中国儿童细菌耐药监测组2019年儿童细菌耐药监测

背景 中国儿童细菌耐药监测组(ISPED)2015年成立后,每年对成员单位的耐药监测数据进行汇总和分析,以此代表中国监测儿童细菌耐药情况.目的 对我国儿童细菌感染和耐药现状进行监测汇总,以期指导儿童抗生素合理应用.设计横断面调查,ISPED要求成员单位统一细菌培养、鉴定方法、抗菌药物敏感实验条件和方法,要求以统一格式上...     

菌尿症标本的直接药敏试验

目的　探讨菌尿症的快速药敏试验方法。方法　涂片镜检每个油镜视野平均菌数≥ 2的标本疑为菌尿症 ,直接进行纸片扩散法药敏试验 ,孵育 16～ 18h后观察结果 ,同时进行标本定量培养和菌落计数 ,得到的纯培养菌株按常规纸片扩散法做比较试验。结果　共检测了 16 6例革兰阴性菌和 5 1例革兰阳性菌菌尿标本 ,直接药敏试验与NCCLS推荐的纸片扩散法的结果比较差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论　对于菌尿标本 ,直接药敏试验是一种快速、简便、经济的方法 ,可在 2 4h内报告初步的药敏结果 ,以供临床早期用药参考     

快速筛选菌尿症-尿涂片镜检法探讨

目的　探讨一种快速筛选菌尿的方法。　方法　用10μl尿液直接涂片,经革兰染色后镜检,同时取10μl尿液做细菌培养及菌落计数。　结果　总计检测1155份尿标本,其中显微镜检查阳性(每个油镜视野平均菌数≥2)且尿培养阳性(菌落计数≥10     

从脑脊液中分离出埃森沙门菌一例

一、病例 患儿，男，19d。因“少吃、少哭、少动3d，发热2d”于2008年12月7日收住温州医学院附属第二医院新生儿科。入院时，体温36．9℃，反应欠佳，前囟3．0cm×3．0cm，平软，颈软，心、肺、腹无异常。计算机断层扫描（CT）示脑低密度灶。白细胞（WBC）8．8×109／L，中性粒细胞占0．78，淋巴细胞占0．18，单核细胞占0．04。     

儿童侵袭性肺炎链球菌病的临床特征及耐药性分析

目的 总结儿童侵袭性肺炎链球菌病(IPD)的临床特征及耐药性资料,以提高对该病的诊疗水平.方法 回顾性分析2004年1月-2009年6月55例IPD患儿的临床资料;采集患儿的血液、脑脊液、腹水、纵隔及软组织引流液标本,经实验室培养、分离、鉴定出64株肺炎链球菌(SP),检测其对青霉素等抗生素的敏感性.结果 55例IPD患儿中男32例,女23例,男女比例为1.39:1.年龄47 d～12岁,其中2岁以下占62%.临床诊断败血症38例(69%);化脓性脑膜炎9例(16%);臀部或颈部脓肿7例(13%);化脓性腹膜炎1例.13例(24%)有基础疾病,以白血病最多见(31%).3例(5%)有外科手术史;3例(5%)合并病毒感染,2例(4%)合并支原体感染.发病以冬春季为主(73%),89%系社区获得性感染.临床治愈40例,好转12例,死亡3例(5%);9例(16%)出现神经系统并发症.各年度侵袭性SP检出率间差异有统计学意义(χ~2=33.93,P<0.01);青霉素中介SP和青霉素耐药SP检出率分别为30%和41%;SP对红霉素和氯林可霉素的耐药率高达94%和88%;多重耐药率达89%.结论 IPD好发于5岁以下尤其是2岁以下儿童,24%患儿存在基础疾病.临床疾病以败血症和化脓性脑膜炎最常见.     

肺炎链球菌的扩增片段长度多态性快速检测方法的建立和应用

目的建立扩增片段长度多态性(AFLP)快速检测肺炎链球菌。方法针对肺炎链球菌的管家基因16SrRNA基因设计特异引物,优化反应条件,建立肺炎链球菌的AFLP检测方法。通过对20株肺炎链球菌和15株非肺炎链球菌进行检测,检验该方法的灵敏度、特异度和实用性。结果活菌计数方法表明建立的AFLP方法检测肺炎链球菌的灵敏度为1.5×103CFU/ml。检测20株肺炎链球菌均为阳性,15株非肺炎链球菌则全部阴性,特异度为100%。结论建立的AFLP方法检测肺炎链球菌灵敏度、特异度高,可用于肺炎链球菌的检测和流行病学调查。     

乙酰胆碱受体阻断剂对脂多糖活化THP-1细胞作用的影响

目的 观察乙酰胆碱受体阻断剂对脂多糖活化人单核细胞白血病细胞THP-1分泌细胞因子的影响,探讨乙酰胆碱通路在脓毒症中作用.方法通过细胞培养,实验细胞为THP-1细胞,分别加入不同浓度银环蛇毒素培养24h后,每孔加入100ng/ml脂多糖,同时做空白对照,CO2孵箱孵育6h,离心取上清液,检测TNF-α和IL-6,结果采用SPSS 17.0进行分析.结果 THP-1呈悬浮生长,使用不同浓度的银环蛇毒单独与THP-1细胞孵育24h后,检测上清TNF-α和IL-6分泌,比较是否加银环蛇毒两组间,P分别为0.71和0.32,结果无显著性差异.加入不同浓度银环蛇毒与THP-1细胞预孵育后,再使用LPS刺激6h,在银环蛇毒浓度为10μmol/L时,TNF-α和IL-6分泌大大增加.结论 银环蛇毒单独不能明显刺激THP-1细胞分泌TNF-α和IL-6,银环蛇毒对THP-1细胞Ach受体封闭存在一个剂量效应.     

临床分离葡萄球菌中mecR1和mec1基因突变缺失研究

目的了解临床分离的耐甲氧西林葡萄球菌携带的mecR1和mec1基因的突变缺失情况,并探讨这种突变和缺失对mecA基因表达和耐药表型的影响。方法收集本院2006年临床分离的葡萄球菌,使用PCR法检测mecA基因和调控基因mecR1和mec1,然后对mec1基因测序并与金黄色葡萄球菌N315株（Genbank登录号：BA000018）携带的mec1基因比对。结果在60株金黄色葡萄球菌、58株表皮葡萄球菌和37株溶血葡萄球菌中检测到mecA基因,但有6株表皮葡萄球菌和4株溶血葡萄球菌的mecA基因仅能用引物mecA2-F、mecA2-R而不能用引物mecAl-F、mecAl-R检测到。金黄色葡萄球菌携带的完整mecR1基因要多于表皮葡萄球菌和溶血葡萄球菌（P〈0．001）,但表皮葡萄球菌与溶血葡萄球菌携带的完整mecR1基因并无差别（P〉0．0125）。mec1基因的缺失突变严重,在155株葡萄球菌中仅有14株（占9％）携带野生型mec1基因,202位点（C→T）的点突变发生在36株中。结论mecA的基因表达在金黄色葡萄球菌中可能主要来自mecR1基因的诱导而在凝固酶阴性葡萄球菌中则来自其他因素;mec1基因的突变缺失在临床分离的葡萄球菌中是一种普遍现象,可能存在一种能绕开mec1基因的抑制作用而使mecA基因表达的机制。     

产ESBL肺炎克雷伯菌中16S rRNA甲基化酶的分布与相关耐药性的研究

目的 调查我院产ESBL肺炎克雷伯菌临床分离株16S rRNA甲基化酶基因的分布以及与耐药谱的关系,并初步探讨其在分子流行病学分析中的作用.方法 收集我院临床2010年3月至9月分离出69株非重复产ESBL肺炎克雷伯菌,采用PCR法检测16S rRNA 甲基化酶基因,并对阳性菌株进行ESBL基因及整合子基因分析,通过DNA直接测序确定.质粒接合试验和质粒消除试验确定16S rRNA甲基化酶基因的传播途径,利用ERIC-PCR技术进行基因分型.结果 69株产ESBL肺炎克雷伯菌中有rmtB阳性菌株20株(28.9％),其中2株同时携带有rmtB和armA.在20株产16SrRNA甲基化酶菌株中,均携带有CTX-M基因,测序显示14株CTX-M-14基因,6株CTX-M-15基因;14株携带有TEM-1基因;8株携带有SHV基因,测序显示5株SHV-12基因,3株SHV-11基因;3株携带有OXA-10基因;3株携带有VBE-1基因.另有12株携带有int1阳性,含有5种不同的耐药基因盒,分别携带drfA25、drfA1、drfA12、aadA1、aadA2、sat和blaVEB-1基因.ERIC-PCR法显示20株16SrRNA甲基化酶基因阳性的肺炎克雷伯菌主要分为5型,A型为优势流行克隆株.质粒接合和消除试验发现A型克隆株KP5和KP16 rmtB均位于一质粒上并通过接合传播.结论 本院产ESBL肺炎克雷伯菌临床分离株中存在16S rRNA甲基化酶基因rmtB的普遍流行,导致对多种氨基糖苷类抗生素高水平耐药.rmtB可通过水平基因传播和克隆传播的两种方式进行播散,并且存在同时产ESBLs、16S rRNA甲基化酶和Ⅰ类整合子的肺炎克雷伯菌的传播.     

革兰阴性菌菌尿症标本的直接药敏试验

目的：探讨革兰阴性菌菌尿症的快速药敏试验方法。方法：涂片镜检每个油镜视野平均菌数≥2的标本，疑为革兰阴性菌菌尿症，直接进行纸片扩散法药敏试验，孵育16－18h后观察结果，同时将标本定量培养和菌落计数，得到的纯培养菌株按NCCLS推荐的纸片扩散法做对照药敏试验。结果：共检测了106例革兰阴性菌菌尿标本，直接药敏试验和NCCLS推荐的纸片扩散法的结果无显著性差异（P＞0．05）。结论：对于革兰阴性菌感染的菌尿标本，直接药敏试验是一种快速、简便、经济的方法，可在24小时内报告初步的药敏结果以供临床早期用药参考。