PCR法快速检测阳性血培养瓶中葡萄球菌属

目的 建立采用聚合酶链反应(PCR)技术从阳性血培养瓶中检测葡萄球菌属的方法.方法 以493例阳性血培养瓶中的细菌为检测对象,采用盐酸胍-苯甲醇法提取细菌DNA,然后以PCR扩增16S rRNA、ssa和mecA基因鉴定葡萄球菌属及其对甲氧西林的耐药性,并将检测结果与传统方法相比较.结果 PCR法检测阳性血培养瓶中葡萄球菌属的时间约为4 h,其较传统方法的24～48 h明显缩短;以传统方法为金标准,其检测葡萄球菌属的灵敏度和特异度达98.6%和100.0%,此外PCR法检测耐甲氧西林葡萄球菌较传统方法也具有明显优势.结论 该方法灵敏度高,特异性强,检测方便快速,适合从阳性血培养瓶中检测葡萄球菌属.     

产超广谱β-内酰胺酶细菌医院感染危险因素的主成分及逐步回归分析

目的 :研究产超广谱 β -内酰胺酶 (ESBLs)细菌医院感染的危险因素。方法 :用主成分分析和逐步回归分析浙江省 6所医院 185例ESBLs阳性细菌医院感染病例和 185例ESBLs阴性细菌医院感染对照。结果 :主成分分析从 14个危险因素中提取了 5个主成分 ,其方差累积贡献率达 6 0 .2 %。逐步回归分析揭示 3个主成分有显著性意义 ,分别为 :侵袭性医疗操作和三代头孢菌素应用 ;住院时间和抗生素的应用 ;导管检查。结论 :产ESBLs细菌医院感染为多因素所致 ,主要与医院的侵袭性操作及抗生素的使用有关。加强消毒灭菌 ,控制生素的使用有助于减少产ESBLs细菌医院感染的发生     

儿科耐甲氧西林葡萄球菌的感染情况及耐药性

目的：分析儿科耐甲氧西林葡萄球菌（MRS）的感染情况及耐药性，为临床治疗和控制MRS提供帮助。方法：用VITEK－32全自动微生物分析仪及GPI，GPS－SV卡检测MRS，收集我院1998－2000年，各病区住院患儿葡萄球菌的感染和药敏情况，进行统计分析。结果：各种标本中MRS的 检出率显著不同 ，血液标本的总检出率为72％，尿液标本中83％－100％的凝固酶阴性葡萄球菌为MRS；脓液标本中金黄色葡萄球菌占83％，30％的菌株为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）。41％的MRS感染发生在肾内科，主要是表皮葡萄球菌，溶血葡萄球菌，松鼠葡萄菌，28％的MRS感染发生在新生儿病区，骨科病区金黄色葡萄球菌的检出率占所有病区总数的46％，有30％的菌株为MRSA，175株MRS菌株对β－内酰胺类抗生素及β－内酰胺酶抑制剂复合制剂全部耐药，对万古霉素全部敏感，环丙沙星，四环素，甲氧苄胺嘧啶／磺胺甲基异恶唑对MRSA敏感率分别为79％，72％，51％，环丙沙星对耐甲氧西林表皮葡萄球菌，溶血葡萄球菌和松鼠葡萄球菌的敏感率分别为60％，43％和83％，对红霉素，氯林可霉素敏感性分别为9％和22％。结论：MRS菌株已经成为主要的感染菌，凝固酶阴性葡萄球菌比金黄色葡萄球菌更常见，对万古霉素全部敏感；对环丙沙星，四环素，甲氧苄氨嘧啶／磺胺甲基异恶唑有一定的敏感性。     

肺炎链球菌红霉素相关耐药基因与耐药表型的关系

目的了解肺炎链球菌（SPN）临床分离株红霉素耐药基因的流行状况及和耐药表型的关系。方法对2004年12月-2005年10月,住院患儿分离到的43株肺炎链球菌进行红霉素药敏试验,并用PCR法检测与红霉素耐药相关的红霉素核糖体甲基化酶基因（ermB）、主动外排转运基因（mefA）。结果43株肺炎链球菌红霉素药敏试验40株耐药（93.0%）、3株敏感;红霉素ermB基因总检出率为76.7%,mefA基因总检出率为23.3%,3株红霉素敏感肺炎链球菌均未检出ermB基因和mefA基因;40株耐红霉素肺炎链球菌ermB基因和mefA基因的PCR检出率分别为82.5%和25.0%;共有35株肺炎链球菌检出ermB基因或（和）mefA基因,其中单独携带ermB基因的耐药表型为25株,单独携带mefA基因的耐药表型2株,同时携带ermB基因和mefA基因的耐药表型8株。结论ermB基因和mefA基因同时表达或单独表达均可导致红霉素耐药,ermB基因表达是儿童肺炎链球菌对红霉素耐药的主要原因,mefA基因表达是造成对红霉素耐药的次要原因,红霉素已不是治疗肺炎链球菌的有效药物。     

中国儿童细菌耐药监测组2018年儿童细菌感染及耐药监测

目的 了解目前中国大陆儿童细菌感染和耐药现状。方法 菌株资料来源于2018年1月1日至12月31日中国大陆11所三级甲等儿童医院。细菌抗生素敏感性试验采用自动化仪器法及KB纸片法,肺炎链球菌青霉素药物敏感试验采用E-test法,结果判断采用美国临床实验室标准化委员会(CLSI)2017年判断标准。结果 共对62 212临床分离株进行监测,革兰阳性菌和阴性菌的比例分别为42.2%和57.8%。前5位分离株分别是:肺炎链球菌(12.9%)、大肠埃希菌(12.4%)、流感嗜血杆菌(11.8%)、金黄色葡萄球菌(10.3%)和卡他莫拉菌(7.2%)。金黄色葡萄球菌是新生儿最主要的致病菌(17.0%)。57.0%的标本来源于呼吸道,其中下呼吸道主要致病菌为肺炎链球菌,上呼吸道主要致病菌为化脓性链球菌。肠杆菌科细菌中耐碳青霉烯类药物(CRE)的比例为8.7%,其中新生儿组CRE检出率远高于非新生儿组(16.8% vs 7.2%)。CRE总体耐药率较高,对Ⅰ~Ⅳ类头孢类和酶抑制剂复合制剂耐药率均>85%。鲍曼不动杆菌中,碳青霉烯类耐药的鲍曼不动杆菌(CR-ab)比例为63.2%,非新生儿组中检出率(69.7%)高于新生儿组(35.2%)。碳青霉烯类耐药的铜绿假单胞菌的比例为27.2%,在新生儿组和非新生儿组检出率分别为25.0%和27.3%,两组差异无统计学意义。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌的比例分别为34.9%和77.3%。化脓性链球菌对青霉素不敏感率0.1%,非脑脊液来源的肺炎链球菌中青霉素不敏感菌株(PNSP)比例为21.3%。流感嗜血杆菌β-内酰胺酶阳性检出率为61.1%。结论 呼吸道感染占儿童细菌性感染的首位。碳青霉烯类耐药菌对多种抗生素呈现高水平耐药,新生儿组CRE比例高于非新生儿组,CR-ab比例低于非新生儿组。     

口腔修复膜材料在牙种植中引导骨再生的临床效果

目的 分析对比不同的口腔修复膜材料对牙种植引导骨再生的临床应用效果.方法 选取400例行牙种植引导骨再生的患者,对其临床资料进行回顾性分析,分为观察组与对照组,各200例.观察组采用海奥口腔修复膜,而对照组采用钛膜,对两种不同的口腔修复膜材料的临床效果进行比较.结果 与对照组进行比较,观察组行牙种植引导骨再生患者的骨厚度、植骨厚度、修复成功率明显要更高,而不良反应发生率则显著要更低,组间对比差异具有统计学意义(P<0.05).结论 海奥口腔修复膜在牙种植引导骨再生手术中有较好的临床效果.     

希木龙假丝酵母菌致新生儿真菌血症的临床特征及同源性分析

目的 分析新生儿希木龙假丝酵母菌真菌血症的临床特征及同源性,以提高对该病的诊断和治疗水平,为该菌感染防控提供依据。 方法 对2014年5-10月间温州医科大学附属第二医院新生儿科15例希木龙假丝酵母菌败血症患儿的临床和病原学资料进行回顾性分析。对分离菌株由Vitek2-Compact鉴定和18S rRNA序列测定,用随机扩增多态性DNA(RAPD)进行同源性分析;同时根据医院感染流行病学特征,对患儿周围环境、物品、器材及医护人员的手等进行采样培养。 结果 15例患儿发生希木龙假丝酵母菌血流感染的时间为住院后12~39 d,平均 23 d;均接受中心静脉置管(PICC)。8例经伏立康唑治疗15~30 d痊愈,5例使用氟康唑20~30 d治愈,2例家属要求放弃治疗。菌株经仪器鉴定和18S rRNA序列测定确认为希木龙假丝酵母菌。RAPD分型结果显示13株菌株均为同一克隆株。从环境、物品、器械及医护人员的手等处采集的标本均未培养出希木龙假丝酵母菌,但采取积极的医院感染控制措施后未再出现类似病例。 结论 希木龙假丝酵母菌可在住院患儿间进行水平传播,引起新生儿院内交叉感染;PICC是引起新生儿希木龙假丝酵母菌医院感染的独立危险因素;落实院内感染防控措施是关键。      

聚合酶链反应-单链构象多态性技术快速检测脑脊液中病原菌的初步研究

目的探讨聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)快速检测病原菌的可行性,初步评价该法检测脑脊液中病原菌的意义.方法设计通用引物对不同细菌进行PCR-SSCP,同时利用该法直接检测脑脊液中的病原菌,并与细菌培养比较.结果不同细菌的SSCP图谱呈多态性可相互区别;标准菌株和临床菌株的SSCP图谱完全一致;6份化脑的脑脊液,PCR-SSCP检出5份有细菌,而细菌培养只检出1份有细菌;7份病脑两种方法均未检出细菌.结论 PCR-SSCP技术可快速、敏感地检测脑脊液中的病原菌.     

肠致病性大肠埃希菌血清型分布及耐药性分析

目的了解临床病例中肠致病性大肠埃希菌的主要血清型及对抗菌药物的耐药性。方法肠致病性大肠埃希菌的鉴定使用血清学的方法,药敏试验采用K-B法,WHONET5.4软件分析药敏结果。结果1082例标本检出肠致病性大肠埃希菌67例,检出率为6.19%,共分离到7种血清型。在分离到的菌株中,ESBLs的检出率达52.2%。结论肠致病性大肠埃希菌是引起小儿腹泻的一种重要致病菌,应重视对肠致病性大肠埃希菌的检测,根据药敏结果选用合适药物。     

快速筛选菌尿症—尿涂片镜检法探讨

目的：探讨一种快速筛选菌尿的方法。方法：用10μl尿液直接涂片,经革兰染色后镜检,同时取10μl尿液做细菌培养及菌落计数。结果总计检测1155份尿标本,其中显微镜检查阳性（每个油镜视野平均菌数≥2）且尿培养阳性（菌落计数≥10^5cfu/ml)的标本有100份,两者均阴性的有1047份;6份涂片阳性而培养阴性;2份涂片阴性而是性,显示涂片镜检法灵敏度98．0％,特异性99．4％,阳性预示值94．3％,阴性预示值99．8％,结论10μl尿液直接涂片临床检查菌尿症是一种快速、有效、简便的方法。