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目的建立基于高通量测序技术的实验动物沙门氏菌检测方法,应用于实验动物沙门氏菌的检测。方法提取小鼠粪便DNA样本,分别针对16S r DNA区域、23S r DNA区域、16S~23S r DNA IS、23S~5S r DNA IS、gyr B优选区域设计通用引物,对各个引物进行测试分析,优化扩增条件并建库,利用Illumina高通量测序技术检测区分42个样本中的沙门氏菌,评价该方法的特异性和稳定性。结果筛选发现沙门氏菌的菌种分类优选区域为gyr B基因,gyr B基因引物序列为FP5’-AACCACCGCAATCAGACCTT3’,FP5’-AGCCACGAAACCTTCACYA-3’。对引物进行优化,确定最佳扩增条件及样品上样量并正式建库,通过高通量测序和序列分析能检测出42个样品中极微量的沙门氏菌,检测方法稳定,灵敏度高,检测限可达0~102的cfu。结论本实验利用高通量测序技术,建立了一套完整检测实验动物沙门氏菌的生物体系,能检测出实验动物体内极微量的沙门氏菌,检测方法稳定性好,灵敏度高,可沿用至其他种类病原微生物的检测。 相似文献
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目的 探讨乳酸、中心静脉血氧饱和度(ScvO2)及静-动脉血二氧化碳分压差(Pv-aCO2)对心脏重症患者院内死亡的预测价值.方法 回顾性分析2018年1月至2019年7月于郑州市第七人民医院心脏重症监护病房住院的患者278例,平均年龄(66.9±14.2)岁,其中男性140例(50.4%),收集患者的临床基本资料.同... 相似文献
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肺系温病是一类常见的外感热病,具有病情变化迅速且症候复杂多样等特点.郭纪生教授是我国著名温病学家郭可明先生的传人,其善治肺系温病,对于肺系温病的治疗,他认为应首辨明病理因素,在临症过程中强调舌诊的重要性,治疗时提倡"急症当以截断扭转"之说,善用石膏清热透达,并灵活运用透邪之法,强调顾护阴津,在临床治疗上取得显著疗效. 相似文献
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