血浆置换术治疗巨球蛋白血症1例

应用治疗性血浆置换术 (therapeuticplasmaexchange,TPE)治疗自身免疫性疾病已有报道[1] 。笔者采用TPE技术对巨球蛋白血症进行了系统治疗 ,取得了良好效果 ,现报告如下。1　临床资料患者 ,女 ,6 0岁 ,体重 6 9kg ,巨球蛋白血症病史 8年并糖尿病病史 3年 ,1998年 11月因紫癜 (双下肢为重 )半月而入院治疗 ,体格检查 :贫血貌 ,满月脸 ,眼睑轻度浮肿 ,视力减退 ,行路困难 ,皮肤见散在的淤点 ,双下肢为重 ,肝肋下 2cm ,脾肋下左侧卧位 2cm ,骨髓象报告 :巨球蛋白血症伴继发血小板减少。血常规检查WBC 2 .6× 10 9/L ,RBC 1.71× 10 12 /L…     

IFA和ELISA在肿瘤患者血清SARS-CoV抗体测定中的对比分析

目的探讨酶联免疫吸附试验(ELISA)和间接免疫荧光法(IFA)检测严重急性呼吸综合征(SARS)冠状病毒(SARS-CoY)&体在SARS病原中诊断中的特异性及其在肿瘤患者血清中的假阳性问题。方法 应用ELISA和IFA检测了111例正常对照和40例肿瘤患者血清中SARS-CoV抗体的阳性率。结果在111例正常对照和40例肿瘤患者中,IgM抗体均阴性,IgG抗体在正常对照中的阳性率为3.6%(4/111),在肿瘤患者中的阳性率17.5％(7/40),IgC抗体诊断SARS的特异性为96.4％,两种抗体同时阳性诊断SARS的特异性为100％。经IFA检测,上述SARS-CoV抗体阳性者均为阴性。结论 IFA诊断SARS的特异性为100％,ELISA诊断SARS存在一定的假阳性。应用ELISA测定SARS-CoV抗体时,应同时测定两种抗体以降低诊断的假阳性率,提高诊断的特异性。     

淋巴细胞活化在系统性红斑狼疮发病中的意义

目的 :　探讨系统性红斑狼疮 (SLE)患者外周血淋巴细胞HLA -DR以及植物凝集素 (PHA)刺激下的CD3+ CD4 + 、CD3+ CD8+ 、CD19+ 淋巴细胞的早期活化标志CD6 9的表达。方法 :　应用三色荧光标记流式细胞术检测活动期和非活动期SLE患者外周血CD3+ 、CD3+ CD4 + 、CD3+ CD8+ 淋巴细胞晚期活化标志HLA -DR以及在PHA刺激 4h后CD3+ CD4 + 、CD3+ CD8+ 、CD19+ 淋巴细胞的早期活化标志CD6 9的表达。结果 :　①PHA刺激 4小时后 ,活动期SLECD3+ CD4 + 、CD3+ CD8+ 细胞CD6 9的表达明显低于正常对照组 (P <0 .0 5 ) ;而非活动期SLE与正常对照组之间CD6 9表达无显著性差异 (P >0 .0 5 )。②PHA刺激前SLE活动组CD19+ 细胞表达CD6 9较正常对照组和SLE非活动期明显升高 (P <0 .0 5 ) ,PHA刺激 4小时后 ,活动期SLECD19+ 细胞表达CD6 9低于正常对照组和非活动期SLE ,存在显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,而非活动期SLE与正常对照组之间CD19+ CD6 9+ 表达无明显差异 (P >0 .0 5 )。③活动期SLECD3+ HLA -DR+细胞明显高于正常对照组 (P <0 .0 1)和非活动期SLE(P <0 .0 1) ,CD3+ CD4 + HLA -DR+ 细胞、CD3+ CD8+HLA -DR+ 细胞明显高于正常对照组 (P <0 .0 5 ) ,而非活动期SLE与正常对照组之间 ,HLA -DR表达无显著性差异 (P >0 .0 5     

SATB1与HER2表达和乳腺癌分化程度的相关性

目的 检测特异性核基质结合蛋白(SATB1)和人表皮生长因子受体2(HER2)在乳腺癌中的表达,探讨其与乳腺癌分化程度的关系。方法 应用免疫组织化学方法检测乳腺癌患者SATB1和HER2蛋白的表达,使用荧光原位杂交(FISH)方法检测HER2基因扩增状态,分析二者表达的相关性及与临床病理参数之间的关系。结果 乳腺癌中存在SATB1与HER2的高表达,且二者呈正相关(r=0.425,P＜0.05)。SATB1和HER2的表达与肿瘤组织分级有关,其共表达的肿瘤组织具有更高的组织学分级,与Ⅲ级乳腺癌相关(r=0.472,P＜0.05)。结论 SATB1可调节乳腺癌中HER2的表达,SATB1/HER2双阳性表达是乳腺癌低分化的一个标志。     

分化型胚胎软骨发育基因1特异性小干扰RNA表达质粒的构建和鉴定

背景：分化型胚胎软骨基因1可调控肿瘤生长、凋亡、衰老相关因子,与肿瘤的发生发展有着重要的联系。 目的：构建针对人分化型胚胎软骨基因1的小干扰RNA表达载体。 方法：从NCBI中查找人分化型胚胎软骨基因1基因全长mRNA序列,利用Katahdin提供的在线小干扰 RNA模板序列设计软件,设计针对分化型胚胎软骨基因1的2条shRNA 的 DNA 模板单链,合成靶向分化型胚胎软骨基因1基因转录可形成茎环结构的寡聚核苷酸,退火后与酶切后的pGreenPuro™ shRNA Cloning and Expression Lentivector质粒连接,在JM-109菌株中扩增,并进行质粒DNA琼脂糖凝胶电泳分析、紫外分光光度计检测、菌落PCR以及测序鉴定。 结果与结论：将含有分化型胚胎软骨基因1目标序列25 bp 的双链 DNA插入片段,连接到pGreenPuro™ shRNA Cloning and Expression Lentivector质粒形成重组质粒。质粒DNA琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计分析结果确认所提质粒纯度较高,可用于后续实验。菌落PCR结果表明产物大小约为170 bp,与预期相符。测序结果表明pGreenPuro™ shRNA Cloning and Expression Lentivector质粒已经插入人分化型胚胎软骨基因1的干扰合成片段,无碱基突变。成功构建了靶向分化型胚胎软骨基因1-小干扰 RNA表达载体。     

SARS-CoV-2核酸检测试剂盒的制备及样本混检性能分析

目的 开发一种适用于中国大规模人群新型冠状病毒(SARS-CoV-2)感染筛查的核酸检测试剂盒,分析对多样本混合检测的效果,为临床多样本混合检测提供理论指导.方法 选用SARS-CoV-2的ORF1ab、N 2个靶基因,并加入RNase P作为内标基因进行试剂盒研发.采用单一变量及正交实验优化试剂盒中3个靶基因引物及探...     

SARS-CoV抗体实验诊断中的假阳性原因分析

目的：探讨严重急性呼吸综合征(SARS)冠状病毒(SARS-CoV)抗体在SARS病原学诊断中的假阳性问题。方法：应用酶联免疫吸附试验(EUSA)和荧光定量RT-PCR技术检测了16l例非SARS患者SARS-Cov抗体的阳性率。结果：59例正常对照中，IgG抗体的阳性率为3．4％(2／59)；40例肿瘤患者中，IgG抗体阳性率为17．5％(7／40)；3l例自身免疫病患者中，IgM抗体和IgG抗体阳性率分别为6．5％(2／31)和22．6％(7／31)，IgG抗体和IgM抗体同时阳性为6．5％(2／31)；3l例系统性红斑狼疮(SI正)患者中，IgM抗体和IgG抗体阳性率分别为29．0％(9／31)和58．1％(18／31)，IgG抗体和IgM抗体同时阳性为22．6％(7／31)。IgM和IgG抗体诊断SARS的假阳性率分别为6．8％和21．1％，两种抗体同时诊断SARS的假阳性率为5．6％。经RT—PCR证实上述阳性均为假阳性。结论：两种抗体同时测定可降低诊断的假阳性率，提高诊断的特异性。出现假阳性的原因可能与包被的抗原有关。     

2012~2013年济南市中心医院住院患者血培养病原菌及其耐药情况调查

目的了解我院血培养中所分离病原菌的菌种构成比及其耐药性,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法对我院2012年1月~2013年12月所有血标本按常规方法进行培养、分离、鉴定。采用纸片扩散法进行药敏试验,根据2013年CISI标准判定耐药性。使用WHO细菌耐药性监测中心推荐的WHONET 5.6专业统计软件进行统计分析。结果从2 457份血标本中分离出病原菌194株,分离阳性率为7.90%。包括革兰阳性菌84株(43.30%)、革兰阴性菌93株(47.94%)、单细胞真菌8株(4.12%)及厌氧菌9株(4.64%)。大肠埃希菌构成比最高为26.80%,次为凝固酶阴性葡萄球菌24.23%、金黄色葡萄球菌6.70%、肠球菌10.60%、铜绿假单胞菌6.70%、肺炎克雷伯菌6.19%、阴沟肠杆菌2.06%、单细胞真菌4.12%、厌氧菌4.64%。MRSA及MRCNS分别占金葡菌和凝固酶阴性葡萄球菌的23.10%和76.20%。葡萄球菌属未发现对米诺环素、万古霉素及利奈唑胺耐药株。肠杆菌科细菌未发现对碳青霉烯耐药菌株。铜绿假单胞菌对碳青霉烯类耐药率超过60.00%。结论 2012~2013年我院大肠埃希菌在血流感染中占有重要地位。血培养临床分离菌对常用抗菌药物耐药性仍严重,应合理应用抗菌药物,并加强医院感染控制措施,遏制耐药菌传播。     

内皮前体细胞的临床应用进展

内皮前体细胞（EPCs）是指出生后机体中存在的能特异性归巢于血管新生组织并分化成内皮细胞的一群干细胞，包括从成血-血管干细胞到完全分化的内皮细胞之间一定阶段的细胞群体。研究表明，EPCs可在生理或病理条件下迁移到新血管形成位点并在原位分化成内皮细胞，能快速修复损伤血管。为了解决来源于骨髓和外周循环中EPCs数量过少的问题，Tatiana等对人体骨髓内和外周血中的单个核细胞（MNCs）转化为EPCs的潜能进行了研究，     

免疫治疗前后不明原因习惯性流产患者ACA、封闭抗体表达的变化

目的 探讨健康妊娠妇女与不明原因习惯性流产妇女（unexplained recurrent spontaneous abortion;URSA）免疫治疗前后ACA（抗心磷脂抗体）、APLA（封闭抗体）表达差异,评价ACA、APLA在指导再次妊娠中的作用.方法 采用酶联免疫试验分别测定健康对照组和不明原因习惯性流产患者治疗前后ACA、APLA的变化.结果 免疫治疗后165例不明原因习惯性流产患者有126例再次妊娠,其中妊娠超过6个月的有112例,14例再次发生早期流产不明原因习惯性流产患者治疗前ACA、APLA阳性百分率分别是30.5%（51/165）、9.2%,健康对照妇女ACA、APLA百分率为4.0%、28.0%,健康对照组ACA阳性百分数低于不明原因习惯性流产患者,APLA高于不明原因习惯性流产患者,两组ACA、APLA表达有显著性差异.免疫治疗后不明原因习惯性流产患者封闭抗体阳性百分率为78.3%,与治疗前相比,免疫治疗可增加APLA的表达.免疫治疗后ACA阳性率为26.1%.与治疗前相比ACA没有明显变化.结论 淋巴细胞主动免疫治疗能提高不明原因习惯性流产患者再次妊娠的成功率,APLA对指导习惯性流产患者妊娠及对再次妊娠的结局有良好的参考价值,但ACA不能作为一个独立的指标评价或指导再次妊娠.