双纸片协同法与GNS-506卡法检测超广谱β-内酰胺酶比较

目的比较双纸片协同法与法国生物梅里埃公司VITEK GNS-506药敏分析卡法对肠杆菌科细菌所产超广谱β-内酰酶(Extended-spectrum β-Lactamases,ESBLs)的实用性.方法以头孢他啶、头孢噻肟、氨曲南为指示底物的双纸片协同法和GNS-506卡法同时检测临床分离的125株肠杆菌科细菌的ESBLs产生情况.结果从125株肠杆菌科细菌中用双纸片协同法出49株ESBLs阳性;用GNS-506卡法只从95株大肠埃希菌和克雷伯菌属(肺炎克雷伯菌与产酸克雷伯菌)中检出38株ESBLs阳性.两种方法对大肠埃希菌和克雷伯菌属产ESBLs的检测结果x2检验,P＞0.05,结果无显著差异.结论双纸片协同法检测ESBLs操作方便,结果可靠,成本低,检测范围广,在已具备VITEK系统的实验室可作为GNS-506卡法的监测和补充.在一般的实验室适合常规应用.     

临床分离铜绿假单胞菌环丙沙星体外诱导相关耐药基因分析

目的利用环丙沙星诱导全敏感铜绿假单胞菌临床分离株耐药后,检测前后突变频率的变化,分析耐药率的变化及其耐药机制的研究。方法收集临床分离的全敏感铜绿假单胞菌28株,采用低浓度环丙沙星体外诱导方法诱导其对环丙沙星耐药,用E-test检测抗菌药物的MIC值变化,检测诱导前后突变频率,采用PCR方法检测gyrA、parC和oprD并测序分析,采用qRT-PCR方法检测外排泵mexAB-oprM、mexCD-oprJ和mexXY-oprM诱导前后的mRNA表达水平。结果诱导后有24株菌发生了环丙沙星耐药、亚胺培南、左氧氟沙星、头孢吡肟及头孢噻肟耐药率明显上升,其中有6株细菌转变为多重耐药菌,诱导后突变频率明显高于诱导前(t=-2.57,P=0.01),有6株耐药菌发生了gyrA Thr83(ACC)→Ile(ATC)替换,诱导后有15株菌外排泵mexAB-oprMmRNA高表达,17株菌外排泵mexCD-oprJ高表达,5株菌外排泵mexXY-oprM高表达,6株菌株oprD低表达,且皆发生了多位点核苷酸突变。结论环丙沙星可诱导铜绿假单胞菌多重耐药,并产生oprD广泛有意突变和外排泵高表达对亚胺培南、环丙沙星等抗菌药物耐药,菌株突变频率诱导前后发生明显变化。     

保留完整阴道粘膜的阴道紧缩术围术期的护理

<正>阴道松弛是一种正常的生理现象,常因分娩、外伤及随着年龄增长的自然老化而造成阴道周围肌肉损伤、括约肌功能减退,粘膜皱襞变少变浅,影响正常的生活及性生活和谐,并给女性患者造成较重的身心压力。所以行阴道紧缩术是解决松弛的有效方法[1]。我科自2009年1月～2012年1月为34例患者行保留完整阴道粘膜的阴道紧缩术,通过加强围术期的护     

涂片、培养、PCR三种方法检测淋病奈瑟菌比较

涂片、培养、ＰＣＲ三种方法检测淋病奈瑟菌比较杨锦红（温州医学院附属二院检验科，浙江温州３２５０００）孔海深，李雪芬（浙江医科大学附属一院检验科）１材料与方法１．１标本采取来源于浙医大附属一院门诊性病疑似病人。同时取尿道（男性）或宫颈（女性）分泌物３份...     

亚抑菌浓度三代头孢菌素对耐药质粒接合转移的影响

目的:探讨不同亚抑菌浓度三代头孢菌素对耐药质粒接合转移的影响。方法:研究不同亚抑菌浓度头孢噻肟(0μg/ml、4μg/ml8、μg/ml、16μg/ml3、2μg/ml)及头孢他啶(0μg/ml、2μg/ml、4μg/ml、8μg/ml、16μg/ml)在不同作用时间下供体菌(临床分离的携带CTX-M型基因肺炎克雷伯菌株)与受体菌(大肠埃希菌E.coli C600 SMR Lac)接合转移率的变化。结果:在4μg/ml头孢噻肟亚抑菌浓度作用下的接合转移率最高,除头孢噻肟空白组(0μg/ml),接合转移率随头孢噻肟亚抑菌浓度的增加而下降。同样,在2μg/ml头孢他啶亚抑菌浓度作用下的接合转移率最高。除头孢他啶空白组(0μg/ml),接合转移率随头孢他啶浓度的增加而下降。结论:不同亚抑菌浓度三代头孢菌素能影响耐药质粒的转移。临床使用抗菌药物时,应考虑到给药间歇期抗菌药物亚抑菌浓度的变化,及时调整治疗方案,防止细菌耐药性的播散。     

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目的调查温州育英儿童医院小儿下呼吸道感染的病原菌及其耐药性。方法对2003-01—2004-12温州医学院附属育英儿童医院呼吸病区1763例下呼吸道感染患儿的痰液标本经分离培养,做菌株鉴定和药敏试验。结果共分离培养出病原菌715株,总阳性率为40·6%。其中革兰阴性菌448株,占62·7%;革兰阳性菌148株,占20·7%;真菌119株,占16·6%。革兰阴性菌以肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌为主。肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的百分率分别为49·3%和46·5%,较敏感的抗生素为亚胺培南、丁胺卡那霉素、环丙沙星、哌拉西林/他唑巴坦和头孢哌酮/舒巴坦;除铜绿假单胞菌对复方新诺明的耐药率为100%外,铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌对各种抗生素的耐药性均较低。革兰阳性菌中以肺炎链球菌和金黄色葡萄球菌为主。肺炎链球菌对青霉素的耐药率达到71·1%,对环丙沙星和万古霉素敏感,耐药率为0。金黄色葡萄球菌中耐甲氧西林金葡菌(MRSA)占18·0%(9/50),对环丙沙星、左旋氧氟沙星和万古霉素敏感。结论温州地区小儿下呼吸道感染的病原菌以革兰阴性菌为主,肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌为主要病原菌。对抗生素的耐药性较强,临床上应注意对这些菌株的检测,积极防治。     

质粒介导KPC-2型碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌儿童分离株耐药基因研究

目的 研究碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌临床儿童分离株的耐药特点及分子流行病学特征.方法 收集温州医学院附属第二医院2010年7月-2011年6月从儿童标本中分离的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌12株,所有菌株为非重复菌株,菌种鉴定采用全自动微生物分析仪.改良的Hodge试验筛选产碳青霉烯酶阳性菌株,采用PCR法检测KPC、IMP、bla(s)、VIM、SPM和整合酶基因,测序确定基因型.对菌株进行质粒结合试验、质粒消除试验检测质粒的转移性.脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析耐药菌株的同源性.结果 12株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌对庆大霉素、妥布霉素、阿米卡星、环丙沙星、左氧氟沙星、复方磺胺甲噁唑的敏感率分别为8.3％、41.7％、58.3％、8.3％、8.3％、33.3％;12株菌均携带有KPC-2基因,且同时携带有TEM-1和SHV型β-内酰胺酶基因,其中SHV-11-like和SHV-1 2-like各6株;11株携带CTX-M型基因,其中4株为CTX-M-14-like基因,6株CTX-M-15-like基因;2株携带有OXA-10型基因,1株携带有PER-1基因.未检出NDM-1、GIM、SPM、SIM、VIM型碳青霉烯酶基因.12株均为Ⅰ类整合酶基因(int1)阳性.2株通过接合试验把质粒传递给受体菌EC600.所有接合子blaTEM-1基因阳性、超广谱β-内酰胺酶(ESBL)基因阳性及对亚胺培南、庆大霉素、阿米卡星、妥布霉素和头孢噻肟耐药,接合子ESBL基因型与供菌一致.2株菌经质粒消除后对亚胺培南的MIC值均有较大程度降低,消除后KPC-2基因扩增为阴性.12株KPC-2基因阳性菌株经PFGE分成5个基因型,主要为B型和C型.结论 KPC-2型碳青霉烯酶基因已经在儿童肺炎克雷伯菌中播散,常伴随携带多种类型的ESBL基因和Ⅰ类整合酶基因,部分耐药基因可通过质粒播散.     

肺炎链球菌3型相关溶血尿毒症综合征一例临床分析

目的 探讨儿童肺炎链球菌相关溶血尿毒症综合征(SP-HUS)的临床特点.方法 回顾性分析1例3型肺炎链球菌相关HUS患儿的临床、辅助检查特点和随访情况,并复习文献,探讨SP-HUS的诊断要点.结果 患儿女,1.5岁,以发热、咳嗽伴气促5d入院.右肺呼吸音低于左侧,叩诊浊音.辅助检查:血常规示WBC 3.7×109/L,Hb 83 g/L,PLT 11 × 109/L.CRP＞180 mg/L.红细胞形态检查示红细胞大小不一,易见红细胞碎片.尿常规示红细胞计数42.66/HP,尿潜血阳性(+++),尿蛋白(++++).血培养、胸腔积液培养和痰培养均为肺炎链球菌.采用简易棋盘式肺炎链球菌分型试剂盒进行血清型分型证实为3型.Coombs试验示直接抗人球蛋白试验阳性.血补体C3 0.699 g/L,补体C4 0.064 g/L.胸部X线片示右侧胸腔积液,右肺感染.胸部CT示两肺多发感染,右肺下叶多发肺气囊.入院后考虑SP-HUS,予去甲万古霉素针、头孢哌酮舒巴坦针静脉滴注抗感染,连续性肾脏代替治疗,洗涤红细胞纠正贫血等治疗后,血小板恢复正常,溶血停止,贫血纠正,肝肾功能及尿常规正常;肺部病灶好转,直接Coombs试验转阴,补体C3、C4恢复正常.3个月后随访,肝肾功能及尿常规均正常.结论 肺炎链球菌感染出现溶血性贫血、血小板减少、急性肾衰竭、Coombs试验阳性时应考虑SP-HUS可能.肺炎链球菌3型感染与HUS相关.     

产超广谱β-内酰胺酶细菌医院感染危险因素的主成分及逐步回归分析

目的 :研究产超广谱 β -内酰胺酶 (ESBLs)细菌医院感染的危险因素。方法 :用主成分分析和逐步回归分析浙江省 6所医院 185例ESBLs阳性细菌医院感染病例和 185例ESBLs阴性细菌医院感染对照。结果 :主成分分析从 14个危险因素中提取了 5个主成分 ,其方差累积贡献率达 6 0 .2 %。逐步回归分析揭示 3个主成分有显著性意义 ,分别为 :侵袭性医疗操作和三代头孢菌素应用 ;住院时间和抗生素的应用 ;导管检查。结论 :产ESBLs细菌医院感染为多因素所致 ,主要与医院的侵袭性操作及抗生素的使用有关。加强消毒灭菌 ,控制生素的使用有助于减少产ESBLs细菌医院感染的发生     

肺炎链球菌红霉素相关耐药基因与耐药表型的关系

目的了解肺炎链球菌（SPN）临床分离株红霉素耐药基因的流行状况及和耐药表型的关系。方法对2004年12月-2005年10月,住院患儿分离到的43株肺炎链球菌进行红霉素药敏试验,并用PCR法检测与红霉素耐药相关的红霉素核糖体甲基化酶基因（ermB）、主动外排转运基因（mefA）。结果43株肺炎链球菌红霉素药敏试验40株耐药（93.0%）、3株敏感;红霉素ermB基因总检出率为76.7%,mefA基因总检出率为23.3%,3株红霉素敏感肺炎链球菌均未检出ermB基因和mefA基因;40株耐红霉素肺炎链球菌ermB基因和mefA基因的PCR检出率分别为82.5%和25.0%;共有35株肺炎链球菌检出ermB基因或（和）mefA基因,其中单独携带ermB基因的耐药表型为25株,单独携带mefA基因的耐药表型2株,同时携带ermB基因和mefA基因的耐药表型8株。结论ermB基因和mefA基因同时表达或单独表达均可导致红霉素耐药,ermB基因表达是儿童肺炎链球菌对红霉素耐药的主要原因,mefA基因表达是造成对红霉素耐药的次要原因,红霉素已不是治疗肺炎链球菌的有效药物。