新生儿黄疸

黄疸是新生儿期最常见的问题之一,新生儿血中胆红素超过5～7mg/dl,即可出现肉眼可见的黄疸。部分高未结合胆红素血症可引起胆红素脑病(核黄疸),严重者病死率高,存活者多留有后遗症。由于新生儿黄疸病因多样,临床表现轻重不一,处理方法也     

粉尘螨变应原第2组分基因的原核表达及生物信息学分析

目的:克隆并原核表达粉尘螨变应原第2组分重组蛋白,鉴定其变应原性,分析其分子特征,为制备用于临床诊治的变应原奠定基础。方法:提取粉尘螨Total RNA,根据国际基因库(AB195580)设计并合成引物,经RT-PCR合成Derf 2全长基因,与pMD19-T载体连接后,热转化至E.coliJM109;将测序正确的Der f 2基因与pET28a(+)Vector连接,转化BL21(DE3),IPTG诱导表达;经镍琼脂糖凝胶FF亲和柱层析,收集各阶段洗脱峰用梯度透析法进行复性,Western blot鉴定重组蛋白的变应原性。用生物信息学软件预测其理化性质、空间结构,并构建分子进化树。结果:RT-PCR成功扩增获得目的基因Der f2,全长441 bp,与参考序列同源性99.3%。将构建的pET28a(+)-Der f 2质粒转化宿主菌E.coliBL21诱导表达,SDS-PAGE电泳显示全细胞和沉淀物中均有蛋白表达。亲和柱层析后获得约3.86 mg重组蛋白纯品,Western blot分析表明其可与哮喘患儿血清IgE发生特异性结合。去除信号肽序列(1～17氨基酸)后,重组蛋白由129个氨基酸组成,相对分子质量为14.076,二级结构由延伸主链(30.82%),无规则卷曲(49.32%),α螺旋(19.86%)组成。该变应原可能位于线粒体,属ML域家族。序列比对显示,粉尘螨和屋尘螨、微角尘螨、梅氏嗜霉螨的相似度依次为88%、96%、83%,此四种螨在上述蜱螨变应原第2组分构建的分子进化树中聚成一簇,支持率达100%。结论:粉尘螨变应原第2组分原核表达获得成功,纯化后获得具有变应原性的重组蛋白,为进一步规模生产该变应原并用于临床诊治奠定基础;生物信息学分析初步获得了该变应原的分子特征,为进一步实验室验证指明方向。     

脑性瘫痪儿童临床分型与合并症的相关性分析

目的 探讨脑瘫患儿临床分型与合并症之间的关系.方法 对394例脑瘫儿童除做一般性检查外,常规做脑电图、脑干听觉诱发电位、Gesell发育量表测试等,然后分析临床分型及合并症之间的关系.结果 394例中语言障碍、癫痫、智力低下、情绪和行为障碍、听力障碍占多数.听力障碍、佝偻病、卵圆孔未闭在不同临床类型脑瘫间差异有统计学意...     

芪莲汤颗粒药物血清抑制链脲佐菌素诱导大鼠胰岛素分泌细胞的凋亡

目的 观察芪莲汤颗粒药物血清对链脲佐菌素(streptozocin,STZ)诱导大鼠胰岛素分泌细胞(INS-1)凋亡的保护作用.方法 采用高、低2个剂量的芪莲汤颗粒药物血清处理INS-1细胞6h后,用3mmol/L的STZ诱导INS-1细胞凋亡;Alamar Blue法检测细胞活性;AnnexinV-异硫氰酸荧光素(f...     

人血丙种球蛋白和甲强龙联合冲击治疗对于流行性乙型脑炎远期疗效观察

血管内皮生长因子（Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF）,也称血管渗透因子（Vascular Permeability Factor,VPF）,是一种以二硫键相连的二聚体糖蛋白化合物。近年来,关于VEGF参与肿瘤生长、转移过程的研究备受关注,本文对VEGF与肿瘤侵袭转移的研究综述如下。     

重组纳米级粉尘螨变应原第1组分的制备及其在哮喘小鼠中的作用研究

目的应用基因工程技术获得纳米级粉尘螨变应原第1组分s-layer/Der f 1,建立重组纳米级变应原的方法。方法利用S-layer/Strep-tag I这一具有自我组装能力的纳米模式母体嵌合粉尘螨变应原第1组分,并置大肠杆菌中表达,用分离纯化获得的表达产物免疫治疗哮喘小鼠,从分子、细胞、组织和器官4个层面证实该重组变应原诱导哮喘小鼠免疫耐受的可能性和有效性。结果采用基因工程技术将球形芽孢杆菌S层蛋白编码基因sllB的3′端去除600 bp后与尘螨主要变应原第1组分Der f 1连接,5′端与Strep-tag I的编码基因连接,成功构建克隆质粒pMD19-T-Strep-tag I/sllB1-2 706 bp/Der f 1,测序正确后,成功构建表达质粒pET28a(+)-Strep-tag I/sllB1-2 706 bp/Der f 1并转化E.coli BL21诱导表达,透射电镜显示该表达产物rDer f 1/S-layer位于工程菌表面,平均粒径为(116.43±14)nm。用获得的重组变应原rDer f 1、rDer f 1/S-layer免疫治疗哮喘小鼠,证实其可改善小鼠肺部炎症,降低支气管肺泡灌洗液中细胞总数、中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和总IgE、螨特异性IgE水平,增加总IgG、螨特异性IgG水平,并上调外周血Th1型、下调Th2型细胞因子表达水平,并以重组纳米级变应原疗效更好,免疫调节作用更强。结论获得了纳米级粉尘螨变应原第1组份重组体,该制品可以诱导哮喘小鼠免疫耐受,具有较强的免疫原性,所建立的纳米级变应原原核表达体系为生产纳米药物和疫苗提供了一个新的途径。     

自拟芪莲汤治疗早期糖尿病肾病43例

目的：观察自拟芪莲汤治疗糖尿病肾病的临床疗效。方法：62例糖尿病患者随机分为两组,消渴丸组19例给予消渴丸10丸,bid;芪莲汤组43例给予自拟芪莲汤,每日1剂。15d为1疗程,连续治疗3个疗程。观察治疗前后空腹血糖（FBG）、糖耐量实验2h血糖（2hPG）、血清胆固醇（TC）和三酰甘油（TG）及24h尿蛋白排泄量,比较两组疗效。结果：消渴丸组空腹血糖控制较好,芪莲汤组在餐后血糖、24h尿蛋白排泄量及血脂控制优于消渴丸组。2组总有效率差异无统计学意义。结论：芪莲汤对糖尿病肾病患者有确切的保护作用。     

社区高血压患者健康教育实施效果观察

目的探讨健康教育对社区高血压患者的效果。方法把社区高血压患者随机分为观察组和对照组,各125例,在药物治疗同时,观察组实施健康教育,观察两组血压达标率、疾病认知和治疗依从性的变化。结果经健康教育后,观察组与对照组疾病认知、治疗依从性、血压达标率比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论健康教育提高了社区高血压患者药物治疗依从性和危险因素的知晓率,从而有效地提高了高血压控制率。     

Dravet综合征3例临床及分子遗传学研究

目的 分析研究Dravet综合征的临床和分子遗传学特点,以期提高对本病的早期诊断。方法 总结分析3例临床疑似Dravet综合征患儿的临床资料,辅助检查特点,应用NGS测序方法一次性检测OMIM数据库中与癫痫相关基因,并采用PCR和Sanger测序法对结果进行验证。结果 临床特点:3例患者均有癫痫持续状态经历,以阵挛发作为主,均于1岁以内发病,其中2例患儿首次发作表现为热性惊厥,3例患儿头颅影像学检查均无异常,1例患儿动态脑电图有轻度异常,3例患儿均对抗癫痫药物治疗反应差;基因型特点:3例患儿均检测到SCN1A基因的杂合突变,其中1例同时检测出GPR98基因突变,结合父母验证结果,3例患儿均为新发突变。结论 Dravet综合征早期多以热性惊厥起病,多有癫痫持续状态,形式以阵挛发作为主,辅助检查多无阳性发现,基因检测有助于早期确诊。