等温扩增法用于孕妇B族链球菌感染筛查的研究

目的建立可用于快速筛查孕妇B族链球菌(GBS)的等温扩增法。方法培养GBS并提取基因组DNA。根据其cfb基因设计LAMP(环介导等温扩增)和RPA(重组酶聚合酶扩增)反应引物,进行目的基因扩增。采集临床标本50份,同时用两种方法进行检测,评价方法的特异性和敏感性。结果 LAMP可在45min完成基因扩增,RPA法可在15min完成目的基因的扩增。二者均具有高度敏感性和特异性,最低检出浓度均为0.01ng DNA/μl。检测50份临床标本LAMP法4份阳性,RRP法5份阳性(其中1份假阳性)。结论 LAMP和RPA均不依赖特定仪器,在恒温条件下即可完成目的基因扩增,以LAMP方法操作更简单、快速,特异性更高,可用于女性孕期GBS感染筛查。     

前炎性细胞因子基因多态性与乙型肝炎病毒感染的关系

目的探讨肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-6（IL-6）基因单核苷酸多态性（SNP）与乙型肝炎病毒(HBV)感染的关系。方法采用基因芯片技术检测150例HBV感染患者（病例组）和不相关联的100例急性乙型肝炎病毒感染自行恢复后对照人群（对照组）中TNF-α-238G/A,-308G/A和IL-6-597G/A,-174G/C,-572G/C位点SNP。结果TNF-α-308GG基因型和G等位基因频率,病例组明显高于对照组（P＜0.01,相对危险度［OR］=6.71及P＜0.01,OR=2.22）;TNF 308AA基因型与抗病毒治疗具有协同作用（P＜0.05,OR=2.91）。未见IL -6和TNF-α其他位点的SNP与病例组有任何相关性。结论TNF-308GG基因型及其等位基因G与乙型肝炎病毒感染易感性相关,而TNF-308AA基因型则与抗病毒治疗具有协同抗病毒作用。     

调节组蛋白乙酰化修饰对肝癌细胞浸润转移的影响

目的探讨应用组蛋白脱乙酰酶抑制剂VPA调节组蛋白乙酰化水平对肝细胞性肝癌细胞侵袭、迁移能力的影响及其可能作用机制。方法采用肿瘤细胞体外迁移实验和Tanswell小室体外侵袭模型评价组蛋白脱乙酰酶抑制剂丙戊酸钠对HepG2细胞浸润转移能力的影响。进一步应用间接免疫荧光技术检测HepG2细胞中MMP-2、MMP-9的表达来探讨其作用机制。结果细胞培养24小时后,对照组迁移细胞数目较多,而0.75~4.0mmol/L丙戊酸钠试验组细胞迁移数目随药物浓度升高而逐渐减少(p<0.001);对照组穿过聚碳酯膜细胞数目明显高于药物实验组,差异具有显著意义(p<0.001);与对照组比较,试验组MMP-2、MMP-9蛋白表达被明显下调,并且与肿瘤细胞迁移、侵袭的变化密切相关。结论应用组蛋白脱乙酰酶抑制剂逆转染色体组蛋白低乙酰化水平可显著抑制肝癌细胞侵袭转移,下调金属基质蛋白酶(MMP-2、MMP-9)表达可能是其发挥作用的主要机制之一。     

重组人生长激素对烧伤大鼠肠道细菌/内毒素移位的影响

目的观察早期应用重组人生长激素（recombinant human growth hormone, rhGH）对严重烧伤大鼠肠道细菌/内毒素移位的影响。方法30只成年雄性Wistar大鼠随机分为对照组、烧伤组和rhGH 3组。后2组造成25%总体表面积（TBSA）Ⅲ度烫伤,立即腹腔注射地塞米松80mg/kg,伤后2h分别给予等渗盐水和rhGH 1.33 IU/kg。伤后8、24h,观察肠道细菌移位频率、门静脉与腔静脉血清内毒素含量、腔静脉血清肿瘤坏死因子（TNF）α含量和肝功能变化。结果rhGH组肠道细菌移位频率和组织细菌含量均明显低于烧伤组（P<0.05）,与对照组比较差异无统计学意义（P>0.05）;rhGH组门、腔静脉内毒素含量明显低于烧伤组（P<0.01）;腔静脉TNFα含量和肝功能指标明显低于烧伤组（P<0.01,P＜0.05）。结论早期应用大剂量rhGH能有效减轻严重烧伤后肠道细菌/内毒素移位,减少炎性介质释放,保护脏器功能。     

Cag A阳性幽门螺杆菌对胃癌细胞lncRNA DLEU2表达及上皮间质转化的影响

目的 探讨细胞毒素相关蛋白A(Cag A)阳性幽门螺杆菌（Hp）对胃癌细胞长链非编码RNA淋巴细胞白血病缺失基因2(DLEU2)表达及上皮间质转化的影响。方法 体外培养胃癌细胞系HGC-27、AGS、MGC-803、MKN-28以及正常胃黏膜上皮细胞系GES1，采用RT-qPCR法检测DLEU2表达，并选择DLEU2表达最高的胃癌细胞进行后续实验。将Hp NCTC标准菌株26695或11637分别与正常胃黏膜上皮细胞和胃癌细胞共培养0、3、9、12 h，采用RT-qPCR法检测DLEU2表达。采用Western blotting法检测与NCTC 26695或11637共培养3、9、12 h正常胃黏膜上皮细胞和胃癌细胞Cag A表达以及共培养3、9、12 h神经钙黏着蛋白（N-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）表达。同时，分析与NCTC 26695或NCTC 11637共培养的胃癌细胞DLEU2、Cag A表达与N-cadherin、Vimentin表达的关系。结果 HGC-27、AGS、MGC-803、MKN-28细胞DLEU2相对表达量均高于GES1细胞（P均<0...