莲房原花青素对高脂血症大鼠瘦素及TNF-α的影响

目的观察莲房原花青素（Proanthocyanidins from Lotus Seedpod,LSPC）对高脂血症模型大鼠瘦素和肿瘤坏死因子（tumornecrosisfactor-α,TNF-α）的影响。方法Wistar大鼠随机分成4组,即对照组（C组）、高脂血症模型组（H组）、LSPC高剂量组（HD组）、LSPC低剂量组（LD组）,除对照组饲普通饲料外,其余各组喂饲高脂饲料并进行干预实验比较。4周后检测大鼠血脂,血清和心肌中瘦素及TNF-α的变化。结果与对照组相比较,H组血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL-C）水平显著升高;血清中瘦素和TNF-α含量明显增高,心肌中TNF-α含量也明显增加,而心肌瘦素含量明显降低。HD组和LD组血清中瘦素和TNF-α含量明显降低,心肌中TNF-α含量也明显降低,而心肌瘦素含量明显升高,但对血脂水平无显著性影响。结论瘦素和TNF-α在高脂血症的病理和生理过程中起着重要作用,LSPC通过增加心肌对瘦素的调节敏感性,降低血清和心肌组织TNF-α含量,控制炎症反应,发挥对心血管系统的保护作用。     

粉尘螨全长cDNA文库的构建及初步鉴定

目的构建粉尘螨全长cDNA文库,为粉尘螨相关基因研究奠定基础。方法用RNAiso Reagent试剂盒提取粉尘螨总RNA,然后以SMART IVTM Oligo-nucleotide和CDSIII/3’PCR Primer为引物,在反转录酶作用下合成cDNA第1链,利用LD-PCR方法合成cDNA第2链。合成的双链cDNA经蛋白酶K消化及SfiⅠ酶切,得到的cDNA克隆入λTripIEx2载体中,构建粉尘螨全长cDNA文库,测定分析文库滴度及插入片段大小。结果成功构建粉尘螨全长cDNA文库。检测cDNA文库未扩增时滴度为7.3×106pfu/ml,文库扩增后滴度为5.0×109pfu/ml,插入片段为0.5~2.5kb,平均1.2kb左右。结论成功构建了高质量的粉尘螨全长cDNA表达文库,所建文库容量及插入片段大小适用于对粉尘螨相关基因的进一步研究。     

粉尘螨变应原第1组分原核表达质粒pCold-TF-Der f 1构建及鉴定

目的建立粉尘螨变应原第1组分全长基因原核表达质粒pColdTFDer f 1。方法以质粒pET-28a(+)Der f 1为模板扩增目的基因Der f 1,克隆至pColdTF DNA载体,转化大肠埃希菌BL21,IPTG诱导表达并用SDSPAGE(十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳)和蛋白印迹法(Western blotting,WB)验证产物。结果 PCR扩增获得Der f 1编码全长基因,成功构建表达质粒pColdTFDer f 1,SDSPAGE和WB验证表明该质粒在大肠埃希菌中正常表达,且基本为可溶性表达。结论成功建立尘螨变应原原核表达质粒pColdTFDer f 1,并成功实现其原核表达,为进一步生产基因工程变应原提供基础依据。     

半夏总生物碱对D-半乳糖所致衰老小鼠学习记忆障碍的改善作用

目的:研究半夏总生物碱(TAPT)对D-半乳糖诱导的衰老小鼠学习记忆的影响并初步探讨其作用机制。方法:昆明种小鼠100只,随机分为5组,即正常对照组,模型组,TAPT低、中、高剂量组(7.5,15,30 mg.kg-1),每组20只。模型组和TAPT组给予120 mg.kg-1的D-半乳糖注射液(sc,每天1次,连续8周),建立学习记忆障碍的衰老小鼠模型,对照组给予等量生理盐水;同时,TAPT各组给予对应浓度的TAPT药液(ig,每天1次,连续8周),对照组及模型组给予等量蒸馏水。采用跳台法和Y迷宫评价法测试TAPT对模型小鼠学习记忆障碍的改善作用,采用比色法测定小鼠脑组织中丙二醛(MDA)的含量,超氧化物歧化酶(SOD)和乙酰胆碱酯酶(AChE)的活性。结果:TAPT低、中、高剂量组小鼠Y迷宫训练时达标所需总次数减少,分别为(21.9±2.9),(20.8±3.2),(19.7±2.8)次;Y迷宫记忆测试时错误次数也明显减少,分别为(3.8±1.4),(3.2±1.7),(1.7±1.1)次;模型组小鼠脑组织SOD活性明显降低(28.98±13.08)U.mg-1,MDA及AChE含量明显增加(2.78±0.21)nmol.mg-1,(1.05±0.16)U.mg-1;经TAPT干预后,各剂量组小鼠脑组织中SOD活性增高(P<0.01),MDA含量明显降低(P<0.01);中、高剂量组AChE含量显著减少(P<0.01,P<0.05)。结论:应用TAPT干预D-半乳糖诱导的衰老小鼠,可明显改善其学习和记忆功能,这可能与其具有抗氧化作用及抑制AChE的活性有关。     

粉尘螨变应原第3组分基因克隆及序列多态性分析

目的获得粉尘螨变应原第3组分(Der f 3)的编码基因并了解其序列多态性。方法根据GenBank已公布的Der f 3核酸序列设计引物,用RT-PCR扩增获得其编码基因,插入pMD19-T载体,进行序列测定和多态性分析。结果获得粉尘螨变应原Der f 3编码基因为780bp。5株Der f 3基因cDNA克隆的核苷酸序列与参考序列(GenBankNo.AY 283291,GenBank No.D63858,GenBank No.EU312162,GenBank No.EU312163)相比,有19处cDNA序列发生突变,但有7处突变至少在3个cDNA克隆中序列一致;推导出氨基酸序列后进行比对,有11处氨基酸序列发生变化,有4处与上述7个位点相一致。结论获得了粉尘螨变应原Der f 3编码基因且证明其序列具有多态性,为进一步开展相关研究奠定了基础。     

儿童异基因造血干细胞移植后细胞免疫重建的临床研究

目的 探讨儿童异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）后免疫重建的临床特性。方法 选取2019年7月至2020年10月接受allo-HSCT且临床资料完整的患儿为研究对象。动态监测患儿移植后第0、14、21、28、60及100 d外周血淋巴细胞亚群（CD3⁺ T细胞、CD4⁺ T细胞、CD8⁺ T细胞、CD16⁺ CD56⁺ NK细胞、CD19⁺ B细胞、CD4⁺ CD25⁺ Treg细胞）绝对计数;将患儿按有无急性移植物抗宿主病（aGVHD）分为non-aGVHD组和aGVHD组,比较两组间淋巴细胞亚群的差异。结果 共75例患儿接受allo-HSCT,其中移植后满100 d、临床资料完整的42例患儿纳入本研究,男20例、女22例,中位年龄5.4（2.8～9.3）岁。移植前后不同时间点之间患儿CD3⁺ T细胞、CD4⁺ T细胞、CD8⁺ T细胞、...     

神经发育障碍患儿致病性拷贝数变异与临床表型分析

目的分析神经发育障碍患儿致病性拷贝数变异(pCNVs)的微缺失和微重复特征与患儿临床表型特点,明确神经发育障碍患儿遗传学病因。方法收集2017年1月至2019年11月安徽医科大学第一附属医院以全面性发育落后、智力障碍等神经发育障碍疾病就诊的患儿,应用全基因组拷贝数变异(CNVs)检测明确存在的pCNVs,总结分析患儿临床表型与pCNVs特点。结果31例患儿存在36处pCNVs,其中微缺失片段24个(占66.67%),微重复片段12个(占33.33%),片段大小320.00 kb^93.26 Mb,平均11.33Mb。pCNVs易发生在15号染色体,为9例患儿9处(占25.00%),其次是8号染色体,3例患儿5处(占13.89%),X染色体,3例患儿4处(占11.11%)。临床表现有运动发育落后的患儿30例(占96.77%),智力障碍22例(占70.97%),语言发育落后22例(占70.97%),伴畸形患儿11例(占35.48%),特殊面容11例(占35.48%)及癫痫8例(25.81%),且多种落后与多系统的异常同时存在。结论对不明原因的神经发育障碍患儿,可应用全基因组CNV方法进行检测,明确其遗传学病因;对pCNVs及所包含的功能基因的分析,可揭示神经发育障碍的遗传学发病机制。     

Duchenne肌营养不良家系临床表型及遗传学分析

目的 分析Duchenne肌营养不良（DMD）患儿家系临床表型与遗传学特点。方法 选择基因检测明确诊断为DMD的7例患儿（6个家系）为研究对象,总结家系临床特征、遗传学特点。结果 6个家系中新发突变2个,母源遗传性4个。家系1先证者同时存在DMD基因1处点突变和1处插入突变,均为新发突变;3个家系为DMD基因点突变,1个家系为DMD基因外显子大片段缺失,1个家系DMD基因外显子大片段重复。所有先证者均具有骨骼肌运动障碍和肌酶改变,最小发病年龄为6个月,临床表型轻重不一;所有先证者心脏彩超检查结果均正常;3例先证者伴有轻度智力障碍。仅家系6先证者母亲具有轻度临床表型。结论 基因检测可作为DMD确诊方法,智力障碍亦是DMD较多伴发的临床表型,早期心肌受累症状不显著,女性携带者可有轻度临床症状。     

院内感染对脑性瘫痪患儿家长心理健康的影响

目的 研究院内感染对脑性瘫痪患儿家长心理健康的影响及干预措施。方法 2014年2月至2015年3月发生院内感染的脑性瘫痪患儿的60位家长设立为研究组,随机选择与之相匹配的60位未发生院内感染的脑性瘫痪患儿家长作为对照组,两组均发放症状自评量表(SCL-90)进行评定,并根据测定结果,结合家庭和社会状况,分析其心理健康影响因素。结果 研究组患儿家长在躯体化(1.67±0.33)、人际关系(1.88±0.39)、焦虑(2.04±0.37)、抑郁(1.92±0.38)、敌对(1.73±0.52)、因子10(1.58±0.31)方面的心理健康因子评分明显高于对照组患儿家长的躯体化(1.43±0.32)、人际关系(1.62±0.31)、焦虑(1.70±0.27)、抑郁(1.68±0.34)、敌对(1.46±0.33)、因子10(1.35±0.29)方面的心理健康因子评分(P<0.05)。结论 患儿发生院内感染时,加重了家长的心理压力。医务人员应有针对性地分析原因并采取相应的策略,消除家长的不良心理,以一种良好的心理状态配合医护人员对患儿进行康复治疗。     

孤独症谱系障碍儿童饮食行为问题的研究

目的探讨孤独症谱系障碍(autism spectrum disorder,ASD)儿童的饮食行为问题,为建立ASD的生活自理能力训练方法提供研究基础。方法实验组为2013年07月-2014年06月于本科就诊的ASD患儿53例,对照组为正常儿童50例,分别对两组儿童的主要照顾者进行饮食行为问题及一般信息调查。结果实验组在进食能力、进食行为、食物选择和喂养行为四个维度不良饮食行为的发生率均高于对照组。实验组咀嚼有困难占32例(60%);不会自己吃饭,需要喂饭的有30例(57%);拒绝一切食物的发生率为8例(15%);而对照组在这三个条目的发生率均为0例(0%)。此外,实验组不能在餐桌进餐、吃饭时间超过30min、需要特定的餐桌/餐具摆放,或需要特定的餐具、不愿尝试新食物等条目的发生率也明显高于对照组。结论饮食行为问题在ASD儿童中普遍存在,且种类多,程度重。因此,饮食行为问题是ASD儿童生活自理能力训练的重要项目之一。