两种DNA的PCR产物克隆入同一载体的构建策略

目的：以克隆小肠结肠炎耶尔森菌强毒力岛可变区首尾区域的双独立片段为例,探讨克隆入同一载体的基因数多于一个时可采取的构建策略。方法：在一个基因A正义引物与另一基因B负义引物的5′端分别设计与克隆载体相匹配的酶切位点,在 B基因正义引物与A基因负义引物的5′端设计相同的酶切位点。分别进行PCR扩增,再通过引物的5′端相同的酶切位点进行两PCR产物的酶切与连接,以连接产物为模板,应用A基因正义引物和B基因负义引物进行PCR扩增,将此次PCR产物经常规方法克隆入载体。     

氨甲喋呤的肝毒性与适宜病例的选择

氨甲喋呤的肝毒性与适宜病例的选择李文全１傅志宜２氨甲喋呤（ＭＴＸ）是免疫抑制剂中的一种代谢拮抗药，常用以治疗顽固性银屑病及皮肌炎、天疱疮类自身免疫病。ＭＴＸ有一定的肝毒性，但与病例的选择不无关系。我们观察了２４例银屑病、１３例皮肌炎、１例天疱疮患者，...