例白癜风患者,移植前后均照光组48例,有81.3％的患者获得90％ ～ 100％的复色,获得5 0％以上复色率的患者达93.8％;移植前照光组54例患者的痊愈率为68.5％,有效率为92.6％;移植后照光组63例患者的痊愈率为61.9％,有效率为88.9％;仅移植未照光组56例,仅有44.6％的患者获得90 ～ 100％的复色,获得50％以上复色率的患者为73.2％.四组的痊愈率和有效率均有统计学差异.结论:体外培养的自体黑素细胞移植治疗稳定期白癜风疗效肯定,用少量供皮区即可治疗大面积皮损,联合窄波UVB治疗可显著提高疗效,其中移植前后均进行窄波UVB照射者效果最佳.     

梅毒胶体金法和TPPA诊断梅毒的比较研究

目前,国内外常用的检测梅毒螺旋体特异性血清试验中,主要有19s-IgM检测、TPHA、TPPA和FTA-ABS等[1].19s-IgM检测具有敏感性和特异性高,便于早期诊断及区别活动期感染或治愈判断[2],但由于IgM分离系统难购且价格贵,尚难在临床广泛使用;梅毒螺旋体荧光抗体吸收试验(FFA-ABS)也有较好的敏感性和特异性[3],但因其实验条件高,需要荧光显微镜设备,故不易普遍推广;TPHA和TPPA是目前最常用的检测梅毒螺旋体抗体的方法.梅毒胶体金(ACON SYP)检测法是一种新的检测梅毒螺旋体特异性抗体的方法,它比TPHA和TPPA操作简便、省时,可在1h内出结果.作者应用TPPA和(ACON SYP),对309例血清样本进行了比较,现报道如下.