一例Prader-Willi综合征的基因诊断和减重手术治疗

分析一例Prader-Willi综合征的临床表现、基因诊断及相关治疗.对一例临床高度怀疑PWS患者的15q11-q13印迹中心SNRPN基因,外显子α区段中CpG位点进行甲基化特异性聚合酶链反应(MSPCR)扩增,用重亚硫酸盐测序聚合酶链反应(BSPCR)证实;并比较患者在胃袖状切除手术前后的代谢状况.MSPCR提示与正常人比较,患者15q11-q13区域无父源等位基因的扩增产物;BSPCR证实患者SNRPN基因CpG位点完全甲基化;胃袖状切除手术后4个月整体代谢情况和心功能均有改善.MSPCR和BSPCR相互印证可以作为基因诊断PWS的方法,减重手术有望成为此病的主要治疗手段之一.

Abstract：

To investigate the clinical features, genetic diagnosis, and treatment of a patient with Prader-Willi syndrome(PWS). For a case with clinically suspected PWS, methylation specific PCR(MSPCR)amplification was applied to CpG islands of SNRPN(exon α)gene locus in the 15q11-q13. Furthermore, the diagnosis was comfirmed by the method of bisulfite sequencing PCR(BSPCR). Metabolic status before and after the operation of sleeve gastrectomy were compared. Absence of amplification of paternal allele on chromosome 15q11-q13 was detected in the case by MSPCR, different from the normal control. Results of BSPCR further proved a full methylation of CpG islands in the SNRPN gene locus. Four months after sleeve gastrectomy, systemic metabolic status and ventricular function were improved. MSPCR and BSPCR were both consistent with genetic diagnosis of PWS. Weight loss surgery is expected to be a major therapy of this disease.     

甘丙肽对GT1-7细胞GnRH释放的调节作用

目的：GT1-7细胞是替代研究GnRH神经元的理想细胞模型。本实验研究甘丙肽1型，2型受体mRNA在GT1-7细胞中的表达及对GnRH的调节作用。方法：（1）采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法观察甘丙肽受体mRNA在GT1-7中的表达；（2）将不同浓度的甘丙肽以不同时间与GT1-7细胞卵育，用RIA法测定细胞上清液中GnRH含量。结果：（1）GT1-7细胞同时表达甘丙肽1型和2型受体mRNA;(2)甘丙肽能刺激GnRH释放，且呈明显的量效关系。结论：甘丙肽可通过其受体直接作用下丘脑GnRH神经元，而对生殖功能起调节作用。     

男性特发性低促性腺激素型性腺功能减退症3例致病基因分析

目的 对3例特发性低促性腺激素型性腺功能减退症(IHH)患者进行致病基因检测,以探讨其可能存在的致病基因突变.方法 收集临床资料和血标本,并进行详细的实验室检查,采用FUJIFILM QuickGene-610L抽提外周血白细胞DNA,针对目前5个主要的Kallmann 综合征的致病基因和嗅觉正常的IHH(nIHH)致病基因[促性腺激素释放激素受体(GnRHR)基因]采用PCR扩增6个基因的全部外显子.PCR产物直接测序后,采用Auto Assemble 软件比对寻找突变.结果 2例患者诊断为Kallmann综合征,1例患者诊断为nIHH;基因测序结果发现,除了在2例患者中发现了位于内分泌腺源性血管内皮生长因子受体2(PROKR2)基因上的单核苷酸多态性改变外,3例患者均无Kallmann综合征1基因(KAL1),成纤维细胞生长因子受体1(FGFR1),PROKR2和内分泌腺源性血管内皮生长因子2(PROK2),成纤维细胞生长因子8(FGF8)基因的突变,1例nIHH患者也无GnRHR基因突变.结论 IHH是一种在临床和基因水平异质性疾病,对3例IHH患者排除了目前主要致病基因的突变,提示其他基因或致病因素参与此病的发生.