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51.
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目的 构建针对人甲胎蛋白(AFP)基因的miRNA表达质粒,为进一步研究AFP基因功能奠定基础.方法 沿mRNA序列寻找连续两个AA及后面的19个核苷酸,通过同源性比较,选择与其他任何基因无同源性的序列即作为潜在的miRNA靶位点,针对AFP基因的编码序列体外合成两段互补的寡核苷酸,与线性化的pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR RNAi EXPRESSION VECTOR载体连接后转化大肠杆菌,扩增、纯化获得所需质粒,以琼脂糖凝胶电泳、PCR及基因测序鉴定其相对分子质量及插入片段的序列.结果 纯化质粒的相对分子质量为5.8 kb,PCR鉴定结果符合目的 条带(260 bp左右)大小,插人的寡核苷酸序列与设计的序列完全相符.结论 成功构建了针对人AFP基因的miRRA表达质粒. 相似文献
53.
目的探讨在急性髓细胞白血病(AML)M4Eo型患者中检测到ETV6基因重排的临床意义。方法对3例AML-M4Eo患者骨髓标本进行细胞培养,制备染色体,分析核型,Split-signal FISH技术分析12p13染色体易位,RT-PCR检测ETV6/ARG融合基因产物。结果核型分析显示3例患者均有inv(16),Split-signal FISH检出12p13染色体易位1例,RT-PCR证实患者ETV6/ARG融合基因产物阳性。这是国际上第2例报道ETV6/ARG融合基因在AML-M4Eo中表达。结论伴有ETV6/ARG融合基因的患者对化疗不敏感,预后较ETV6/ARG融合基因阴性者差。Split-signal FISH是检测ETV6基因重排准确可靠的手段。 相似文献
54.
目的 探讨人类白细胞抗原 (HL A) - B5 1与 Behcet ) 病葡萄膜炎间的相关性。 方法 应用微量淋巴细胞毒试验 ,对 2 7例 Behcet ) 病患者和 30例健康人的 HL A- A和 HL A- B抗原进行研究。应用聚合酶链式反应 -序列特异性引物 (PCR- SSP)技术测定 HL A- B5 1抗原阳性的 Behcet ) 病患者和对照组人群中的HL A- B5 1等位基因 (HL A- B* 5 10 1- B* 5 10 7)。 结果 Behcet ) 病患者和对照组 HL A- B5 1的阳性频率分别为 6 3%和 16 .7% [χ2 =12 .9,P<0 .0 0 1,Pc<0 .0 5 ,相对危险度 (RR) =8.5 ]。在 Behcet ) 病患者中 ,葡萄膜炎的患病率为 4 0 .7% (11/ 2 7) ;72 .7% (8/ 11) Behcet ) 病葡萄膜炎中存在 HL A- B5 1(均为 HL A- B* 5 10 1)。HL A- B5 1和 HL A- B* 5 10 1与 Behcet ) 病葡萄膜炎存在弱相关性 ,但均未见统计学差异 (分别为 RR=2 .0 7,χ2 =0 .75 9,P >0 .2 5 ;RR =2 .6 7,χ2 =1.395 ,P >0 .10 )。 结论 提示 HL A- B5 1(HL A- B* 5 10 1)是Behcet ) 病的易感基因 ,并与葡萄膜炎有一定的相关性 相似文献
55.
SARS-CoV抗体实验诊断中的假阳性原因分析 总被引:3,自引:0,他引:3
目的:探讨严重急性呼吸综合征(SARS)冠状病毒(SARS-CoV)抗体在SARS病原学诊断中的假阳性问题。方法:应用酶联免疫吸附试验(EUSA)和荧光定量RT-PCR技术检测了16l例非SARS患者SARS-Cov抗体的阳性率。结果:59例正常对照中,IgG抗体的阳性率为3.4%(2/59);40例肿瘤患者中,IgG抗体阳性率为17.5%(7/40);3l例自身免疫病患者中,IgM抗体和IgG抗体阳性率分别为6.5%(2/31)和22.6%(7/31),IgG抗体和IgM抗体同时阳性为6.5%(2/31);3l例系统性红斑狼疮(SI正)患者中,IgM抗体和IgG抗体阳性率分别为29.0%(9/31)和58.1%(18/31),IgG抗体和IgM抗体同时阳性为22.6%(7/31)。IgM和IgG抗体诊断SARS的假阳性率分别为6.8%和21.1%,两种抗体同时诊断SARS的假阳性率为5.6%。经RT—PCR证实上述阳性均为假阳性。结论:两种抗体同时测定可降低诊断的假阳性率,提高诊断的特异性。出现假阳性的原因可能与包被的抗原有关。 相似文献
56.
目的 探讨胃癌中DNA甲基化转移酶(DNMT1、DNMT3A、DNMT3B)表达的临床意义与预后的相关性.方法 运用TCGA和GEO数据库分析DNA甲基化转移酶在胃癌和正常组织中的表达差异;运用生存期分析软件Kaplan-Meier plotter分析DNA甲基化转移酶对胃癌患者预后的影响;下载TCGA和GEO数据库中... 相似文献
57.
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作者通过PBR322和λDNA的冻融对照研究表明,至少50kb大小的DNA贮存于冻状态下是安全可靠的,长期贮存于-20℃以下可加强其稳定性,这与传统认识不同,从而为分子生物学试验提供了有效利用DNA的途径。 相似文献
60.
RNA干涉在肿瘤研究中的应用进展 总被引:5,自引:1,他引:4
RNA干涉(RNA interference,RNAi)是生物体内的一种通过双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)来抵抗病毒入侵和抑制转座子活动的自然机制,近来研究发现,21~25nt大小的小干涉RNA(small interfering RNA,siRNA)可在哺乳动物细胞中介导高度序列特异性的基因沉默,并且具有高效性和序列特异性,已经成为功能基因组研究的有力工具,并且有可能在某些疾病如肿瘤等的基因治疗中发挥重要作用。 相似文献