硅胶柱色谱/RP-HPLC/LC-ESI-MS分离纯化鉴定拳卷地钱中芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷

目的:建立分离纯化鉴定拳卷地钱中芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的硅胶柱色谱/RP-HPLC/LC-ESI-MS方法.方法:拳卷地钱叶经过80%乙醇提取后,减压蒸馏,得粗提物.拳卷地钱叶粗提物用甲醇溶解后上硅胶柱,用甲醇-氯仿配比为25:1,25:2,25:3……2:25,1:25混合溶液洗脱,各洗脱液进行RP-HPLC分析,较纯的洗脱液进行LC-ESI-MS分析,为制备分离黄酮类化合物单体提供指导.结果:氯仿与甲醇配比为25:15、25:16、25:17、25:18的洗脱液经过RP-HPLC分析为单一组分,tR为12.1min,与对照品芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷共注射进行RP-HPLC实验,发现峰高增加,tR为12.1min,UV[λmax为336/296(sh)/267nm]和IR光谱与芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷基本一致.LC-ESI-MS测定结果表明,与对照品芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的分子量相同为446.结论:由此可以鉴定该洗脱组分为芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷.     

HPLC法测定止痛胶囊中芍药苷的含量

目的 测定止痛胶囊中芍药苷的含量。方法 采用高效液相色谱法,色谱柱:Nova-pak C₁₈ 3.9mm×150mm;流动相:0.1%磷酸-乙腈(90∶10);流速:1.0ml·min^-1;检测波长:230nm;柱温:20℃。结果 芍药甙在30.62～306.20mg·ml^-1范围内线性关系良好(r=0.9996)。日内、日间差RSD均不超过3%(n=5)。结论 该法可用于止痛胶囊中芍药苷含量的测定。     

广西产铁皮石斛药材多糖含量与生物量变化研究

目的:探讨植物生长调节剂6-BA、GA3处理以及增加光照强度对广西产铁皮石斛多糖含量与生物量变化的影响。方法:(1)统计广西产铁皮石斛各组实验组样品的一、二、三年生枝条数、株高、鲜重、干重等。(2)采用硫酸-苯酚法测定广西产铁皮石斛各个实验组的多糖含量。结果与讨论:6-BA、GA3处理以及增加光照强度都能促进广西产铁皮石斛枝条的株高,并能提高其铁皮石斛多糖的含量,而且能延缓3年生枝条的衰老;但6-BA、GA3处理组也在一定程度上抑制了新生枝芽的萌发,从而降低了产量。     

蛋白质在膜表面的吸附特性及蛋白质存在的溶液环境对小檗碱膜透过行为的影响研究

为探索蛋白质在膜表面的吸附特性以及蛋白质存在的溶液环境对小檗碱膜透过行为的影响,以蛋白质、小檗碱为研究对象,配制模拟溶液,通过低场核磁共振技术、静态吸附实验以及膜分离实验探究蛋白质与陶瓷膜、小檗碱之间可能存在的相互作用,以蛋白质静态吸附量、膜过程相对通量、蛋白质截留率、小檗碱透过率及两者的吸附率为评价指标,同时测定膜过程中膜污染阻力分布、过膜前后粒径分布变化及膜表面电镜扫描(SEM),研究蛋白质在陶瓷膜上的吸附特性及对小檗碱膜过程的影响。结果表明,陶瓷膜对蛋白质具有吸附作用,且吸附模型符合Langmuir吸附模型,在模拟溶液的膜分离过程中,蛋白质是引起膜污染的主要因素,但在1 g·L~(-1)蛋白质的浓度下,蛋白质的存在对小檗碱的膜过程没有显著影响。     

丹参药材中丹参酮ⅡA和丹酚酸B的不同提取方法的探讨

目的：研究丹参药材不同提取工艺的丹参酮ⅡA和丹酚酸B含量高低。方法：采用HPLC法，比较了两种不同提取方法的丹参酮ⅡA和丹酚酸B含量高低。结果：提取方法丹参酮ⅡA和丹酚酸B含量明显高于药典方法。结论：该提取方法节省溶剂，重现性好。     

Survivin、Bcl-2、HPV 16/18在宫颈上皮内瘤变及宫颈癌中的表达及临床意义

目的:研究Survivin、Bcl-2、HPV 16/18在宫颈上皮内瘤变(CIN)及宫颈癌中的表达,探讨三者与宫颈癌的相关性.方法:采用原位杂交法检测正常宫颈组织(对照组)、CIN(CIN组)和宫颈癌(宫颈癌组)中Survivin mRNA及HPV 16/18 DNA的表达.采用免疫组织化学法检测Bcl-2蛋白在各组中的表达.结果:①Bcl-2蛋白、HPV16/18DNA、Survivin mRNA的阳性率在对照组、CIN组、宫颈癌组中逐渐升高,差异有高度统计学意义(P=0.000).②Bcl-2蛋白和Survivin mRNA在宫颈癌的组织分化程度中,低分化组的表达高于高、中分化组(P<0.01),ⅡB～Ⅲ期显著高于I～ⅡA期(P<0.05);Survivin mRNA在淋巴结转移组中高于无淋巴结转移组(P<0.01);Survivin mRNA及Bcl-2与组织类型及肿块类型无关(P>0.05);HPV 16/18感染与宫颈癌组织类型、组织分化程度、临床分期、肿块类型均无关(P>0.05).(③Survivin与Bcl-2及HPV 16/18在宫颈癌中的表达均呈正相关.结论:Survivin、Bcl-2及HPV 16/18在宫颈癌中有异常表达.三者可能与宫颈癌的发生发展有密切关系.     

丹参素结构中醇羟基的修饰与初步活性评价

目的设计合成系列在丹参素醇羟基部位修饰的新衍生物,初步探索醇羟基在丹参素生物活性中的作用。方法丹参素的酚羟基以及羧基经苄基保护后,其醇羟基与相应的基团在不同的催化剂下缩合生成醚键以及酯键化合物,然后脱除保护基得到醇羟基修饰的衍生物。通过体外的心肌细胞氧化损伤模型初步评价新衍生物的生物活性,分析其构效关系。结果合成了11个丹参素新衍生物,并进行了结构确证;活性实验显示,醇羟基上醚键与酯键修饰的衍生物活性均没有明显高于母药丹参素。结论裸露的醇羟基可能是丹参素发挥作用的必需基团。     

经尿道前列腺电切术中电切综合征的预防和治疗体会

目的 探讨经尿道前列腺电切术(TURP)中预防和治疗经尿道电切综合征(TURS)的方法.方法 应用TURP治疗良性前列腺增生(BPH)患者315例,对前列腺体积大、手术时间长者,给予预防性治疗;对出现TURS者,及时给予利尿、补给高渗钠等治疗.结果 本组有11例发生TURS,经过及时积极治疗,病情均得到控制,康复出院.结论 TURS是TURP最严重的并发症,早期合理治疗,术中注意低压灌注、控制手术时间、掌握手术技巧等措施可以有效预防和治疗TURS.     

人骨髓间充质干细胞脑内注射给予食蟹猴的长期毒性研究

目的研究人骨髓间充质干细胞(BMSC)脑内注射给予食蟹猴的长期毒性,为临床试验提供依据。方法24只食蟹猴随机分为对照组(生理盐水)、低剂量组(3×105个细胞/kg)和高剂量组(2.5×106个细胞/kg),每只动物脑内基底节外囊区域定向注射人BMSC2次,间隔3周。注射后观察动物的一般毒性反应,并进行体重、体温、神经功能、心电图、血液学和血液生化学、体液免疫(IgG、IgM)、细胞免疫(CD3、CD4、CD8)、尿液、脑脊液(一般性状、细胞计数、葡萄糖、蛋白质和氯化物含量)及组织病理学等指标测定。结果病理结果显示食蟹猴脑内基底节外囊区域注射人BMSC后,注射部位大脑局部出现组织坏死及炎症反应,对照组、低剂量组和高剂量组的损伤程度和范围呈递增趋势,随着时间推移,各组脑组织病变基本修复,残存少量瘢痕组织。其他各项检测指标均未见有生物学意义的显著改变。结论在本试验条件下,2.5×106/kg的剂量范围内,人BMSC食蟹猴脑内基底节外囊区域注射仅对注射局部大脑组织产生一定的病理损伤,损伤可随着时间推移逐渐修复。     

火炭母醇提物对大鼠急性肝损伤的保护作用研究

目的研究火炭母醇提物对大鼠急性肝损伤的保护作用。方法采用CCl4诱导大鼠急性肝损伤模型,观察火炭母醇提物对大鼠血清中丙氨酸氨基移换酶(ALT)、天门冬氨酸氨基移换酶(AST)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平的影响。结果火炭母醇提物各剂量组均可抑制急性肝损伤大鼠血清中ALT、AST的活性,降低MDA的水平,升高SOD的活性。结论火炭母醇提物对CCl4致大鼠急性肝损伤具有较好的保护作用。